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1、芳樟組織培養(yǎng)快速繁殖技術香樟（Cinamomumcamphora），樟科樟屬，為亞熱帶常綠闊葉喬木，適生環(huán)境為北緯10ο至30ο之間，屬弱陽性樹種，喜暖熱濕潤的氣候條件，不耐嚴寒，主要分布在我國浙江、福建、湖南、湖北、江西、廣東、云南和臺灣等省，是我國珍貴用材樹種及芳香植物，在林業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位。香樟木材致密美觀，具有香氣抗蟲蛀，可供建筑、造船、家具、樂器、手工藝品之用；香樟枝葉茂密，樹姿雄偉，具有很強的吸塵能力和抗煤煙能力；且系深根性樹種，根系特別強大，主根尤為發(fā)達，有較強的抗風能力，且能吸濕耐水，能防風固沙，保護堤岸，是綠化及環(huán)保優(yōu)良樹種。芳樟是
2、香樟五個天然類型中枝葉含芳樟醇最高的一種。芳樟醇香原料及其派生衍生物的龐大體系在香化產(chǎn)業(yè)中都得到廣泛的應用。據(jù)資料介紹，在世界范圍內(nèi)香化產(chǎn)業(yè)香原料，經(jīng)常被提到使用頻率最高，用量最大的25種香原料中，芳樟醇歷來是名列榜首。芳樟醇制備的相應的衍生物是香化工業(yè)的主要原料，而且芳樟醇又是合成維生素A、E的主要的起始原料。日本1996年統(tǒng)計資料表明，全世界每年對芳樟醇的需要量達到2.8萬多噸，其中天然芳樟醇只占很少部分。目前，優(yōu)質芳樟油國際市場價格為85,000元/噸。合成芳樟醇不論在氣味，香韻，強度，甜潤等主要物化性能上，絕對不能與天然芳樟醇相比。因此，香化科技
3、工作者十分熱衷于采用天然芳樟醇。世界上香料界的有志之士都在用心尋找天然芳樟醇資源。隨著日用化工生產(chǎn)的發(fā)展，多年來對芳樟資源掠奪式利用，使芳樟資源枯渴現(xiàn)象日趨嚴重。經(jīng)驗證明優(yōu)良芳香樟母樹上采集的種子育苗，只有15%植株能保持原母樹優(yōu)良特性；此外，據(jù)建陽香料廠報告，芳樟油中含醇量低的只有30%，高的也不超過80%，特別是樟腦含量高，需要經(jīng)過復雜的化工分離單元操作，才能獲得適用的芳樟油。廈門牡丹香化實業(yè)有限公司科技人員經(jīng)多年潛心探索尋找，終于在1998年6月間，在閩西境內(nèi)武平天然香料廠林產(chǎn)基地幾十萬株香樟林（實際上是雜樟）中發(fā)現(xiàn)了幾株芳樟，含油量高，油中芳樟醇
4、含量達98%，樟腦只含0.16%（國際市場上要求含醇量大了或等于95%，樟腦低于0.5%），而且香氣襲人，氣味純正，稀罕之至，被命名為牡丹1號、2號的純正良種進行組培試驗。通過工廠化組織培養(yǎng)快速繁殖生產(chǎn)，希望按理論上結論能保持品種純正，不變異退化，提供整齊一致純正良種的芳樟苗木，為大規(guī)模推廣種植提供行之有效途徑。二、材料和方法：（一）材料：芳樟頂芽、腋芽。（二）方法：1、消毒及接種：剪取多年生芳樟根莖聯(lián)接處當年生幼態(tài)萌條的嫩芽，洗潔精洗凈，流水沖洗30分鐘。在超凈臺上，先用75%酒精浸泡10秒種，無菌水沖洗一次，然后在加有數(shù)滴吐溫20的0.1%升汞中消毒
5、15分鐘，無菌水沖洗5次。無菌條件下，剝?nèi)グ谀垩客獠康难亏[片，切取長約1cm的頂芽或具節(jié)的莖段為外植體，接種到培養(yǎng)基上，每個培養(yǎng)瓶一個外值體。2、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件：按各培養(yǎng)階段的不同目的設計并篩選出相應的最佳培養(yǎng)基配方。糖和瓊脂含量分別為3%和0.7%，pH：5.8±0.2，培養(yǎng)溫度26±2℃，每天連續(xù)光照12小時，光強度1500Lx。三、結果與分析：1、芽的誘導：將外植體接種在加有不同濃度的生長素和細胞分裂素的培養(yǎng)基上，表現(xiàn)出不同的萌動率（表1）表1，不同培養(yǎng)基對芽萌動率的影響培養(yǎng)基接種芽數(shù)萌動芽數(shù)萌動率（%）D20525J18844Q191158
6、R201785試驗表明，R培養(yǎng)基具有較高萌動率，在R培養(yǎng)基上的外植體，約十天后開始萌動，向上伸長，40天后可長至1.5~2.0cm，且芽的基部會產(chǎn)生1至數(shù)個不定芽。2、叢生芽的誘導和增殖將在R培養(yǎng)基上誘導獲得無菌芽切下，轉移到加有不同濃度的生長素和細胞分裂素的分化培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。結果表明（表2），誘導叢生芽最適培養(yǎng)基是Q′，在Q′培養(yǎng)基上接種的芽，在其基部先形成少量愈傷組織，隨后產(chǎn)生叢生芽，平均每個外植體可分化4.6個新生芽。其他培養(yǎng)基上雖也有叢生芽發(fā)生，但數(shù)量及質量均不如Q′，新生嫩芽有褐化，玻璃化及黑死現(xiàn)象。獲得的叢生芽切段可在Q′上不斷繁殖，繼代
7、周期為50天左右。表2不同培養(yǎng)基對叢生芽誘導影響培養(yǎng)基外植體數(shù)總出芽數(shù)平均芽數(shù)Ba501132.3B15000B2501153.1B3501853.7F5000K501513.0Q′502324.6Z501242.5q2050861.7q21501883.8q2250971.93、壯苗培養(yǎng)：將叢生芽分切成數(shù)株一小叢，轉入q1培養(yǎng)基培養(yǎng)20天，芽在q1培養(yǎng)基上迅速生長，莖桿粗壯，有數(shù)片嫩葉，葉片較濃綠。4、根的誘導：將經(jīng)過壯苗培養(yǎng)株高3cm無根苗分別并轉入生根培養(yǎng)基以誘導生根。在生根培養(yǎng)中，共試驗17種培養(yǎng)基，其生根效果見表3。從表3可以看出，不定苗在生根
8、培養(yǎng)基q16，q18，q19具有較高生根率，達到76%以上，其中生長在q18上的
