葉綠素的提取

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1、葉綠體中色素的提取和分離一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆杖~綠體色素的提取方法；掌握紙層析法分離葉綠體色素的原理和步驟；掌握葉綠體色素的部分理化性質(zhì)。二、實(shí)驗(yàn)原理1.葉綠體中的色素能溶解在丙酮（有機(jī)溶劑:酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取葉綠體中色素。2.色素在層析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散得快，溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散得慢，因而可用層析液將不同的色素分離。四種色素的化學(xué)性質(zhì)均為親脂性>親水性：均不溶于水，而溶于有機(jī)溶劑，故可用乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑提取。極性大?。喝~綠素b>葉綠素a>葉黃素>胡蘿卜素根據(jù)相似相溶原理，在有機(jī)溶

2、液中的溶解度：葉綠素b<葉綠素a<葉黃素<胡蘿卜素三、葉綠素的光學(xué)性質(zhì)葉綠素與類胡蘿卜素都具有光學(xué)活性，表現(xiàn)出一定的吸收光譜，可用分光光度計(jì)精確測(cè)定。四、實(shí)驗(yàn)材料與試劑新鮮的菠菜葉片。95%乙醇、CaCO3、醋酸銅結(jié)晶、濃鹽酸、汽油。量筒，濾紙，大培養(yǎng)皿一只，小培養(yǎng)皿一只，長(zhǎng)滴管，剪刀。五.實(shí)驗(yàn)步驟1.提取葉綠素研磨法提取光合色素材料剪碎研磨法加入有機(jī)溶劑研磨、勻漿過(guò)濾提取液將深綠色的菠菜葉剪碎放入研缽中。放入少量的SiO2和CaCO3，再加入3滴管無(wú)水乙醇后迅速、充分研磨至糊狀。將糊狀研磨物倒入放有尼龍布的漏斗中，用研缽錘擠壓，將濾液收集到小玻璃瓶中，并蓋上瓶蓋。具

3、體實(shí)驗(yàn)步驟（提取色素）2、葉綠體色素的分離——（紙層析法）用濾紙條浸色素提取液（試管1），吹干，反復(fù)多次；將帶色素的濾紙條卷成燈芯，將表面皿放在培養(yǎng)皿內(nèi)，注上汽油，把燈芯浸在汽油內(nèi)，加蓋，色素層分清后，取下吹干，即可看到分離的各種色素。實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵1.選材時(shí)應(yīng)注意選擇鮮嫩、色濃綠、無(wú)漿汁的葉片。如菠菜葉、棉花葉、洋槐葉等。2.畫濾液細(xì)線時(shí)應(yīng)以細(xì)、齊、直為標(biāo)準(zhǔn)，重復(fù)畫線時(shí)必須等上次畫線干燥后再進(jìn)行，重復(fù)2-3次。3.層析時(shí)不要讓濾液細(xì)線觸及層析液。1.因丙酮和層析液都是易揮發(fā)且有一定毒性的有機(jī)溶劑，所以研磨要快，收集的濾液要用棉塞塞住，層析時(shí)要加蓋，盡量減少有機(jī)溶劑的揮發(fā)。

4、2.在研磨時(shí)要加少許二氧化硅，目的是為了研磨充分，有利于色素的提?。患由僭S碳酸鈣的目的是為了防止研磨過(guò)程中，葉綠體中的色素受到破壞。3.分離色素時(shí)，一定不要讓濾紙條上的濾液細(xì)線接觸到層析液，這是因?yàn)樯匾兹芙庠趯游鲆褐校瑢?dǎo)致色素帶不清晰，影響實(shí)驗(yàn)效果。注意事項(xiàng)葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)結(jié)果（西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙）（寫清姓名、班級(jí)、實(shí)驗(yàn)名稱、日期等）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)記錄1.講義中的表格（改動(dòng)見(jiàn)下頁(yè)）2.畫圖四、討論及思考題1.談?wù)勀阍趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中的成功經(jīng)驗(yàn)，或失敗的教訓(xùn)2.思考題實(shí)驗(yàn)報(bào)告思考題1.研磨時(shí)要使葉綠素能夠提取出來(lái)，要破壞多少層膜？2.濾紙剪

5、角的目的是什么？3.到了秋天葉色變黃、變紅的原因是什么？葉綠體中色素的提取和分離