細(xì)胞mirna抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒(prrsv)復(fù)制的相關(guān)研究

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1、'玲掛I;,?V;擊:論文編號(hào)」.t'W..—乂K忍:■囯農(nóng)學(xué)院..‘」..二??<、’;...■■'、-'丨讓徽;■-_位論文,;:?,心:、?-.?:、細(xì)雎miRNA抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PIHEliSV)復(fù)餺的相矣研究c兔,工乂:乂StudyontheSuppressionofPorcineReprodactiveandRespiratorySyndromeVirusReplicationbyCelluarmIRNAs蠢-^-V-V:.博士研究生:李麗l指導(dǎo)教師:童光志申請學(xué)位類另ih農(nóng)學(xué)傅壬、;卜?‘:業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué).:卜翁:t?狗研費(fèi)培:;:辱、、單々位:上寧獸禪?究

2、所4…V:」舊必:A吩…,:'八''?2灰5年5月、J'■■-:.:""V^7.Iv";T.^:^:????.痛:獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所y交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究I:作及収得的研究成Ig我所知.除了義屮特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文屮小liAil他人Ll行.發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教f'y機(jī)構(gòu)的學(xué)位成丨

3、_丨-:書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:時(shí)間:夕年^>^

4、丨關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人Vi全了解屮W農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定.即:中W農(nóng)、丨k/科

5、保留送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,町以采川影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院討以川式/I-M、同媒休上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文評閱人、答辯委員會(huì)簽名表論文題目細(xì)胞miRNA抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒復(fù)制的相關(guān)研究獸醫(yī)微生物論文作者李麗薇專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向及其分子生物學(xué)指導(dǎo)教師童光志培養(yǎng)單位(研究所、中心)±^rnm姓名職稱單位專業(yè)盲評評閱盲評人盲評Ma辯主席周繼勇浙江大學(xué)微生物學(xué)秦愛建教授揚(yáng)州大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)孫建和教授上海交通大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)答丁鏟研究員上海獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)辯李澤君研究員上海獸醫(yī)研究

6、所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)委劉光清研究員上海獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)員李國新研究員上海獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)會(huì)議記錄(秘書)顧惠明論文答辯時(shí)間地點(diǎn)2015年5月25日上海獸醫(yī)研究所密級:論文編號(hào):中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文細(xì)胞miRNA抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)復(fù)制的相關(guān)研究StudyontheSuppressionofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirusReplicationbyCelluarmiRNAs博士研究生:李麗薇指導(dǎo)教師:童光志申請學(xué)位類別:農(nóng)學(xué)博士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向:獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)培養(yǎng)單位:上海獸醫(yī)研究所研究生

7、院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationStudyontheSuppressionofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirusReplicationbyCelluarmiRNAsPh.DCandidate:LiweiLiSupervisor:Prof.GuangzhiTongMajor:PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty:VeterinaryMicrobiologyandMolecularBiology

8、May2015摘要豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)可引起母豬晚期流產(chǎn)和仔豬呼吸疾病等臨床癥狀。由于該病的病原豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)具有較高的變異性,且可造成持續(xù)性感染和免疫抑制,因而疫苗免疫防控比較困難。近年來,越來越多的證據(jù)表明宿主細(xì)胞microRNA(miRNA)是機(jī)體先天性/獲得性免疫以及宿主-病原體相互作用的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)中不可或缺的調(diào)節(jié)因子。通過直接結(jié)合病毒RNA抑制基因表達(dá)或間接作用于某個(gè)細(xì)胞成分進(jìn)而影響細(xì)胞內(nèi)通路和調(diào)節(jié)先天性免疫應(yīng)答,miRNA在抗病毒感染和復(fù)制方面也扮演了重要的角色。為篩選具有抑制PRRSV復(fù)制潛在功效的miRNA,我們合成了15條miRNA模擬物

9、,其序列在不同物種之間具有高度保守性,且已有相關(guān)文獻(xiàn)表明它們在先天性免疫和/或抗病毒方面具有一定功效。本研究利用體外轉(zhuǎn)染miRNA模擬物或陰性對照后再感染相同劑量病毒的方法鑒定具有抗PRRSV作用的miRNA,并從病毒學(xué)水平、基因組復(fù)制水平和蛋白翻譯水平證明其抑制作用,并進(jìn)一步發(fā)掘其發(fā)揮作用的機(jī)制。結(jié)果表明,15條候選miRNA中僅有miR-26a可以強(qiáng)烈抑制PRRSV的復(fù)制。體外過表達(dá)miR-26a對不同毒力、不同基因型的PRRSV毒株均有抑

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