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1、芳樟組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)香樟（Cinamomumcamphora），樟科樟屬，為亞熱帶常綠闊葉喬木，適生環(huán)境為北緯10ο至30ο之間，屬弱陽(yáng)性樹種，喜暖熱濕潤(rùn)的氣候條件，不耐嚴(yán)寒，主要分布在我國(guó)浙江、福建、湖南、湖北、江西、廣東、云南和臺(tái)灣等省，是我國(guó)珍貴用材樹種及芳香植物，在林業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位。香樟木材致密美觀，具有香氣抗蟲蛀，可供建筑、造船、家具、樂(lè)器、手工藝品之用；香樟枝葉茂密，樹姿雄偉，具有很強(qiáng)的吸塵能力和抗煤煙能力；且系深根性樹種，根系特別強(qiáng)大，主根尤為發(fā)達(dá)，有較強(qiáng)的抗風(fēng)能力，且能吸濕耐水，能防風(fēng)固沙，保護(hù)堤岸，是綠化及環(huán)保優(yōu)良樹種。芳樟是
2、香樟五個(gè)天然類型中枝葉含芳樟醇最高的一種。芳樟醇香原料及其派生衍生物的龐大體系在香化產(chǎn)業(yè)中都得到廣泛的應(yīng)用。據(jù)資料介紹，在世界范圍內(nèi)香化產(chǎn)業(yè)香原料，經(jīng)常被提到使用頻率最高，用量最大的25種香原料中，芳樟醇?xì)v來(lái)是名列榜首。芳樟醇制備的相應(yīng)的衍生物是香化工業(yè)的主要原料，而且芳樟醇又是合成維生素A、E的主要的起始原料。日本1996年統(tǒng)計(jì)資料表明，全世界每年對(duì)芳樟醇的需要量達(dá)到2.8萬(wàn)多噸，其中天然芳樟醇只占很少部分。目前，優(yōu)質(zhì)芳樟油國(guó)際市場(chǎng)價(jià)格為85,000元/噸。合成芳樟醇不論在氣味，香韻，強(qiáng)度，甜潤(rùn)等主要物化性能上，絕對(duì)不能與天然芳樟醇相比。因此，香化科技
3、工作者十分熱衷于采用天然芳樟醇。世界上香料界的有志之士都在用心尋找天然芳樟醇資源。隨著日用化工生產(chǎn)的發(fā)展，多年來(lái)對(duì)芳樟資源掠奪式利用，使芳樟資源枯渴現(xiàn)象日趨嚴(yán)重。經(jīng)驗(yàn)證明優(yōu)良芳香樟母樹上采集的種子育苗，只有15%植株能保持原母樹優(yōu)良特性；此外，據(jù)建陽(yáng)香料廠報(bào)告，芳樟油中含醇量低的只有30%，高的也不超過(guò)80%，特別是樟腦含量高，需要經(jīng)過(guò)復(fù)雜的化工分離單元操作，才能獲得適用的芳樟油。廈門牡丹香化實(shí)業(yè)有限公司科技人員經(jīng)多年潛心探索尋找，終于在1998年6月間，在閩西境內(nèi)武平天然香料廠林產(chǎn)基地幾十萬(wàn)株香樟林（實(shí)際上是雜樟）中發(fā)現(xiàn)了幾株芳樟，含油量高，油中芳樟醇
4、含量達(dá)98%，樟腦只含0.16%（國(guó)際市場(chǎng)上要求含醇量大了或等于95%，樟腦低于0.5%），而且香氣襲人，氣味純正，稀罕之至，被命名為牡丹1號(hào)、2號(hào)的純正良種進(jìn)行組培試驗(yàn)。通過(guò)工廠化組織培養(yǎng)快速繁殖生產(chǎn)，希望按理論上結(jié)論能保持品種純正，不變異退化，提供整齊一致純正良種的芳樟苗木，為大規(guī)模推廣種植提供行之有效途徑。二、材料和方法：（一）材料：芳樟頂芽、腋芽。（二）方法：1、消毒及接種：剪取多年生芳樟根莖聯(lián)接處當(dāng)年生幼態(tài)萌條的嫩芽，洗潔精洗凈，流水沖洗30分鐘。在超凈臺(tái)上，先用75%酒精浸泡10秒種，無(wú)菌水沖洗一次，然后在加有數(shù)滴吐溫20的0.1%升汞中消毒
5、15分鐘，無(wú)菌水沖洗5次。無(wú)菌條件下，剝?nèi)グ谀垩客獠康难亏[片，切取長(zhǎng)約1cm的頂芽或具節(jié)的莖段為外植體，接種到培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)瓶一個(gè)外值體。2、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件：按各培養(yǎng)階段的不同目的設(shè)計(jì)并篩選出相應(yīng)的最佳培養(yǎng)基配方。糖和瓊脂含量分別為3%和0.7%，pH：5.8±0.2，培養(yǎng)溫度26±2℃，每天連續(xù)光照12小時(shí)，光強(qiáng)度1500Lx。三、結(jié)果與分析：1、芽的誘導(dǎo)：將外植體接種在加有不同濃度的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上，表現(xiàn)出不同的萌動(dòng)率（表1）表1，不同培養(yǎng)基對(duì)芽萌動(dòng)率的影響培養(yǎng)基接種芽數(shù)萌動(dòng)芽數(shù)萌動(dòng)率（%）D20525J18844Q191158
6、R201785試驗(yàn)表明，R培養(yǎng)基具有較高萌動(dòng)率，在R培養(yǎng)基上的外植體，約十天后開(kāi)始萌動(dòng)，向上伸長(zhǎng)，40天后可長(zhǎng)至1.5~2.0cm，且芽的基部會(huì)產(chǎn)生1至數(shù)個(gè)不定芽。2、叢生芽的誘導(dǎo)和增殖將在R培養(yǎng)基上誘導(dǎo)獲得無(wú)菌芽切下，轉(zhuǎn)移到加有不同濃度的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的分化培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。結(jié)果表明（表2），誘導(dǎo)叢生芽最適培養(yǎng)基是Q′，在Q′培養(yǎng)基上接種的芽，在其基部先形成少量愈傷組織，隨后產(chǎn)生叢生芽，平均每個(gè)外植體可分化4.6個(gè)新生芽。其他培養(yǎng)基上雖也有叢生芽發(fā)生，但數(shù)量及質(zhì)量均不如Q′，新生嫩芽有褐化，玻璃化及黑死現(xiàn)象。獲得的叢生芽切段可在Q′上不斷繁殖，繼代
7、周期為50天左右。表2不同培養(yǎng)基對(duì)叢生芽誘導(dǎo)影響培養(yǎng)基外植體數(shù)總出芽數(shù)平均芽數(shù)Ba501132.3B15000B2501153.1B3501853.7F5000K501513.0Q′502324.6Z501242.5q2050861.7q21501883.8q2250971.93、壯苗培養(yǎng)：將叢生芽分切成數(shù)株一小叢，轉(zhuǎn)入q1培養(yǎng)基培養(yǎng)20天，芽在q1培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)，莖桿粗壯，有數(shù)片嫩葉，葉片較濃綠。4、根的誘導(dǎo)：將經(jīng)過(guò)壯苗培養(yǎng)株高3cm無(wú)根苗分別并轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基以誘導(dǎo)生根。在生根培養(yǎng)中，共試驗(yàn)17種培養(yǎng)基，其生根效果見(jiàn)表3。從表3可以看出，不定苗在生根
8、培養(yǎng)基q16，q18，q19具有較高生根率，達(dá)到76%以上，其中生長(zhǎng)在q18上的
