黃連、大黃、牡丹皮三種植物對松材線蟲的毒殺活性及作用機理研究

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1、中圖分類號:Q093UDC:579密級:公開學(xué)校代碼:10094訝覃二解為丈學(xué)碩士學(xué)位論文(學(xué)歷碩士)黃連、大黃、牡丹皮三種植物對松材線蟲的毒殺活性及作用機理研究NematicidalactivityandpoisoningmechanismofCortexmoutanradicis,CoptischinensisfranchandRadixetrhizomarheiagainstBursaphelenchusxylophilus研究生姓名:焦宏偉指導(dǎo)教師:趙寶華教授學(xué)科專業(yè):微生物研究方向:分子細(xì)菌學(xué)論文開題日期:2012年3月l目學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人所提交的

2、學(xué)位論文《黃連、大黃、牡丹皮三種植物對松材線蟲的毒殺活性及作用機理研究》,是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進(jìn)行研究工作所取得的原創(chuàng)性成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體,均已在文中標(biāo)明。本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。論文作者(簽名)仂

3、'年p其西日指導(dǎo)教師確認(rèn)(簽名):訓(xùn)f岬年n又日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解河北師范大學(xué)有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)河北師范大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢

4、索,可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在年解密后適用本授權(quán)書)論文作者(簽名):坌龐律們~年r月“日1指導(dǎo)教師(簽名掘酶Ⅵf妒年-17月“日1lI摘要松材線蟲病又稱松樹萎蔫病,是由松材線蟲(Bursaphelenchusxylophilus)寄生在松屬樹種(Pinusspp.)體內(nèi)取食營養(yǎng)而導(dǎo)致樹木死亡的一種毀滅性病害,被喻為松樹的癌癥。該病自發(fā)現(xiàn)以來,已經(jīng)蔓延到世界許多國家和地區(qū),對各國的林業(yè)資源和生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重破壞。目前,對于該病的防治主要是采用化學(xué)殺線蟲劑,但該方法存在周期長、成本高、污染大、易產(chǎn)生抗藥性等缺點。因此,從

5、植物中尋找高效、低毒、環(huán)保的生物合理型殺線蟲劑成為了近年來研究的熱點。本文選取了36種中草藥,就其乙醇提取物對松材線蟲及其卵的毒殺活性進(jìn)行測定。結(jié)果表明,牡丹皮、黃連和大黃3種中藥乙醇提取物的殺線蟲活性較強,以提取物濃度為lO∥L分別處理松材線蟲成蟲和卵72h后,松材線蟲的校正死亡率均為100%,線蟲卵的孵化率均低于20%,蟲卵的校正死亡率均高于60%。在3種中藥提取物處理松材線蟲72h后半致死濃度(LC50)分別為1.81、0.2638和1.07∥L。利用乙酸乙酯和水作溶劑對3種中草藥進(jìn)行殺線蟲活性成分初步分離,結(jié)果表明,牡丹皮的殺線蟲活性物質(zhì)存在于乙酸乙酯萃取

6、物中,黃連和大黃的殺線蟲活性物質(zhì)存在于水層中。三種活性成分處理松材線蟲72h后的半致死濃度(LC50)分別為O.712,2.370和0.067g/L,這表明三種萃取物均具有較高的殺線蟲活性。利用黃連、大黃、牡丹皮三種中藥乙醇提取物進(jìn)行了防治松材線蟲的溫室水培試驗,結(jié)果表明,3種中藥的乙醇提取物對松材線蟲病具有很好的防治效果。250}-tg/ml中藥提取液處理后40天內(nèi)松枝不發(fā)?。欢扒逅?線蟲”處理后10天內(nèi)不發(fā)病,10天后開始表現(xiàn)病情,病情指數(shù)迅速上升,40天內(nèi)松枝枯萎、死亡。本研究還對三種中草藥黃連、牡丹皮、大黃乙醇提取物毒殺松材線蟲作用機制進(jìn)行初步研究。采用

7、菌絲生長抑制法測定其抑真菌活性;測定其對線蟲體內(nèi)總糖和蛋白含量的影響;測定線蟲體內(nèi)SOD、CAT、POD、GSH.Px和AchE酶活性變化和MDA含量變化;測定處理前后SOD、CAT、GSH.Px和AChE表達(dá)量變化。結(jié)果表明中藥提取物能夠有效抑制真菌菌絲生長,明顯干擾線蟲糖及蛋白質(zhì)的代謝:引起線蟲體內(nèi)氧保護(hù)酶系活性發(fā)生改變,MDA含量提高,線蟲體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡,細(xì)胞功能受到極大影響;線蟲的神經(jīng)系統(tǒng)受到破壞。綜111上,中草藥提取物引起的松材線蟲體內(nèi)眾多生理指標(biāo)的改變是造成其死亡的主要原因。IV關(guān)鍵詞:黃連大黃牡丹皮松材線蟲殺線活性殺線機理Abstract

8、Pinewoodnematodedisease,asalsoknownaspinewiltdisease,isakindofdestructivetreediseasesdeterminedbythepinewoodnematode(Bursaphelenchusxylophilus)parasiticinginthevivoofPinusspecies(Pinusspp.),feedingonthenutrientsandresultinginthedeathoftrees.Itishailedascancerofpine.Ithasspreadtomanyco

9、untri

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