高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法測(cè)定黃芪中單糖和雙糖的含量.pdf

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1、Websitehttp://xuebao.a(chǎn)htem.edu.cnE-mailahxbbjb@163.com82安徽中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)第34卷第2期2015年4月JANHUIUNIVCHINESEIVIEDVo1.34No.22Apr.2015高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法測(cè)定黃芪中單糖和雙糖的含量李芳,胡容峰。,黃麗丹,王斌。(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)研究生部,安徽合肥230038;2.省部共建新安醫(yī)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽合肥230038;3.安徽省“l(fā)15”新安醫(yī)藥研究與開發(fā)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì),安徽合肥230038;4.安徽省中藥研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽合肥23

2、0012;5.安徽省食品藥品檢驗(yàn)研究院,安徽合肥230051)[摘要]目的采用高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法建立黃芪中單糖和雙糖含量的測(cè)定方法。方法色譜柱為WatersXBridge氨基柱(250mm×4.6mm,5雎m),流動(dòng)相為乙腈一水(70:30),流速為1.0mL/min,柱溫為30。C。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器參數(shù):霧化器溫度為50℃,漂移管溫度為9O℃,氣體流量為1.60L/rain,增益值為1.0。結(jié)果果糖、蔗糖和麥芽糖分別在0.10~0.90g(r一0.9999)、1.OO~9.O0fig(r===0.9996)、0.25~2.25恥g(r一

3、0.9994)范圍內(nèi)其對(duì)數(shù)值與峰面積的對(duì)數(shù)值呈良好的線性關(guān)系;平均回收率分別為97.97(RSD—1.56)、97.82(RSD一1.53)、97.36(RSD一1.59)。結(jié)論所建立的高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于黃芪中單糖和雙糖的含量測(cè)定。[關(guān)鍵詞]黃芪;高效液相色譜一蒸發(fā)光散射法;果糖;蔗糖;麥芽糖[中圖分類號(hào)]R927.2[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]AEDOI]lO.3969/j.issn.2095-7246.2015.02.024中藥復(fù)方腦絡(luò)欣通是著名新安醫(yī)家王樂勻先生380一ELSD檢測(cè)器:美國安捷倫公司;WatersX針對(duì)

4、缺血性中風(fēng)而創(chuàng)立的臨床驗(yàn)方,黃芪是復(fù)方腦BridgeTM氨基柱(250mm×4.6mm,5“m):美國沃絡(luò)欣通中君藥_】]。黃芪是豆科草本植物蒙古黃芪特世公司;ML204型電子天平:瑞典METTLERAstragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mon—T0LEDO公司;HH—S2系列恒溫水浴鍋:江蘇金壇gholicus(Bge.)Hsiao或莢膜黃芪AstragalusP一市環(huán)宇科學(xué)儀器廠;WB一2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:鄭州長(zhǎng)branaceus(Fisch.)Bge.的根,具有補(bǔ)氣升陽、固表城科工貿(mào)有限公司;SHB一Ⅲ

5、循環(huán)水式多用真空泵:止汗、利水消腫、生津養(yǎng)血等功效],臨床上應(yīng)用于鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;HeraeusMultifugeX1R治療病毒性心肌炎、糖尿病、炎癥和腫瘤口_6_。離心機(jī):賽默飛世爾科技公司;KQ_2200型超聲波黃芪藥材中含有豐富的糖類成分,測(cè)定糖類成清洗器:江蘇省昆山市超聲儀器有限公司。分的含量常用的方法是比色法,此方法穩(wěn)定性和操1.2試藥果糖對(duì)照品(批號(hào)100231—200904,供作精密度都較差,且只能測(cè)定總糖含量,不能分析糖含量測(cè)定用)、蔗糖對(duì)照品(批號(hào)111507—201303,供含量測(cè)定用)和麥芽糖對(duì)照品(批號(hào)100287

6、—的種類,高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)可改善以上不足_7]。目前201102,供含量測(cè)定用):均購于中國食品藥品檢定研究院;黃芪(產(chǎn)地為內(nèi)蒙古,批號(hào)12091301):購于針對(duì)黃芪中糖類成分的研究主要集中在多糖方面,而對(duì)于單糖和雙糖的研究報(bào)道卻很少。本實(shí)驗(yàn)中筆合肥樂家老鋪中藥飲片有限公司;乙腈:色譜純,瑞典;水為純化水;其他試劑為分析純。者采用HPLC和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(evaporative2方法與結(jié)果lightscatteringdetector,ELSD)建立了黃芪中單糖

7、2.1色譜條件色譜柱為WatersXBridgeTM氨基和雙糖含量的測(cè)定方法。柱(250mm×4.6mm,5fm),流動(dòng)相為乙腈一水1儀器與試藥(70:30),流速為1.0mL/min,柱溫為30。C。ELSD1.1儀器Agilent1260高效液相色譜儀和Agilent參數(shù):霧化器溫度為50℃,漂移管溫度為9O℃,蒸發(fā)基金項(xiàng)目:國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2012BAI26B03);國家自器氣流為1.60L/min,增益值為1.0。此條件下然科學(xué)基金項(xiàng)目(81274100);安徽省學(xué)術(shù)和技術(shù)帶頭人HPLC色譜圖見圖1。及后備人選學(xué)術(shù)科研活動(dòng)經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)

8、目(皖人社秘2.2對(duì)照品溶液的配制精密稱取適量果糖、蔗2O¨一381號(hào)一26)糖、麥芽糖對(duì)照品,分別置于容量瓶中,加入純化水作者簡(jiǎn)介:李

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