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1、果膠酶的研究及其應(yīng)用LOGO前言果膠酶(Pectinases)是指分解果膠物質(zhì)的多種酶的總稱,在食品加工、飼料加工、造紙、環(huán)境保護(hù)、誘導(dǎo)植物抗病等方面都有很大的應(yīng)用價(jià)值。果膠酶可源于動(dòng)物、植物和微生物。由于動(dòng)、植物及天然來(lái)源的果膠酶產(chǎn)量低且提取困難,不能滿足生產(chǎn)的需要;而微生物因生長(zhǎng)速度快,生長(zhǎng)條件簡(jiǎn)單,代謝過(guò)程特殊和分布廣因而成為果膠酶的重要來(lái)源。隨著果膠酶用量的增加及發(fā)酵工業(yè)的發(fā)展,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)微生物果膠酶進(jìn)行了深入地研究,并已有多種微生物來(lái)源的果膠酶商品酶制劑出售。本文主要從以下幾方面概述了果膠酶近年來(lái)的研
2、究進(jìn)展及其在果蔬、紡織、造紙加工業(yè)中的應(yīng)用概況。Contents果膠酶1果膠酶的應(yīng)用2展望341果膠酶1.1果膠酶的分布許多霉菌及少量的細(xì)菌和酵母菌都可產(chǎn)生果膠酶,主要以曲霉和桿菌為主,新近報(bào)道的其它菌有青霉如意大利青霉、擴(kuò)展青霉等,白絹菌、立枯絲核菌、微小毛霉、高大毛霉、熱解糖梭菌、匐枝根霉、出芽短梗霉、粗糙鏈孢霉、嗜熱側(cè)孢霉等。由于真菌中的黑曲霉屬于公認(rèn)安全級(jí),其代謝產(chǎn)物是安全的。因此目前市售的食品級(jí)果膠酶主要來(lái)源于黑曲霉,最適pH值一般在酸性范圍。近年來(lái),一些來(lái)源于細(xì)菌桿菌屬的堿性果膠酶日益受到重視如浸麻芽
3、孢桿菌等。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷提高,也可利用基因克隆技術(shù)實(shí)現(xiàn)果膠酶在其它微生物宿主的表達(dá)。1果膠酶1.2果膠酶類型通常情況下??筛鶕?jù)以下標(biāo)準(zhǔn)對(duì)果膠酶進(jìn)行分類:1)果膠、果膠酸、原果膠是否為其優(yōu)先底物;2)底物是被反式消去作用還是水解;3)切割方式是隨意的(內(nèi)切酶)還是發(fā)生在末端方向的(外切酶)。根據(jù)以上分類標(biāo)準(zhǔn),果膠酶一般可分為以下三大類。1.2.1果膠酯酶(Pectinesterase,PE)隨機(jī)切割甲酯化果膠分子中的甲氧基,產(chǎn)生甲醇和游離羧基。1.2.2解聚酶(Depolymerizingenzymes)
4、水解酶專一水解底物的糖苷鍵,可分為:(1)聚甲基半乳糖醛酸酶(Polymethylgalacturonase,PMG);可分為內(nèi)切酶(endo-PMG)與外切酶(exo-PMG)。(2)聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG);也可分為內(nèi)切酶(endo-PG)與外切酶(exo-PG)。另一類解聚酶則通過(guò)反式消去作用切割底物的α-1,4-糖苷鍵,降解產(chǎn)物帶有還原基團(tuán)和雙鍵,雙鍵位于產(chǎn)物非還原末端C4、C5之間,并在235nm處產(chǎn)生最大紫外吸收。此類酶稱為裂解酶,可分為(1)聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(
5、Polymethylgalac-turonatelyase,PMGL):俗稱果膠裂解酶(PNL),可分為內(nèi)切酶(endo-PMGL)與外切酶(exo-PMGL);(2)聚半乳糖醛酸裂解酶(Polygalacturonatelyase,PGL):又稱果膠酸裂解酶(PL),也可分為內(nèi)切酶(endo-PGL)與外切酶(exo-PGL)。1.2.3原果膠酶(Protopectinase,PPase)原果膠酶是一種可以催化原果膠水解的胞外酶類,可將原果膠分解為水溶性的高聚合度果膠。根據(jù)其作用方式可分為(1)A-型原果膠酶(
6、A-PPase);作用于原果膠內(nèi)部區(qū)域的聚半乳糖醛酸部位;(2)B-型原果膠酶(B-PPase):作用于與聚半乳糖醛酸鏈和細(xì)胞壁組份(如纖維素等)相連的多糖鏈。1978年,日本學(xué)者Sakai等從酵母中發(fā)現(xiàn)了具有釋放高聚合果膠能力的原果膠酶產(chǎn)生菌株。20多年來(lái),他們對(duì)各種微生物原果膠酶的酶學(xué)性質(zhì),作用機(jī)理及工業(yè)應(yīng)用等方面做了大量的研究?,F(xiàn)已從細(xì)菌,酵母和霉菌中篩選出產(chǎn)該酶的菌株。2果膠酶的應(yīng)用2.1利用果膠酶瓦解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁2.1.1果膠酶澄清作用果膠酶是能分解果膠質(zhì)的多種酶的總稱,包括果膠聚半乳糖醛酸酶、聚甲
7、基半乳糖醛酸酶、果膠甲酯水解酶、原果膠酶。果膠酶作用于果膠中D-半乳糖醛酸殘基之間的糖苷鍵,可以打破果膠分子,軟化果肉組織中的果膠質(zhì),使高分子的半乳糖醛酸降解為半乳糖醛酸和果膠酸小分子物質(zhì),并且果膠的多糖鏈也被降解,果膠分子的這種連續(xù)降解使果酒的黏性下降,原來(lái)存在果酒中的固形物失去依托而沉降下來(lái),增強(qiáng)澄清效果,提高和加快了果酒的可濾性和過(guò)濾速度。因此果膠酶是應(yīng)用于果酒生產(chǎn)的重要酶制劑之一,它被廣泛用于果酒的澄清。2果膠酶的應(yīng)用蘆薈汁在加工過(guò)程中極易產(chǎn)生渾濁與變色現(xiàn)象。因此,其穩(wěn)定化工藝是蘆薈深加工的關(guān)鍵。新鮮的蘆
8、薈凝膠是一種高黏度的汁液,須經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)奶幚聿拍苓M(jìn)行穩(wěn)定化的后續(xù)工藝。導(dǎo)致蘆薈凝膠汁粘度高的果膠分子,是引起蘆薈汁渾濁的原因之一。蘆薈汁穩(wěn)定化工藝的關(guān)鍵技術(shù)之一是澄清工藝。采用果膠酶處理蘆薈汁.其原理是利用果膠酶水解蘆薈汁中能夠引起渾濁的果膠物質(zhì)。使蘆薈汁變得清澈透亮。2果膠酶的應(yīng)用2.1.2天然產(chǎn)物的提取果膠物質(zhì)的存在不同程度的影響或阻礙著天然產(chǎn)物的釋放。在適宜條件下,植