資源描述：
《000001b9_王曉鵬-應(yīng)用藥理》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、酸漿果多糖對(duì)小鼠體液免疫的影響（王曉鵬[注王曉鵬，北京理工大學(xué)生命學(xué)院藥理學(xué)碩士主要研究方向?yàn)槊庖咚幚韺W(xué)]，李巖[注李巖，北京理工大學(xué)生命學(xué)院教授主要研究方向?yàn)槟[瘤免疫藥理學(xué)]）摘要：目的:探討在不同免疫狀態(tài)下,酸漿果多糖(SJDT)對(duì)小鼠體液免疫的調(diào)節(jié)作用。方法：采用綿羊紅細(xì)胞(SRBC)誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生SRBC抗體模型及環(huán)磷酰胺(Cy)誘導(dǎo)小鼠免疫增強(qiáng)和抑制模型。小鼠連續(xù)灌胃SJDT7d。采用MTT法檢測(cè)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠胸腺B淋巴細(xì)胞增殖,分光光度法測(cè)小鼠血清半數(shù)溶血值(HC50)和小鼠脾
2、細(xì)胞IgM抗體生成水平。結(jié)果:SJDT(400mg·kg-1)灌胃給藥7d能提高正常小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清HC50和脾臟B細(xì)胞增殖,SJDT(200,400mg·kg-1)對(duì)Cy(150mg·kg-1)誘導(dǎo)的免疫低下小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清HC50、脾臟B細(xì)胞增殖、脾細(xì)胞IgM水平具有明顯的恢復(fù)作用,SJDT(400mg·kg-1)對(duì)Cy(250mg·kg-1)誘導(dǎo)的免疫亢進(jìn)小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟B細(xì)胞增殖和脾細(xì)胞IgM水平均有下調(diào)作用。結(jié)論:SQDG對(duì)小鼠體液免疫反應(yīng)具有一定的雙向調(diào)節(jié)
3、作用。關(guān)鍵詞：酸漿多糖、體液免疫、雙向調(diào)節(jié)近年來(lái)，傳統(tǒng)中藥和天然藥物的研發(fā)取得較大進(jìn)展，其活性成分如多糖都有良好的免疫調(diào)節(jié)作用，臨床上應(yīng)用中藥治療免疫失調(diào)型疾病取得相當(dāng)療效。酸漿果多糖是較為典型的植物多糖，目前已有報(bào)道[1]表明酸漿果多糖有一定的免疫調(diào)節(jié)作用。研究藥物的免疫藥理學(xué)作用時(shí)，多以病態(tài)模型進(jìn)行研究。本實(shí)驗(yàn)采用SRBC誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生SRBC抗體模型及環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide，Cy)誘導(dǎo)小鼠免疫增強(qiáng)和抑制模型。在抗原刺激前給小鼠腹腔注射Cy，可明顯增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)，可能是由于抑
4、制和消除了Ts細(xì)胞的前體，減少Ts細(xì)胞對(duì)免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)；在抗原刺激后注射，則主要抑制Th細(xì)胞，從而使抗原抗體反應(yīng)降低。本實(shí)驗(yàn)研究SJDT對(duì)不同免疫狀態(tài)下小鼠抗體生成的作用，探討其體液免疫調(diào)節(jié)作用的部分機(jī)制。材料與方法1.實(shí)驗(yàn)材料1.1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明小鼠，雄性，8周齡，18-22g，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供，許可證號(hào)：SCXK(京)2006-0008，先在動(dòng)物房適應(yīng)性培養(yǎng)3天后分組實(shí)驗(yàn)。1.2.藥品與主要試劑SJDT：酸漿果多糖，有北京理工大學(xué)生命學(xué)院藥理實(shí)驗(yàn)室提取，實(shí)驗(yàn)前用三蒸水配成該實(shí)驗(yàn)
5、所需劑量；無(wú)菌脫纖維綿羊血，由廣州蕊特生物科技有限公司提供，用于實(shí)驗(yàn)前制備SRBC；豚鼠血清，元亨生物提供，用于制作補(bǔ)體；都氏液：碳酸氫鈉1.0g，氰化鉀0.05g，高鐵氰化鉀0.2g，蒸餾水加至1000mL；阿氏液：氯化鈉0.420g，枸櫞酸0.055g，構(gòu)櫞酸鈉0.766g，葡萄糖2.05g，加水溶解并稀釋至100mL，滅菌；環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide，Cy)，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司；四氮基偶氮唑藍(lán)（MTT），Sigma公司產(chǎn)品；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司提供；D
6、MEM：Sigma公司DMEM培養(yǎng)粉，加NaHCO33.7g，三蒸水1L配成溶液，過(guò)濾除菌，用時(shí)溶液中加lⅹl05IU/L青霉素G，100mg/L鏈霉素，100g/L的胎牛血清；磷酸鹽緩沖鹽液(PBS)，將NaCl8.0g，KCl0.2g，KH2PO40.2g，Na2HPO4·12H202.5G，加三蒸水至1000ml，滅菌；.二甲基亞砜(dimethylsulfoxide，DMSO)，廣東汕頭市西隴化工廠。1.3.主要儀器SW-CJ-1D型單人凈化工作臺(tái)：蘇州凈化設(shè)備公司提供；CO2培養(yǎng)箱：德國(guó)H
7、eraeus公司；酶聯(lián)免疫測(cè)定儀：國(guó)營(yíng)華東電子管廠。1.實(shí)驗(yàn)方法1.1.SRBC模型的建立及Cy誘導(dǎo)的小鼠免疫低下及免疫亢進(jìn)模型的建立[2]采用腹腔注射SRBC方法誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生SRBC抗體，致敏當(dāng)天給于腹腔注射Cy(150mg?kg-1)建立免疫抑制模型，致敏前3d腹腔注射Cy(250mg?kg-1)建立免疫亢進(jìn)模型。1.2.實(shí)驗(yàn)分組和給藥方案實(shí)驗(yàn)分正常小鼠的SRBC模型、Cy誘導(dǎo)的小鼠免疫低下模型以及Cy誘導(dǎo)的小鼠免疫亢進(jìn)模型。每大組小鼠隨機(jī)分SRBC模型對(duì)照組、Cy誘導(dǎo)模型組、SJDT低、高2個(gè)
8、劑量組(200,400mg?kg-1)，免疫亢進(jìn)組自注射Cy后d4起、免疫抑制組于致敏前2d開(kāi)始灌胃，qd，連續(xù)7d，正常組、SRBC組和Cy組分別給予相同體積量的生理鹽水灌胃。1.3.胸腺、脾臟指數(shù)的測(cè)定末次給藥前稱重，給藥30min后脫頸處死，立即取出并稱量脾臟、胸腺重量，計(jì)算其指數(shù)。分別以每10g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作為胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。計(jì)算公式如下：脾(胸腺)指數(shù)=脾(胸腺)重量(mg)／體重(10g)1.4.血清半數(shù)溶血值（HC50）的測(cè)定[
