物質(zhì)鑒定實驗及改進

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1、【實驗】生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定（附實驗改進）斐林試劑鑒定可溶性還原糖　斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身氧化成葡萄糖酸。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖?，F(xiàn)象：溶液的顏色變化過程為:淺藍色棕色磚紅色(沉淀)?！”緦嶒炞罾硐氲膶嶒灢牧鲜呛橇枯^高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近于白色的,

2、如蘋果和梨的果實。斐林試劑的配制：甲液—質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液；乙液—質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液使用時臨時配制,將4～5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用用于鑒定脂肪的實驗材料準備：實驗材料最好選擇富含脂肪的種子,如花生種子(取其子葉)。供實驗用的花生種子,必須提前浸泡3～4h。浸泡時間短了,不容易切成片浸泡時間過長,則組織太軟,切下的薄片不易成形。現(xiàn)象：蘇丹Ⅲ染液遇脂肪的顏色反應為橘黃色,蘇丹Ⅳ染液遇脂肪的顏色反應為紅色。因蘇丹Ⅳ染液與脂肪的親和力比較強,所以,染色的時間應比較短,一般為1min左右。蛋白質(zhì)的鑒定原

3、理：鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.01g/mL的硫酸銅溶液。蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應。用于鑒定蛋白質(zhì)的實驗材料準備：實驗材料最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織(或器官),如大豆,雞蛋清。如用大豆,必須提前浸泡1～2d,這樣容易研磨成漿（也可用現(xiàn)成的豆?jié){）。如用雞蛋清，要先稀釋。雙縮脲試劑的配制：取10g氫氧化鈉放入量筒中,加水至100mL,待充分溶解后倒入試劑瓶中,配成質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液,瓶口塞上膠塞,貼上標簽,寫上試劑

4、A。取1g硫酸銅放入量筒中,加水至100mL,待充分溶解后倒入試劑瓶中,配成質(zhì)量濃度為0.01g/mL的硫酸銅溶液(藍色)。瓶口塞上膠塞,貼上標簽,寫上試劑B。注意：（1）關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向?qū)嶒炚?，以免試管?nèi)溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。（2）做鑒定還原糖和蛋白質(zhì)的實驗時，在鑒定之前，可以留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色變化作對比，這樣可以增強說

5、服力。（3）斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的實驗的改進長沙市第十六中學王揚利檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的實驗，是高中老教材中的第一個實驗，也是新教材中的第二個實驗。初中實驗以形態(tài)解剖學實驗為主，高中實驗以生物化學實驗為主，這個實驗實現(xiàn)了這種內(nèi)容的轉(zhuǎn)變。由于是第一個生化實驗，學生的期望值和積極性極高。一、原實驗的不足1、需要水浴加熱2分鐘。如果教師不提前準備好熱水加溫過程更長。2、沒有對照實驗，沒有對照怎么能證明水浴加熱后的磚紅色沉淀就是還原糖還原而成，為什么不可能

6、是Cu(OH)2自身分解產(chǎn)生的呢？3、脂肪鑒定實驗中，顯微鏡的操作、子葉切片都需要很長時間。特別是對于才進高中的學生而言，要求所有的學生都能熟練運用徒手切片技術也不現(xiàn)實。4、在學生對生物染色劑的染色特性了解不深的情況下，很難指出顯微鏡下哪些黃色或紅色的東西就是脂肪。二、實驗的改進之處1、選生活中常見且操作起來很方便的液態(tài)狀的牛奶，替換書上的蘋果、花生和雞蛋三類實驗材料，節(jié)省實驗時間與消耗，2、減少實驗器材的使用，從而簡化實驗過程。如：不使用水浴加熱、不使用顯微鏡等。3、改進實驗方法，節(jié)省時間與試劑。如：糖的鑒定中，使用兩只試管同時直接加熱法，實驗只

7、需幾滴斐林試劑，且反應也只有約30秒，這樣既節(jié)省了時間與試劑，而且起到了很明顯的對照作用。4、改驗證實驗為探究實驗。如：給予食用油與水，用蘇丹Ⅲ染色觀察現(xiàn)象。三、教學過程1、給予實驗任務現(xiàn)有一瓶“牛奶”，請學生用實驗來探究牛奶中是否含有說明書中所說的糖、蛋白質(zhì)、脂肪三類成份。2、還原性糖實驗2．1實驗原理：牛奶中的乳糖是一種醛糖（由葡萄糖+半乳糖構成），能還原斐林試劑（0.1%NaOH,5%CuSO4）中的Cu2+產(chǎn)生磚紅色Cu20沉淀。2．2實驗過程①取2塊試管，編號水、牛奶；②滴加4滴斐林試劑A液，再滴加4滴斐林試劑B液，搖勻；③再分滴加7滴水

8、、牛奶搖勻；④同時用兩個試管夾夾著在酒精燈上均勻加熱30秒；⑤觀察并記錄現(xiàn)象（牛奶顯現(xiàn)磚紅色）。3、蛋白質(zhì)實驗3．1實驗原