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1、項目免疫球蛋白G（IgG）方法免疫比濁法目錄1．檢測原理2．標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標(biāo)本處理3．試劑3.1試劑3.2校準(zhǔn)血清3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4．儀器5．操作6．計算7．操作性能7.1精密度7.2準(zhǔn)確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8．參考值9．臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理405nm樣本中IGG+試劑中的IGG抗體-----------------大分子免疫復(fù)合物在405nm監(jiān)測生成的復(fù)合物的濁度變化，與樣本中IGG含量成正比。2.標(biāo)本采集與處理2
2、.1受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應(yīng)用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗。應(yīng)囑體檢對象在抽血前24小時內(nèi)不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：不使用抗凝劑。2.
3、4標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min～45min后離心分離血清，在兩小時內(nèi)檢測完畢；如兩小時內(nèi)不能檢測完畢，將離心分離血清置潔凈試管加蓋2-8℃保存。3．試劑3.1試劑：R1：PEG4緩沖液：包含高分子強化劑的磷酸鹽緩沖液。含有0.095%的疊氮化鈉。R2：IgG抗血清，含0.095%的疊氮化鈉。3.2：校準(zhǔn)血清使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司提供的多項免疫類標(biāo)準(zhǔn)液。其中包含免疫球蛋白G的定值。校準(zhǔn)頻次：全點定標(biāo)：試劑換批號使用時或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點定標(biāo)。3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在
4、2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存30天。試劑儲存在18-22℃穩(wěn)定28天，試劑應(yīng)避免污染。試劑R1顏色為無色，試劑R2顏色為無色至淺黃色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。多項免疫類標(biāo)準(zhǔn)液儲存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。第一次開啟后，不要冷凍。在2-8℃下將瓶蓋擰緊保存，標(biāo)準(zhǔn)品可以儲存長達6個星期的時間。4．儀器KONELAB30型號儀器。性能：波長405nm，儀器測定吸光度的靈敏度應(yīng)達到0.001ABS以上。5．操作樣品為血清。本法為免疫比濁法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本
5、檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6．計算計算吸光度的差值（OD2－OD1），并建立標(biāo)準(zhǔn)液吸光度－濃度工作曲線。計算標(biāo)本的吸光度差值，并在工作曲線上讀取濃度值（mg/dL）。如標(biāo)本的吸光度值大于標(biāo)準(zhǔn)液的最大值，則需稀釋標(biāo)本后，重新測量。7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV<2.23%，批間CV<3.56%。7.2準(zhǔn)確度：檢測結(jié)果的相對不準(zhǔn)確度≤±10%。7.3靈敏度：免疫球蛋白G的濃度為644mg/dL時，顯色吸光度約為0.792～0.968。7.4可報告范圍：血清與試劑用量之比為1:150時，測定下限為90mg/dL。7.5
6、特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結(jié)果無明顯影響。8．參考值680~1445mg/dL9．臨床意義IgG是在人體血清中占主導(dǎo)地位的免疫球蛋白。IgG的測定對免疫缺陷和骨髓瘤的判定十分重要。其水平的升高常見于慢性感染和慢性發(fā)炎。IgG是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白，因而對胎兒抵御感染有著特殊的重要性。附錄A:參數(shù)
