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《臨床醫(yī)學(xué)論文-體外富集Treg細胞對CTL殺傷MNK45胃癌細胞活性的影響及機制研究.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、臨床醫(yī)學(xué)論文■體外富集Treg細胞對CTL殺傷MNK45胃癌細胞活性的影響及機制研究作者：曾冬竹鄭峻松王自強吳淼余佩武【摘要】目的體外分析CD4+CD25+Treg(regulatoryTcells)細胞對CD8+CTL(cytotoxicTlymphocytes)細胞殺傷MNK45胃癌細胞株活性的影響及機制。方法通過T細胞純化柱分選小鼠脾細胞懸液T淋巴細胞，以MACS單陽性和雙陽性分選法分別富集CD4+CD25+Trcg細胞和CD8+CTL；通過不同濃度CD8+CTL與MNK45胃癌細胞混合培養(yǎng)，篩選有效殺瘤體外培養(yǎng)體系。通過TznsWcll分隔
2、培養(yǎng)和混合培養(yǎng)的方式向CTL與MNK45胃癌細胞株組成的體外抗腫瘤培養(yǎng)體系屮加入CD4+CD25+Treg細胞，以瑞氏染色顯微計數(shù)的方法觀察Treg細胞對CTL殺傷MNK45胃癌細胞活性的影響，結(jié)合ELISA法檢測各體系穿孔素濃度，分析影響活性的細胞及免疫學(xué)機制。結(jié)果質(zhì)量濃度為2.0X105/ml的CTL與l?0X105/mlMNK45胃癌細胞混合培養(yǎng)，CTL能對MNK45胃癌細胞形成明顯的殺傷作用(P<0.01)；在此培養(yǎng)體系屮以混合培養(yǎng)的方式加入質(zhì)量濃度為5.0X104/mlCD4+CD25+Treg細胞即可明顯抑制培養(yǎng)體系屮CTL對腫瘤細胞的
3、殺傷作汕如以TransWell分隔培養(yǎng)的方式將CD4+CD25+Treg細胞與抗腫瘤培養(yǎng)體系分隔培養(yǎng)，達到同樣抑制效能(實驗組死亡腫瘤細胞百分率與對照組比較，P<0.05)的CD4+CD25+Treg細胞濃度須22.0X105/ml。結(jié)論CD4+CD25+Treg細胞能夠?qū)TL殺傷MNK45胃癌細胞株的活性形成明顯抑制，在Treg細胞與CTL作用的相應(yīng)細胞和免疫學(xué)機制屮，細胞接觸機制占主導(dǎo)地位。【關(guān)鍵詞】胃腫瘤調(diào)節(jié)性T細胞細胞毒性T淋巴細胞MNK45胃癌細胞株[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofe
4、nrichedCD4+CD25+TregulatorycellsoncytotoxicityofCTLagainstgastriccancercelllineMNK45cellsinvitroandexplorethepossibleunderlyingmechanism.MethodsAfterTcellsenrichment,MACSseparatingsystemwasusedtosortCD8+CTLandCD4+CD25+TregfromspleenTlymphocytes?TheoptimalconcentrationofCTLandt
5、hebestcultureconditionwereexploredbymeasuringthecytotoxicityofCTLagainstMNK45atdifferentdoses.ThenCD4+CD25+Tregwereaddedintotheculturesystemorinaseparatewc11intranswcl1system?TheinfluenceofTrcgoncytotoxicityofCTLwasinvestigatedbycountinginactiveMNK45cells?Mowovet,thecellularan
6、dimmunologicalmechanismwhichmightbeinvolvedwasanalyzed.ResultsTntheculturesystem,CTLshowedsignificanteffectagainstMNK45(P<0.01).When1.0ml(5.OX104/ml)wasaddedtothisreactionsystem,theamountofkiliedMNK45cellsdecreaseobviously(P<0.05)?AndwhenTregcelIswereculturedseperatlyintheTran
7、sWei1system,Tregcellsmustbeincreased2.0X105/mltoachievethesameinhibitoryeffect?ConclusionsCD4+CD25+TregulatorycellscouldexertinhibitoryeffectonCD8+CTLki1lingfunctioninvitro,thecelltocellcontactmechanismplaysimportantrolesinmediatingthiseffect?[Keywords]Gastrictumor;RegulatoryT
8、cells;CytotoxicTlymphocyte;MNK45止常機體的抗腫瘤機制主要包括體液免疫和細胞免疫兩方面，兩者
