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1、項目直膽紅素(DBIL)方法重氮鹽法目錄1.檢測原理2.標本采集與處理2.1受檢者的準備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標本處理3.試劑3.1試劑3.2校準血清3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計算7.操作性能7.1精密度7.2準確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理對氨基苯磺酸+HCl+NaNO2---------氯化重氮苯磺酸+NaCl膽紅素+氯化重氮苯磺酸-------偶氮膽紅素2.標本采集與處理2.1受檢者的準備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應有兩周的的正常狀況記錄。注意
2、有無應用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應做相關記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應在每年同一季節(jié)檢驗。應囑體檢對象在抽血前24小時內不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿多主張用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。2.4標本處理：血標本室溫放置30min～45min后離心分離血清或血漿，在兩小時內檢測完畢；如兩小時內不能檢測完畢，將離心分離血清
3、或血漿置潔凈試管加蓋2-8℃保存。3．試劑3.1試劑：本科使用湖南永和陽光科技有限責任公司DBIL試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：組成混合后初始濃度R1：對氨基苯磺酸32mmol/L鹽酸165mmol/LR2：亞硝酸鈉60mmol/L標準液：64.5umol/L(3.75mg/dL)3.2校準血清：使用湖南永和陽光科技有限責任公司提供的40項校準血清。校準頻次：空白定標：每日需做試劑空白定標。全點定標：試劑換批號使用時或質控結果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點定標。3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在2-8℃至標簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存30天。試劑
4、儲存在18-22℃穩(wěn)定28天，試劑應避免污染。試劑R1顏色為無色，試劑R2顏色為無色，當試劑變色，按照試劑失效處理。多項校準血清在2-8℃儲存至標簽所示失效日期，復溶后-20℃保存，可穩(wěn)定一個月，只可凍融一次，避免反復凍融。參見校準血清說明書。4．儀器KONELAB30型號儀器。性能：波長630nm，儀器測定吸光度的靈敏度應達到0.001ABS以上。5．操作樣品為血清或肝素/EDTA抗凝血漿。本法為終點法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設置、定標操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6．計算A標本直接膽紅素濃度=----------------×標準液濃度A標準7．操作性能7.
5、1精密度：批內CV<#％,批間CV<#％。7.2準確度：檢測結果的相對不準確度≤±10%。7.3靈敏度：直接膽紅素濃度為：20μmol/L時，顯色吸光度A450nm為0.158～0.194。7.4可報告范圍：血清與試劑用量之比為1:25時，測定上限為340μmol/L。7.5特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內。7.6干擾：內源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結果無明顯影響。8．參考值0～8.6μmol/L9．臨床意義膽紅素是老化的血紅細胞中血紅蛋白的代謝產物,血液中總膽紅素和直接膽紅素的含量測定有利于肝病和黃疸病
6、的診斷。直接膽紅素是紅肝細胞代謝后生成，經膽道系統(tǒng)隨膽汁一起排泄。由于各種原因引起的肝內阻塞及肝外阻塞，使膽汁排泄途徑受阻或排泄不暢，致使膽汁淤積，肝膽管的內壓逐漸升高，導致毛細膽管破裂，直接膽紅素經淋巴間隙或血竇進入血液循環(huán)，使血中直接膽紅素升高。直接膽紅素升高于阻塞性黃疸、如膽石癥、肝癌、胰頭癌等。附錄A:參數(shù)
