枸杞對d半乳糖致衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶影響

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1、枸杞對D半乳糖致衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶影響【摘要】目的觀察枸杞對D-半乳糖所致衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響。方法建立D-半乳糖致衰老小鼠模型，跳臺實(shí)驗(yàn)檢測其學(xué)習(xí)記憶能力，同時(shí)測定其大腦乙酰膽堿酯酶(AchE)活性，用黃嘌呤氧化酶法測定大腦超氧化物歧化酶(SOD)活性，硫代巴比妥法測定大腦丙二醛(MDA)含量，觀察小鼠服用枸杞汁后上述指標(biāo)變化。結(jié)果與D-半乳糖模型組比較，各實(shí)驗(yàn)組均可提高小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力(P＜0.05或P＜0.01)，顯著增加D-半乳糖所致衰老小鼠大腦SOD活性、降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01)，可顯著升高大腦AchE活性(P＜0

2、.05，或P＜0.01)。結(jié)論枸杞能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能，其機(jī)制可能與枸杞的抗氧化自由基作用有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】枸杞　　阿爾茨海默病(AD)是一種漸進(jìn)性神經(jīng)退行性疾病，其發(fā)病有增加的趨勢〔1〕。枸杞(Fructuslycii)是我國傳統(tǒng)的藥材，它含有豐富的營養(yǎng)成分和藥理活性成分。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已證實(shí)，枸杞可調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老和清除自由基等功能。本實(shí)驗(yàn)采用D半乳糖所致衰老小鼠模型，研究AD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力、腦組織乙酰膽堿酯酶(AchE)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的變化及枸杞對這些指標(biāo)的影響，并分析其作用機(jī)制，

3、為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)?！　?材料與方法　　11試驗(yàn)動(dòng)物及分組昆明小鼠雄性75只，體重(24g±2)g(包頭醫(yī)學(xué)院動(dòng)物室)。隨機(jī)分為5組，每組15只，即對照組，D-半乳糖模型組，低、中、高3個(gè)枸杞汁劑量組。飼養(yǎng)過程中對照組和模型組各死亡3只，枸杞汁劑量組各死亡2只?！　?2藥物與儀器枸杞(包頭市奇力康醫(yī)藥公司)。D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司，批號030406)。AchE試劑盒、SOD試劑盒、MDA試劑盒(南京建成生物工程研究所)。752C紫外-可見分光光度計(jì)、721型分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)。STT-2型跳臺儀(中國醫(yī)科院藥研所

4、)；德國來卡2135型切片機(jī)、加樣器(上海偉業(yè)有限公司)。離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)；混勻器(上海偉業(yè)有限公司)。　　13D-半乳糖模型及給藥方法除對照組給予生理鹽水外，其他組每日均腹腔注射012g/(kgbl/(kgbl)、中劑量(075g/ml)、低劑量(0375g/ml)，對照組和模型組灌胃給予等容積的生理鹽水，連續(xù)6周。枸杞汁制備：以枸杞子總體積的5倍量自來水冷浸3h，微沸1h×2次，合并濾液，文火濃縮制成，無菌條件下裝瓶，置4℃冰箱備用?！　?4方法　　141跳臺實(shí)驗(yàn)造模后灌胃至4周后1h開始跳臺實(shí)驗(yàn)〔2〕?！　?4

5、2AchE、SOD、MDA的測定小鼠腦組織AchE活性用試劑盒方法；SOD活力采用黃嘌呤氧化酶法；MDA含量采用(TBA)法；腦組織蛋白質(zhì)定量采用考馬斯亮藍(lán)(CBB-SDS)法?！　?5統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS100軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)?！　?結(jié)果　　21枸杞對小鼠跳臺成績的影響(表1)D半乳糖所致模型組，無論學(xué)習(xí)成績和記憶成績，與對照組比較，模型組小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)明顯增多(P＜001)，學(xué)習(xí)成績的反應(yīng)期明顯延長(P＜001)，記憶成績的潛伏期明顯縮短(P＜001)；與模型組比較各給藥組小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙有明顯的改善(P＜005或P＜001)；

6、各用藥組間比較以枸杞汁中劑量作用最為明顯，但枸杞汁低、中、高劑量組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞005)。　　22枸杞對小鼠大腦AchE、SOD、MDA各項(xiàng)指標(biāo)的影響(表2)對實(shí)驗(yàn)組D半乳糖致小鼠腦組織AchE活性測定結(jié)果表明，模型組小鼠大腦中AchE減少，與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜001)，表明D半乳糖所致模型組，可以損傷膽堿能神經(jīng)元，引起小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙。與模型組比較，各給藥組可顯著升高D半乳糖所致的AchE活性下降(P＜005或P＜001)并基本達(dá)到對照組水平；模型組小鼠大腦中SOD活力明顯降低，MDA含量明顯增多，給予枸

7、杞汁后可明顯提高SOD活性、降低MDA含量?！　”?枸杞對小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響（略）　　注：與對照組比較，aP＜001；與模型組比較，bP＜005,cP＜001　　表2枸杞對小鼠腦組織AchE、SOD、MDA的影響（略）　　注：與對照組比較,aP＜001；與模型組比較,bP＜005,cP＜001　　3討論　　膽堿能系統(tǒng)是正常認(rèn)知功能中最為重要的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)，引起AD的生理生化機(jī)制目前還不清楚，與衰老致癡呆相關(guān)的因素很多〔3〕，AchE的異常可能是引起AD的一個(gè)重要因素。D半乳糖致小鼠腦組織AchE活性明顯下降〔4〕，單胺氧化酶活性明顯升

8、高。AD患者大腦皮層內(nèi)膽堿乙?；D(zhuǎn)移酶、AchE活性均下降〔5，6〕。已知膽堿能系統(tǒng)與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系密切，Ach為促學(xué)習(xí)記憶