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1、山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文松材線蟲威海群體的發(fā)生特點、病原鑒定及藥劑毒殺行為研究姓名:譚晴晴申請學位級別:碩士專業(yè):植物病理學指導教師:吳海燕;姜淑霞20120615山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文中文摘要2010年3月.10月對山東省威海市成山林場的松材線蟲病發(fā)生進行調(diào)查,檢測其樹體內(nèi)松材線蟲的時空動態(tài)、分布狀況;通過對雌雄成蟲的永久玻片和臨時玻片的光學顯微鏡觀察、測量和顯微鏡拍照,對山東省威海成山、煙臺長島和淄博魯山3個線蟲群體形態(tài)學和分子生物學鑒定;為了有效的篩選防治松材線蟲病藥劑,采用生物浸漬法,
2、利用校正死亡率和運動行為量化指標綜合評價甲維鹽、硫酸銅和苦參堿對Bursaphelenchusxylophilus室內(nèi)毒力試驗結(jié)果;同時,研究了甲醇、無水乙醇、丙酮和二甲基亞砜等4種常見溶劑的處理對松材線蟲運動行為的影響,為研究殺線劑過程中原藥的配制和植物提取液溶劑的使用提供重要的生物學信息。本研究獲得結(jié)果如下:1.山東省威海市成山林場松材線蟲群體消長動態(tài)規(guī)律2010年3月一10月對山東省威海市成山林場的松材線蟲病發(fā)生進行監(jiān)測。結(jié)果發(fā)現(xiàn),7月一lO月松材線蟲的發(fā)生達到高峰期,樹皮內(nèi)松材線蟲的數(shù)量
3、明顯高于樹體其他部位。病木樹皮內(nèi)松材線蟲的數(shù)量,樹梢明顯高于基部,樹中下部是最少的;病樹上松材線蟲在距離地面O.1.2m及4.0-4.8m處松材線蟲的數(shù)量明顯的高于其他部位的數(shù)量,其他部位松材線蟲的數(shù)量沒有顯著的差異;樹體的不同方位松材線蟲數(shù)量不同。2.山東省威海、煙臺、淄博3個群體線蟲的形態(tài)學和分子生物學鑒定威海成山、煙臺長島和淄博魯山3個線蟲群體共同的形態(tài)特征為:雌雄蟲呈蠕蟲形,蟲體細長。唇區(qū)高,縊縮顯著??卺槺饶J椒N稍短,基部微增厚。中食道球卵圓形,占體寬的2/3,瓣膜明顯。陰門位于蟲體中
4、后部大約75%處,上面覆以寬的陰門蓋。雄蟲的交合刺大,弓狀,成對,喙突顯著,遠端膨大如盤。3個群體的形態(tài)區(qū)別為:威海成山和煙臺長島群體的線蟲雌蟲的尾部呈寬圓形,無尾尖突;雄蟲尾部像腹部彎曲,無交合傘包被。淄博魯山群體雌蟲尾部有極短的尾尖突,雄蟲尾部端生卵形交合傘。利用特異引物PCR擴增和ITS.RFLP技術(shù),并通過5種限制性內(nèi)切酶酶切和同源性序列比對。鑒定3個群體線蟲均為松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus(Steiner&Buhrer,1934)Niekle,1970)。
5、3.藥劑和溶劑處理對松材線蟲運動行為的影響供試藥劑處理線蟲后,隨著暴露時間的延長W溘值逐漸降低,硫酸銅和甲維鹽分別在濃度為100m朗處理8h和濃度為2m鯽處理2h時只有極少數(shù)的線蟲僅頭尾部微弱的擺動,其他的線蟲均喪失活性??鄥A在1000mg/l處理8h時線蟲的活性降低,I松材線蟲的發(fā)生動態(tài)、群體鑒定及藥劑毒殺行為研究雖然都有活性,但90%身體卷曲,只有1/2線蟲頭尾部擺動緩慢。甲醇、無水乙醇、二甲基亞砜、丙酮在l%濃度下處理不同的時間,線蟲W姨值發(fā)生一定變化,但不顯著,3%時,行為變化明顯(P
6、7、,0.2068,0.0369和0.0354mg/l。關(guān)鍵詞:松材線蟲;鑒定;山東??;毒力測定;運動行為H山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文respectively.Keyword:Bursaphelenchusxylophilus;Identification;Mortality;MovementBehavior;ShandongprovinceV山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文1.刖舌線蟲(nematode)是一類低等的無脊椎動物,據(jù)保守統(tǒng)計,全世界線蟲種類要超過50萬種,10%為植物線蟲(段玉璽等,2011)
8、。目前世界上已記載的植物線蟲約有200多屬5000種,每年都有新種發(fā)表(謝輝,2000)。植物寄生線蟲是農(nóng)作物、蔬菜、果樹、樹木和花卉以及藥材上重要的病原物之一。全世界每年被線蟲危害的糧食和纖維植物造成的損失大約為12%,給果樹和蔬菜造成的損失超過20%(劉維志等,2000)。松材線蟲病(PineWoodNematodeDisease,PWND)主要是由松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus(Steiner&Buhrer,1934)Nickle,1970弓1起,是松樹的一種毀