《疫學(xué)應(yīng)用》PPT課件

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1、第十五章免疫學(xué)應(yīng)用教學(xué)目的：掌握：基于抗原–抗體反應(yīng)的檢測方法；免疫細(xì)胞的檢測方法；人工（自然）主動免疫、人工（自然）被動免疫的概念。理解：基于抗原-抗體反應(yīng)的特點及影響因素；免疫分子的檢測原理；免疫細(xì)胞的檢測方法與原理；以抗體、細(xì)胞和細(xì)胞因子為基礎(chǔ)的免疫治療了解：免疫分子的檢測原理；免疫學(xué)診斷的原理、常用的免疫功能檢測指標(biāo)；免疫治療制劑的類型和作用機(jī)制教學(xué)重點：基于抗原－抗體反應(yīng)的檢測方法及原理；人工（自然）主動免疫、人工（自然）被動免疫的概念。教學(xué)難點：抗原-抗體反應(yīng)的特點及影響因素。使用教

2、材：《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》（第二版），龔非力主編，科學(xué)出版社，2007年。參考教材：《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》（第五版），金伯泉主編，人民衛(wèi)生出版社，2008年；/主要內(nèi)容第一節(jié)　基于Ag-Ab反應(yīng)的檢測方法第二節(jié)　免疫細(xì)胞的檢測第三節(jié)　免疫分子的檢測第四節(jié)免疫學(xué)預(yù)防第一節(jié)　基于Ag-Ab反應(yīng)的檢測方法抗原-抗體反應(yīng)：指抗原與相應(yīng)抗體在體內(nèi)、外發(fā)生高度特異性結(jié)合反應(yīng)。由于實驗所用的抗體存在于血清中，故又稱血清學(xué)反應(yīng)（serologicalreaction)應(yīng)用：用已知抗原檢測未知抗體；用已知抗體檢測未知抗原：定性

3、或定量檢測體內(nèi)各種分子；用已知抗體檢測半抗原物質(zhì)。（一）特異性和交叉反應(yīng)特異性：一種抗原通常僅能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體結(jié)合。分子基礎(chǔ)：抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補(bǔ)性。一、抗原-抗體反應(yīng)的特點交叉反應(yīng)（crossreaction）性：若兩種抗原分子有一個或數(shù)個相同（或相似）的決定基，則針對一種抗原的抗血清可與另一種抗原發(fā)生反應(yīng)。結(jié)合價：天然抗原分子表面一般含多種抗原決定基，可與多個抗體分子結(jié)合，為多價。單體形式的抗體分子有兩個Fab段，能結(jié)合兩個相同的抗原決定基，為兩價。前帶現(xiàn)象（p

4、rozone）和后帶現(xiàn)象(postzone)Ab過剩和Ag過剩（二）抗原-抗體結(jié)合的帶現(xiàn)象與可見性前帶現(xiàn)象（prozone）和后帶現(xiàn)象(postzone)Ab過剩和Ag過剩比例合適：若抗原、抗體的數(shù)量比例合適，抗體分子的兩個Fab段分別與兩個抗原決定基結(jié)合，相互交叉連接成網(wǎng)格狀復(fù)合體，則反應(yīng)體系中基本不存在游離的抗原或抗體，此時形成肉眼可見的反應(yīng)物（沉淀物或凝集物）。因此，確定反應(yīng)體系中抗原、抗體的最適比例十分重要?？乖?抗體反應(yīng)為分子表面的非共價結(jié)合，結(jié)合雖穩(wěn)定但可逆。在一定條件下（如低pH、

5、高濃度鹽、凍融等），抗原-抗體復(fù)合物可被解離。解離后的抗原和抗體仍保持原有理化特性和生物學(xué)活性。根據(jù)此特點，可借助親和層析法純化抗原或抗體。（三）可逆性（一）電解質(zhì)抗原和抗體有對應(yīng)的極性基團(tuán)，能相互吸附并由親水性變?yōu)槭杷浴ｋ娊赓|(zhì)的存在使抗原-抗體復(fù)合物失去電荷而凝聚，出現(xiàn)可見反應(yīng)，故免疫學(xué)試驗中多用生理鹽水稀釋抗原或抗體。二、抗原-抗體反應(yīng)的影響因素（二）酸堿度抗原抗體反應(yīng)的最適pH是6-8。（三）溫度最適溫度為37℃。有些例外，如冷凝集素在4℃左右與紅細(xì)胞結(jié)合最好，20℃以上反而解離。（四）

6、抗原和抗體的性質(zhì)抗體的特異性和親和力是決定抗原-抗體反應(yīng)的關(guān)鍵因素。此外，抗原理化性質(zhì)、抗原決定基多寡和種類等均可影響抗原-抗體反應(yīng)?？贵w分子上一個抗原結(jié)合點與對應(yīng)的抗原決定基之間的結(jié)合能力親和力(affinity)一個抗體分子與整個抗原分子間的結(jié)合強(qiáng)度親合力(avidity)根據(jù)抗原的性質(zhì)、結(jié)合反應(yīng)的現(xiàn)象、參與反應(yīng)的成分等因素分類：（一）凝集反應(yīng)（二）沉淀反應(yīng)（三）補(bǔ)體參加的反應(yīng)（四）免疫標(biāo)記技術(shù)三、Ag-Ab反應(yīng)的基本檢測方法顆粒性抗原（細(xì)菌或細(xì)胞等）與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下，出現(xiàn)肉眼可

7、見的凝集物，稱為凝集反應(yīng)(agglutination)。（一）凝集反應(yīng)（AgglutinationTests）1．直接凝集（directagglutination)：細(xì)菌或紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體直接反應(yīng)，可出現(xiàn)細(xì)菌或紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。2．間接凝集（indirectorpassiveagglutination)：檢測針對可溶性Ag的Ab3．間接凝集抑制試驗(directagglutinationinhibitiontest)4.協(xié)同凝集試驗（co-agglutinationtest）1．直接凝集+?Qua

8、litativeagglutinationtest（定性凝集實驗）AgorAbApplicationsBloodtyping（血型測定）Bacterialinfections（細(xì)菌性感染）PracticalconsiderationsEasy（簡便）Semi-quantitative（半定量）2、間接凝集Definition-agglutinationtestdonewithasolubleantigencoatedontoaparticleApplicationsMeasurementofan