鐵皮石斛的脫分化與再分化研究

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1、生物技術(shù)綜合實驗題目：鐵皮石斛的脫分化與再分化研究Title：Dedifferentiationandre-differentiationofDendrobium學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院年級專業(yè)2011級生物技術(shù)學(xué)生姓名丁銘學(xué)號110153322指導(dǎo)教師趙軍完成日期2014年5月9目錄摘要關(guān)鍵詞正文一、鐵皮石斛的概述及其藥用價值--------------------------------------4二、自然生長和繁殖條件-------------------------------------

2、---------4(一)、鐵皮石斛的繁殖特性----------------------------------------4(二)、自然生殖條件----------------------------------------------4(三)、繁殖狀況--------------------------------------------------5三、實驗操作-------------------------------------------------------5(一)、培養(yǎng)基的配

3、制---------------------------------------------5（二）、鐵皮石斛的脫分化與再分化---------------------------------6(三)、觀察實驗結(jié)果---------------------------------------------8四、結(jié)論-----------------------------------------------------------8參考文獻9【摘要】鐵皮石斛為石斛屬珍稀瀕危藥用植物,藥用部分是新鮮或

4、干燥莖,具有益胃生津、滋陰清熱的功效。鐵皮石斛的種子極小、無胚乳,自然條件下需與某些真菌共生才能萌發(fā),很難用實生苗栽培,本文主要介紹通過鐵皮石斛外植體的脫分化與再分化的研究來實現(xiàn)鐵皮石斛的組織培養(yǎng)，從而應(yīng)用到現(xiàn)實中來擴大鐵皮石斛的生產(chǎn)，以便鐵皮石斛的藥用價值能夠得到更好的利用。【關(guān)鍵詞】鐵皮石斛、組織培養(yǎng)、愈傷組織、脫分化、再分化9【正文】一、鐵皮石斛的概述及其藥用價值鐵皮石斛,為石斛屬珍稀瀕危藥用植物,俗稱鐵皮楓斗,又稱黑節(jié)草,屬于蘭科附生蘭類,是一種珍稀的藥用植物和和名貴的室內(nèi)觀賞植物。野生的

5、鐵皮石斛大多分布在東亞、東南亞及澳大利亞等國家和地區(qū)[1]。在我國主要分布于秦嶺、淮河以南的云南、廣西、貴州、浙江等地的山區(qū)。鐵皮石斛的種子極小、無胚乳,自然條件下需要與某些真菌共生才能萌發(fā),很難用實生苗栽培;而傳統(tǒng)的分株、扦插等方式的繁殖率極低,加上人為的過度采挖和破壞生境,其資源已瀕臨滅絕,被國家列為重點保護的藥用植物之一。鑒于鐵皮石斛在我國栽培的地域局限性,規(guī)?；_發(fā)石斛活性物質(zhì)急需要開辟新的途徑。而鐵皮石斛組培以其繁殖規(guī)模大、速度快為優(yōu)勢是生產(chǎn)有效物質(zhì)的一種有前途的途徑和手段,是解決其資源

6、緊缺問題的有效途徑。因此對鐵皮石斛組織培養(yǎng)及其工藝條件的深入研究就具有了非常重要的意義,它不僅具有顯著的經(jīng)濟效益和社會效益,同時也具有顯著的生態(tài)效益。二、自然生長和繁殖條件(一)、鐵皮石斛的繁殖特性鐵皮石斛的種子極為細(xì)小，胚胎發(fā)育不完全，無胚乳組織，在自然狀態(tài)下發(fā)芽率極低，有性繁殖極為困難，生長于懸崖峭壁之陰處，自然產(chǎn)量極為稀少，由于價值不菲，長期以來一直處于過度采挖狀況，其野生資源已瀕臨絕種，被國家列為一級保護植物，野生資源遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足藥材市場的需要，人工繁殖主要靠無性繁殖，從根部不斷分蘗或從上

7、部莖節(jié)處生根長出新的植株[2]，但是產(chǎn)量很低，仍然離市場的需求相差甚遠(yuǎn)。科研人員努力探索人工快繁的方法，取得了不少的進展。(二)、自然生殖條件鐵皮石斛生于海拔2100-2500m的林中樹上或林緣巖石上，或在河溝溝溪山谷旁峭壁上，并常與石葦?shù)忍μ\植物附生在一起，在我國主要分布于廣西"云南"貴州等地[3]，喜陰涼“濕潤”通風(fēng)多霧的小氣候。石斛在14攝氏度時開始生長，20-26攝氏度且空氣濕度大于80%最適宜；在30攝氏度且相對濕度小于50%的情況下，葉脈變黃，葉片下垂，莖現(xiàn)皺縮，如崖縫滲水過多則易爛根

8、致亡。9石斛喜光又怕強陽光直射，忌干燥與高溫[5]。(三)、繁殖狀況鐵皮石斛的有性繁殖極為困難，主要原因包括:（1）其種子極為細(xì)小，胚胎發(fā)育不完全，無胚乳組織，在自然狀態(tài)下發(fā)芽率極低，（2）苛刻的生長環(huán)境，也限制了其有性繁殖,何平榮等［4］研究表明，鐵皮石斛平均自然結(jié)實率為0.31%。鐵皮石斛主要靠根部無性分蘗繁殖而不斷生出新的植株并成叢生長，有時也從上部莖節(jié)處生根長出新植株[3]。三、實驗操作(一)、培養(yǎng)基的配制（a）實驗用品1）、儀器和用品：500ml試劑瓶4個。100ml試劑