高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法測定黃芪中單糖和雙糖的含量.pdf

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1、Websitehttp：／／xuebao．a(chǎn)htem．edu．cnE-mailahxbbjb@163．com82安徽中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報第34卷第2期2015年4月JANHUIUNIVCHINESEIVIEDVo1．34No．22Apr．2015高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法測定黃芪中單糖和雙糖的含量李芳，胡容峰。，黃麗丹，王斌。(1．安徽中醫(yī)藥大學(xué)研究生部，安徽合肥230038；2．省部共建新安醫(yī)學(xué)教育部重點實驗室，安徽合肥230038；3．安徽省“l(fā)15”新安醫(yī)藥研究與開發(fā)創(chuàng)新團隊，安徽合肥230038；4．安徽省中藥研究與開發(fā)重點實驗室，安徽合肥23

2、0012；5．安徽省食品藥品檢驗研究院，安徽合肥230051)[摘要]目的采用高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法建立黃芪中單糖和雙糖含量的測定方法。方法色譜柱為WatersXBridge氨基柱(250mm×4．6mm，5雎m)，流動相為乙腈一水(70：30)，流速為1．0mL／min，柱溫為30。C。蒸發(fā)光散射檢測器參數(shù)：霧化器溫度為50℃，漂移管溫度為9O℃，氣體流量為1．60L／rain，增益值為1．0。結(jié)果果糖、蔗糖和麥芽糖分別在0．10～0．90g(r一0．9999)、1．OO～9．O0fig(r===0．9996)、0．25～2．25恥g(r一

3、0．9994)范圍內(nèi)其對數(shù)值與峰面積的對數(shù)值呈良好的線性關(guān)系；平均回收率分別為97．97(RSD—1．56)、97．82(RSD一1．53)、97．36(RSD一1．59)。結(jié)論所建立的高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法簡單、準確、重復(fù)性好，可用于黃芪中單糖和雙糖的含量測定。[關(guān)鍵詞]黃芪；高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法；果糖；蔗糖；麥芽糖[中圖分類號]R927．2[文獻標志碼]AEDOI]lO．3969／j．issn．2095-7246．2015．02．024中藥復(fù)方腦絡(luò)欣通是著名新安醫(yī)家王樂勻先生380一ELSD檢測器：美國安捷倫公司；WatersX針對

4、缺血性中風(fēng)而創(chuàng)立的臨床驗方，黃芪是復(fù)方腦BridgeTM氨基柱(250mm×4．6mm，5“m)：美國沃絡(luò)欣通中君藥_】]。黃芪是豆科草本植物蒙古黃芪特世公司；ML204型電子天平：瑞典METTLERAstragalusmembranaceus(Fisch．)Bge．var．mon—T0LEDO公司；HH—S2系列恒溫水浴鍋：江蘇金壇gholicus(Bge．)Hsiao或莢膜黃芪AstragalusP一市環(huán)宇科學(xué)儀器廠；WB一2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：鄭州長branaceus(Fisch．)Bge．的根，具有補氣升陽、固表城科工貿(mào)有限公司；SHB一Ⅲ

5、循環(huán)水式多用真空泵：止汗、利水消腫、生津養(yǎng)血等功效]，臨床上應(yīng)用于鄭州長城科工貿(mào)有限公司；HeraeusMultifugeX1R治療病毒性心肌炎、糖尿病、炎癥和腫瘤口_6_。離心機：賽默飛世爾科技公司；KQ_2200型超聲波黃芪藥材中含有豐富的糖類成分，測定糖類成清洗器：江蘇省昆山市超聲儀器有限公司。分的含量常用的方法是比色法，此方法穩(wěn)定性和操1．2試藥果糖對照品(批號100231—200904，供作精密度都較差，且只能測定總糖含量，不能分析糖含量測定用)、蔗糖對照品(批號111507—201303，供含量測定用)和麥芽糖對照品(批號100287

6、—的種類，高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography，HPLC)可改善以上不足_7]。目前201102，供含量測定用)：均購于中國食品藥品檢定研究院；黃芪(產(chǎn)地為內(nèi)蒙古，批號12091301)：購于針對黃芪中糖類成分的研究主要集中在多糖方面，而對于單糖和雙糖的研究報道卻很少。本實驗中筆合肥樂家老鋪中藥飲片有限公司；乙腈：色譜純，瑞典；水為純化水；其他試劑為分析純。者采用HPLC和蒸發(fā)光散射檢測器(evaporative2方法與結(jié)果lightscatteringdetector，ELSD)建立了黃芪中單糖

7、2．1色譜條件色譜柱為WatersXBridgeTM氨基和雙糖含量的測定方法。柱(250mm×4．6mm，5fm)，流動相為乙腈一水1儀器與試藥(70：30)，流速為1．0mL／min，柱溫為30。C。ELSD1．1儀器Agilent1260高效液相色譜儀和Agilent參數(shù)：霧化器溫度為50℃，漂移管溫度為9O℃，蒸發(fā)基金項目：國家科技支撐計劃項目(2012BAI26B03)；國家自器氣流為1．60L／min，增益值為1．0。此條件下然科學(xué)基金項目(81274100)；安徽省學(xué)術(shù)和技術(shù)帶頭人HPLC色譜圖見圖1。及后備人選學(xué)術(shù)科研活動經(jīng)費資助項

8、目(皖人社秘2．2對照品溶液的配制精密稱取適量果糖、蔗2O¨一381號一26)糖、麥芽糖對照品，分別置于容量瓶中，加入純化水作者簡介：李