油菜的自交和雜交技術(shù)

油菜的自交和雜交技術(shù)

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1、實(shí)驗(yàn)七油菜的自交和雜交技術(shù)一、目的了解油菜的花器構(gòu)造和開(kāi)花習(xí)性;通過(guò)練習(xí),初步掌握油菜的自交和雜交技術(shù)。二、內(nèi)容說(shuō)明1、花器構(gòu)造油菜屬十字花科(Cruciferae)蕓薹屬(Brassica),常異花授粉(甘藍(lán)型和芥菜型,天然異交率一般為5%—10%,最高不超過(guò)30%)或異花授粉(白菜型,天然異交率一般為80%—90%以上)作物。油菜的花序?yàn)榭偁顭o(wú)限花序,由主花序和分枝花序組成。在花序上互生許多單花,花由花柄、花萼、花冠和雄蕊等組成。花瓣4片與花萼4片互生,作十字形排列,稱十字花冠。雄蕊6枚,側(cè)面的一對(duì)為短花絲,中央的兩對(duì)為長(zhǎng)花絲,特稱四強(qiáng)雄蕊。雌蕊由2心皮組成,由假隔

2、膜(胚座框)將子房隔成兩室。胚珠著生在心皮的邊緣,為側(cè)膜胚座。(圖7-1)2、開(kāi)花習(xí)性油菜的開(kāi)花順序是先主花序,而后第一分枝、第二分枝花序依次由上而下開(kāi)放,同一花序的花朵無(wú)論是主花序還是分枝花序都是由下向上依次開(kāi)放。油菜單株花期的長(zhǎng)短因品種、氣候和裁培條件而異,一般為20—30天,每天開(kāi)花時(shí)間一般在上午7時(shí)到12時(shí),以9—11時(shí)開(kāi)花最盛。油菜開(kāi)花散粉的最適相對(duì)濕度為75%—85%,最適溫度約為14—18℃。10℃以下開(kāi)花數(shù)減少,5℃以下一般不開(kāi)花。油菜花的雌蕊較雄蕊先熟,且生活力較強(qiáng),開(kāi)花前后7天內(nèi)柱頭均具有受精能力,但以2—3天內(nèi)受精結(jié)實(shí)率最高。油菜的花粉落在柱頭上4

3、5分鐘后即可萌發(fā),經(jīng)18—24小時(shí)完成受精過(guò)程。3、油菜的自交不親和性在油菜雜種優(yōu)勢(shì)的利用上,可用優(yōu)良的自交不親和系作母本,優(yōu)良品種作父本,產(chǎn)生強(qiáng)優(yōu)勢(shì)的雜交種用于生產(chǎn),以提高油菜的產(chǎn)量。由于甘藍(lán)型和白菜型油菜的自交不親和系具有自交不親和基因,在開(kāi)花前1—2天柱頭上可形成一種由特殊蛋白質(zhì)組成的“隔離層”,它作為一種“感受器”能識(shí)別和阻止相同基因型的花粉發(fā)芽,一般套袋自交很難得到種子,因此自交不親和系的保持和繁殖就必須在柱頭未形成這類蛋白質(zhì)的蕾期選株,并采用人工剝蕾后套袋自交或其它方法進(jìn)行。三、材料儀器藥品1、材料不同甘藍(lán)型油菜(B.napusL.)或白菜型油菜(B.cam

4、pestrisL.)品種。2、儀器用具喉頭噴霧器、剪刀、鑷子、培養(yǎng)皿、玻璃紙袋(10cm×30cm)、回形針、塑料牌、鉛筆。3、藥品試劑70%酒精、10%NaCL。四、方法步驟(一)自交技術(shù)1、選株隔離(1)自交前1天,選具有該品種典型性狀、健壯無(wú)病蟲(chóng)害的植株,用鑷子摘除花序上已開(kāi)放的花朵,然后套袋隔離。(2)次日上午9時(shí)后,取下隔離袋,用鑷子摘下主花序上當(dāng)天開(kāi)放的花朵,置于培養(yǎng)皿中,加蓋,待授粉時(shí)使用。2、剝蕾授粉(1)整序用鑷子摘除同一株上將開(kāi)放的較大的花蕾和花序頂端幼小花蕾,剩下開(kāi)花前2—4天的15—20個(gè)花蕾供剝蕾授粉。(2)授粉用鑷子將花瓣逐一剝開(kāi),使柱頭外露

5、(可以不去雄),隨即用鑷子夾取培養(yǎng)皿中已開(kāi)裂散粉的花藥,在剝開(kāi)外露的柱頭上輕輕涂抹授粉。若有幾個(gè)組合同時(shí)授粉,每授完一個(gè)組合后用70%酒精棉球擦手和鑷子,殺死所蘸著的花粉。3、套袋掛牌授粉后重新套袋,下端袋口斜折,用回形針固定,注意切忌將回形針夾住莖稈,并在花序基部掛上塑料牌,寫明品種代號(hào)或名稱、自交日期和操作者姓名。4、管理授粉套袋后,每隔2—3天提升紙袋,以利花序伸長(zhǎng)和避免穿破紙袋,約1周后取下紙袋,以利角果和種子的發(fā)育。5、收獲待角果成熟后,摘下整個(gè)花序連同塑料牌一起放入尼龍絲網(wǎng)袋中,曬干脫粒后,將種子連同塑料牌一起放入種子袋中,寫明品種代號(hào)或名稱,妥為貯存,并在

6、工作本上作好記錄。除上述剝蕾自交外,近年來(lái)也有探索用噴灑化學(xué)藥劑使隔離層蛋白溶解、沉淀和變性,以克服自交不親和,如用10%NaCl噴灑當(dāng)天開(kāi)放的花朵,5—10分鐘后授以同株上的花粉,也可獲得自交種子。(二)雜交技術(shù)1.父本套袋隔離要雜交前1天,選具有父本品種典型性狀、健壯無(wú)病蟲(chóng)害的植株,用鑷子摘去花序上已開(kāi)放的花朵,然后套袋隔離,以供采粉。2.母本選株整序在父本套袋隔離的同時(shí),選具有母本品種典型性狀、健壯無(wú)病蟲(chóng)害的植株,用鑷子摘去花序上已開(kāi)放的花朵和花序頂端的幼小花蕾,剩下次日即將開(kāi)放(花萼已裂開(kāi)、微露黃色)的10—15個(gè)花蕾供去雄。3.去雄用左手固定花序和花蕾,右手用

7、鑷子分開(kāi)萼片和花瓣,小心地將6枚雄蕊摘去,切勿損傷柱頭和余留花藥,如遇花藥破裂,應(yīng)將該花去除,并將鑷子尖浸入酒精中,以殺死所蘸花粉。4.套袋掛牌待所有花蕾去雄完畢后,立即套上紙袋,下端袋口斜折,用回形針固定。5.授粉授粉于去雄后的當(dāng)天或次日選晴朗天氣進(jìn)行。(1)采粉用鑷子摘取事先已套袋父本花藥已開(kāi)裂的花朵,置于培養(yǎng)皿中,加蓋。(2)授粉取下母本株上的紙袋,用鑷子夾取培養(yǎng)皿中的花藥,在母本柱頭上輕輕涂抹授粉。授粉后立即套袋隔離,掛上塑料牌,寫明組合代號(hào)或名稱、雜交日期和操作者姓名,并在工作本上作好記錄。6.管理收獲和貯藏授粉后的管理、收獲和

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