肉湯瓊脂培養(yǎng)基使用說明

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1、編號：022020　　品種名稱：營養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)(NutrientAgar)　　用途：　　用于細菌總數(shù)測定、保存菌種及純培養(yǎng)，也可用于消毒效果測定(GB/T4789.28-2003中4.7，GB/T4789.2-2003，GB15979-2002和GB15981-1995)。　　原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。圖鑒：　　配方(每升)：　　蛋白胨10g　　牛肉膏粉3g　　氯化鈉5g　　瓊脂15g　　最終pH7.3±0.2　　使用方法：　　1、稱取本品33g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶

2、解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用?！　?、(食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL)，放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內(nèi)預(yù)置適當數(shù)量的玻璃珠)，充分振搖，即為1：10的均勻稀釋液。依次做1：100，1：1000……稀釋液。　　3、根據(jù)對樣品污染情況的估計，選擇2—3個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿。　　4、稀釋液移入平皿后應(yīng)及時將涼至46℃左右的培養(yǎng)基注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻，同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。待瓊脂凝固后，倒置于3

3、6±1℃溫箱中培養(yǎng)48±2h?！　?、觀察結(jié)果?！　?、菌落計數(shù)方法：　　做平板菌落計數(shù)時，可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏，在計下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)?！　?、菌落計數(shù)的報告：　　選取菌落數(shù)在30-300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標準。一個稀釋度使用兩個平板，應(yīng)采用兩個平板平均數(shù)，其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線)，若僅有一條鏈，可視為一個

4、菌落;如有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈視為一個菌落計　　A：稀釋度的選擇：　　應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30-300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報告之(見附表)。　　若有兩個稀釋度.其生長的菌落數(shù)無均在30-300之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2，則應(yīng)報告其平均數(shù);若大于2則報告其較小的數(shù)字(見表中例2及3)?！　∪羲邢♂尪鹊钠骄鋽?shù)均大于300則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例4)?！　∪羲邢♂尪鹊钠骄鋽?shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最底的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例5)。　　若所有稀釋度均無菌落生長，則以小于1乘以最底稀釋倍數(shù)報告之(

5、見表中例6)?！　∪粲邢♂尪鹊钠骄鋽?shù)均不在30-300之間，其中一部分大于300或小于30時，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表中例7)?！　【鋽?shù)的報告：　　菌落數(shù)在100以內(nèi)時，按其實有數(shù)報告，大于100時，采用二位有效數(shù)字，在二位數(shù)字后面的有效數(shù)值，以四舍五入法計算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可以用10的指數(shù)來表示(見表中“報告方式欄”)?！　∠♂尪冗x擇及菌落數(shù)報告方式　　例次　　稀釋液及菌落數(shù)　　　　　　　　兩稀釋液之比　　菌落總數(shù)個/g或mL　　報告方式個/g或mL　　10-1　　　　10-2　　　　10-3　　1　　多不可計　　164　　　　

6、　20　　　　——　　　　　　16400　　　　　16000或1.6×104　　2　　多不可計　　295　　　　　46　　　　1.6　　　　　　　37750　　　　　38000或3.8×104　　3　　多不可計　　271　　　　　602.2　　——　　　　　　　27100　　　　27000或2.7×104　　4　　多不可計　　多不可計　　　313　　　——　　　　　　31300　　　　310000或3.1×105　　5　　27　　　　　　11　　　　　5　　　　——　　　　　　270　　　　　　270或2.7×102　　6　　0　　　　　　0　　　　　　0　　　　——　　　　　　<1

7、×10　　　　　　　　<10　　7　　多不可計　　　305　　　　12　　　　——　　　　　　30500　　　　　31000或3.1×104　　質(zhì)量控制：　　本品接種下列菌株，置于36±1℃恒溫箱中培養(yǎng)48±2h，結(jié)果如下：　　菌名　　　　　　菌號　　　　　生長狀況　　菌落特征　　大腸埃希氏菌　　ATCC25922　　　　良好　　　　白色—灰白色，圓形，邊緣整齊，表面光滑，濕潤?！　〗瘘S色葡萄球菌　ATCC6538　　　　良好　　　　黃色，圓形，邊緣整齊，