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1、第46卷第11期2016年11月中國海洋大學(xué)學(xué)報PERl0DICAL0F0CEANUNIVERsITY0FCHINA46(11)：117～126NOV．，2016肉骨粉部分替代魚粉對大菱鲆幼魚氨基酸應(yīng)答信號通路的影響+宋飛，許丹丹，周慧慧，麥康森，徐瑋，何艮“(中國海洋大學(xué)水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料農(nóng)業(yè)部重點實驗室，海水養(yǎng)殖教育部重點實驗室，山東青島266003)摘要：為研究肉骨粉部分替代魚粉(添加或不添加晶體氨基酸)對大菱鲆(&ophthalmusmaximusL．)幼魚的氨基酸應(yīng)答(AAR)信號通路中關(guān)鍵調(diào)控因子基因表達量的影響。設(shè)計了3種等氮等能的飼料：魚粉對照組(F
2、M，60％魚粉)，肉骨粉替代組(MBM，肉骨粉替代45％魚粉蛋白)，肉骨粉替代添加晶體必需氨基酸組(MBM+AA，肉骨粉替代45％魚粉蛋白，添加晶體必需氨基酸至魚粉組必需氨基酸水平)。實驗選取初始體質(zhì)量(9．01±0．01)g的大菱鲆，分別飽食投喂3種不同的飼料30天，檢測肌肉和腸道中AAR信號通路中關(guān)鍵調(diào)控因子的基因表達量。研究表明：與FM組相比，MBM組顯著提高了大菱鲆幼魚肌肉中谷氨酰胺合成酶(Asparaginesynthesis，ASNS)、轉(zhuǎn)錄激活因子3(Activatingtranscriptionfactor3，ATF3)、轉(zhuǎn)錄激活因子4(Activa
3、tingtranscriptionfactor4，ATF4)、CCAAT增強子結(jié)合蛋白(CCAAT-enhancebindingpro—teinhomologyprotein，CHOP)、發(fā)育和DNA損傷應(yīng)答調(diào)節(jié)因子1(RegulatedindevelopmentandDNAdamageresponsesl，REDDl)和真核翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1(Eukaryoticinitiationfactor4Ebindingprotein1，4E-BPl)表達量的峰值。在攝食后2h，^佃M+AA組的ASNS、ATF3、ATF4、CHOP、REDDl和4E-BPl表達量
4、峰值與FM組的表達量峰值無顯著性差異，卻顯著低于MBM組的表達量峰值。3個處理組肌肉中酵母轉(zhuǎn)錄激活因子2(Generalcontrolnonderepressible2，GCN2)的基因表達量無顯著性差異。同時，與FM組相比，MBM組顯著上調(diào)腸道中GCN2、ASNS、ATF4、CHOP和4E_BPl表達量的峰值，MBM+AA組對于降低這些基因的表達量無顯著性效果。研究結(jié)果表明：肉骨粉替代45％魚粉蛋白上調(diào)了肌肉和腸道中AAR信號通路中關(guān)鍵因子的表達，添加晶體氨基酸可以在一定程度上改善肉骨粉替代魚粉對于肌肉中AAR信號通路中關(guān)鍵調(diào)控因子表達量的上調(diào)作用。關(guān)鍵詞：大菱鲆
5、；肉骨粉；魚粉；氨基酸應(yīng)答信號通路；關(guān)鍵調(diào)控因子；基因表達中圖法分類號：$963文獻標志碼：A文章編號：1672—5174(2016)11—117—10DOI：10．16441／j．cnki．hdXb．20160239引用格式：宋飛，許丹丹，周慧慧，等．肉骨粉部分替代魚粉對大菱鲆幼魚氨基酸應(yīng)答信號通路的影響I-J3．中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2016，46(11)：117-126．SONGFei，XUDan-Dan，ZHOUHui—Hui，eta1．Influenceoffishmealreplacementwithmeatandbonemealonamino
6、acidresponsesignalingpathwayofjuvenileturbot(ScophthalmusmaximusL)[J]．PeriodicalofOceanUniversityofChina，2016，46(11)：117-126．近年來，隨著海水魚飼料業(yè)的快速發(fā)展，魚粉作為優(yōu)質(zhì)蛋白源，其價格和產(chǎn)量已顯著的限制了海水魚飼料業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展[1’2]。因此，研究者越來越多的關(guān)注于尋找優(yōu)質(zhì)的植物、動物蛋白源替代魚粉的研究[3。4]。肉骨粉作為一種優(yōu)質(zhì)動物蛋白源，廣泛的應(yīng)用于海水魚飼料中以部分替代魚粉[5嵋]。但是與魚粉相比肉骨粉有氨基酸組成不平衡、適口
7、性差和消化率低等缺點，這些因素嚴重限制了肉骨粉在水產(chǎn)飼料業(yè)中的使用[7]。海水魚類上關(guān)于肉骨粉替代魚粉的研究主要關(guān)注其替代后對魚體生長、魚體組成以及生化相關(guān)指標的影響。研究發(fā)現(xiàn)，過高比例的肉骨粉替代魚粉能夠顯著的降低魚類生長、魚體營養(yǎng)物質(zhì)積累和擾亂機體代謝水平。然而，對于上述現(xiàn)象的背后的機制研究尚未見報道。氨基酸應(yīng)答(Aminoacidresponse，AAR)信號通路是生物體內(nèi)一條高度保守的感知體內(nèi)營養(yǎng)缺乏的信號通路[8’9]。當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)缺乏時，機體會激活體內(nèi)的AAR信號通路，從而抑制體內(nèi)整體的蛋白質(zhì)翻譯過*基金項目：國家自然科學(xué)基金項目(31222055，3
