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1、淺談馬鈴薯脫毒苗快繁生產管理技術論文關鍵詞 馬鈴薯脫毒苗;快繁;管理技術 論文摘要 從培養(yǎng)基制作、溫度控制、瓶裝苗及其污染控制、消毒滅菌和定期檢查等方面介紹了馬鈴薯脫毒苗快繁生產管理技術,以期為馬鈴薯脫毒苗快繁生產提供參考。 隨著高科技的發(fā)展,作為植物營養(yǎng)繁殖的一個新手段,組織培養(yǎng)技術成為現代生物領域及現代農業(yè)生產的一項基本操作手段,其繁殖速度是一般常規(guī)方法所不能比的。通過無菌方法進行快繁的方法能在較短的時間和較少的空間內由1個個體迅速繁殖大量群體,實驗室脫毒馬鈴薯試管苗的離體繁殖正是借助這一顯著優(yōu)勢在國內外種薯生產上
2、得以廣泛利用,是脫毒馬鈴薯原種大規(guī)模產業(yè)化生產的前提。青海省農科院生物中心是青海省最大的脫毒馬鈴薯科研、生產相結合的經濟實體,生產能力達200多萬株脫毒馬鈴薯試管苗,為青海省脫毒馬鈴薯原種生產最大的省級單位。經過多年的實際探索及對馬鈴薯實驗室的改進,大幅度增加了脫毒馬鈴薯原種的生產數量,而脫毒馬鈴薯的優(yōu)勢,即高產和不易腐爛,被農民及市場接受,收到了良好的經濟和社會效益,為青海省的經濟發(fā)展做出了貢獻?! ?培養(yǎng)基及其制作對瓶裝苗的生長影響 培養(yǎng)基材料對試管苗的生長影響 培養(yǎng)基包括大量元素、微量元素、鐵鹽、食用白糖、自來水
3、、瓊脂。試管苗單節(jié)切斷繁殖宜采用固體培養(yǎng)基,如果工作人員在培養(yǎng)基滅菌過程中,不慎放氣不均,一般滅菌后拿出來的培養(yǎng)基過稀,影響接苗質量和幼苗生長;相反,如果培養(yǎng)基硬度太大,切斷不易插入培養(yǎng)基中,影響苗切斷與培養(yǎng)基的接觸?! ∨囵B(yǎng)基制作對試管苗成活率的影響 在快繁苗時,所需的培養(yǎng)基一般應提前2周做,以防使用被污染的培養(yǎng)基,影響試管苗的成活率。如筆者4月中旬快繁大西洋苗時,由于培養(yǎng)基的污染超過了10%,影響很大。另外,培養(yǎng)基的瓶或盒上的水珠影響快繁苗的污染和強壯生長?! ?溫度對瓶裝脫毒苗生長的影響 夏天晝長夜短,日光燈照射
4、比冬天短,而自然照射光多,可提高組培瓶苗移栽后的成活率;但夏天比冬天室內溫度高,污染增高,所以室內需裝空調。一般溫度應控制在20~25℃范圍內,溫度高于26℃,則苗頂端易產生燒苗現象,高于33℃,則苗停止生長。另外,瓶中或盒中的培養(yǎng)基要比平時多放,以防抽干盒或瓶中的培養(yǎng)基,影響幼苗的正常生長?! ∩L間的生長架以用玻璃層為宜,因利用散射光可提高組培瓶苗移栽后的成活率。試驗表明,用玻璃作為培養(yǎng)層的生長架比用鐵作為生長架好。用鐵做的生長架,散熱效果比較差,當生長間放滿用鐵做的生長架時,一般早上關燈后,繼續(xù)讓空調再開2~3h才能
5、保證整個生長間的溫度較適合幼苗的生長?! ?快繁瓶裝苗的控制 在快繁脫毒苗時,瓶中如少放脫毒苗,其長得快,脫毒苗節(jié)間長、葉大且須根發(fā)達;如放多脫毒苗,其長得慢,脫毒苗弱、葉小且挨瓶的苗腐爛。這2種情況對快繁都不利,故快繁苗時,在瓶中放40~50根脫毒苗為宜;同時快繁脫毒苗應控制苗的節(jié)間?! ?瓶苗污染的控制 在脫毒瓶苗的繼代培養(yǎng)過程中,常因種種原因出現細菌類和真菌類污染,細菌污染苗極弱,且擴繁后下一代大部分表現為細菌污染,在生產中通常用抗生素來處理細菌污染。對于真菌污染的脫毒瓶苗,除嚴格操作規(guī)程外,可在培養(yǎng)基中配制不同
6、濃度多菌靈來減輕瓶苗污染率。最主要是快繁留的基礎脫毒苗沒有細菌和真菌的污染。而對于繼代擴繁4年以上的瓶苗,要定期進行病毒檢測確認是無病毒苗。因此,要定期更新脫毒瓶苗,每年應通過剝離莖尖組織的辦法培養(yǎng)新鮮無病毒瓶苗,以確保繼代培養(yǎng)脫毒瓶苗質量?! ?無菌操作室內消毒滅菌 操作前消毒 一是無菌室剛開始工作或間隔1~2個月未進行消毒時,先把高錳酸鉀倒入培養(yǎng)皿,再倒入甲醛,關閉門窗進行熏蒸消毒,間隔1~2d即可在室內工作;二是將工作服、口罩、拖鞋、盛裝75%的酒精瓶、剪刀、鑷子、苗源瓶、快繁瓶等無菌室所需物品放在無菌室固定位置
7、,啟動超凈工作臺,通風殺菌,并將室內紫外燈打開消毒,工作人員快速離開無菌室,滅菌25~30min即可?! 〔僮髦邢尽 」ぷ魅藛T進入隔離間,穿戴好消毒服裝,在組培室用75%的酒精將雙手消毒,再用酒精泡的酒精棉擦超凈工作臺,同時將鑷子、剪刀和支撐干用酒精擦過后,放在加熱器進行5~6s的消毒,并將已挑揀好的無污染的脫毒苗放在超凈工作臺上,先打開滅菌過的快繁瓶放在超凈工作臺上,然后擰開脫毒苗瓶的口,用已滅菌過的鑷子將脫毒苗瓶中的小苗夾出瓶口,只留根部在瓶內,用剪刀剪掉根部,然后再用鑷子夾小苗離快繁瓶口1~2cm,剪帶1片小葉莖放
8、在快繁瓶中。蓋上蓋子,在苗瓶外壁用打號槍注明該品種的編號及快繁日期?! ?定期檢查 放在生長間的快繁脫毒苗,一般每隔7d要用稀釋好的清潔爾滅噴撒滅菌,每天早關燈和晚開燈時,發(fā)現有污染的瓶苗,必須馬上將其拿出生長間,并放入高壓滅菌鍋滅菌,然后用清潔熱水加入適量洗衣粉,用刷子涮洗苗瓶,并換水沖洗,然后倒置