《疫學應用》PPT課件

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1、第十五章免疫學應用教學目的：掌握：基于抗原–抗體反應的檢測方法；免疫細胞的檢測方法；人工（自然）主動免疫、人工（自然）被動免疫的概念。理解：基于抗原-抗體反應的特點及影響因素；免疫分子的檢測原理；免疫細胞的檢測方法與原理；以抗體、細胞和細胞因子為基礎的免疫治療了解：免疫分子的檢測原理；免疫學診斷的原理、常用的免疫功能檢測指標；免疫治療制劑的類型和作用機制教學重點：基于抗原－抗體反應的檢測方法及原理；人工（自然）主動免疫、人工（自然）被動免疫的概念。教學難點：抗原-抗體反應的特點及影響因素。使用教

2、材：《醫(yī)學免疫學》（第二版），龔非力主編，科學出版社，2007年。參考教材：《醫(yī)學免疫學》（第五版），金伯泉主編，人民衛(wèi)生出版社，2008年；/主要內容第一節(jié)　基于Ag-Ab反應的檢測方法第二節(jié)　免疫細胞的檢測第三節(jié)　免疫分子的檢測第四節(jié)免疫學預防第一節(jié)　基于Ag-Ab反應的檢測方法抗原-抗體反應：指抗原與相應抗體在體內、外發(fā)生高度特異性結合反應。由于實驗所用的抗體存在于血清中，故又稱血清學反應（serologicalreaction)應用：用已知抗原檢測未知抗體；用已知抗體檢測未知抗原：定性

3、或定量檢測體內各種分子；用已知抗體檢測半抗原物質。（一）特異性和交叉反應特異性：一種抗原通常僅能與由它刺激所產生的抗體結合。分子基礎：抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構型的互補性。一、抗原-抗體反應的特點交叉反應（crossreaction）性：若兩種抗原分子有一個或數個相同（或相似）的決定基，則針對一種抗原的抗血清可與另一種抗原發(fā)生反應。結合價：天然抗原分子表面一般含多種抗原決定基，可與多個抗體分子結合，為多價。單體形式的抗體分子有兩個Fab段，能結合兩個相同的抗原決定基，為兩價。前帶現(xiàn)象（p

4、rozone）和后帶現(xiàn)象(postzone)Ab過剩和Ag過剩（二）抗原-抗體結合的帶現(xiàn)象與可見性前帶現(xiàn)象（prozone）和后帶現(xiàn)象(postzone)Ab過剩和Ag過剩比例合適：若抗原、抗體的數量比例合適，抗體分子的兩個Fab段分別與兩個抗原決定基結合，相互交叉連接成網格狀復合體，則反應體系中基本不存在游離的抗原或抗體，此時形成肉眼可見的反應物（沉淀物或凝集物）。因此，確定反應體系中抗原、抗體的最適比例十分重要?？乖?抗體反應為分子表面的非共價結合，結合雖穩(wěn)定但可逆。在一定條件下（如低pH、

5、高濃度鹽、凍融等），抗原-抗體復合物可被解離。解離后的抗原和抗體仍保持原有理化特性和生物學活性。根據此特點，可借助親和層析法純化抗原或抗體。（三）可逆性（一）電解質抗原和抗體有對應的極性基團，能相互吸附并由親水性變?yōu)槭杷?。電解質的存在使抗原-抗體復合物失去電荷而凝聚，出現(xiàn)可見反應，故免疫學試驗中多用生理鹽水稀釋抗原或抗體。二、抗原-抗體反應的影響因素（二）酸堿度抗原抗體反應的最適pH是6-8。（三）溫度最適溫度為37℃。有些例外，如冷凝集素在4℃左右與紅細胞結合最好，20℃以上反而解離。（四）

6、抗原和抗體的性質抗體的特異性和親和力是決定抗原-抗體反應的關鍵因素。此外，抗原理化性質、抗原決定基多寡和種類等均可影響抗原-抗體反應。抗體分子上一個抗原結合點與對應的抗原決定基之間的結合能力親和力(affinity)一個抗體分子與整個抗原分子間的結合強度親合力(avidity)根據抗原的性質、結合反應的現(xiàn)象、參與反應的成分等因素分類：（一）凝集反應（二）沉淀反應（三）補體參加的反應（四）免疫標記技術三、Ag-Ab反應的基本檢測方法顆粒性抗原（細菌或細胞等）與相應抗體結合，在一定條件下，出現(xiàn)肉眼可

7、見的凝集物，稱為凝集反應(agglutination)。（一）凝集反應（AgglutinationTests）1．直接凝集（directagglutination)：細菌或紅細胞與相應抗體直接反應，可出現(xiàn)細菌或紅細胞凝集現(xiàn)象。2．間接凝集（indirectorpassiveagglutination)：檢測針對可溶性Ag的Ab3．間接凝集抑制試驗(directagglutinationinhibitiontest)4.協(xié)同凝集試驗（co-agglutinationtest）1．直接凝集+?Qua

8、litativeagglutinationtest（定性凝集實驗）AgorAbApplicationsBloodtyping（血型測定）Bacterialinfections（細菌性感染）PracticalconsiderationsEasy（簡便）Semi-quantitative（半定量）2、間接凝集Definition-agglutinationtestdonewithasolubleantigencoatedontoaparticleApplicationsMeasurementofan