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1、園藝學報2014,(4111):2169–2178http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com蘋果PGIP基因部分家族成員啟動子的克隆與功能分析*符聰慧,王建平,張沖,馬鋒旺,張軍科(西北農林科技大學園藝學院,陜西楊凌712100)摘要:根據(jù)已發(fā)表的蘋果基因組序列設計特異引物,克隆了蘋果(Malus×domesticaBorkh.)品種‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’中PGIP家族基因PGIP1和PGIP2的啟動子片段,序列分析結果表明PGIP1與PGIP2啟動子序列相
2、似度為71%,‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’的PGIP1、PGIP2啟動子相似度都達到了99%。兩個品種PGIP1啟動子中TATA-box和CAAT-box的數(shù)量明顯多于PGIP2,PGIP1和PGIP2啟動子分別存在茉莉酸甲酯和水楊酸響應元件,暗示PGIP1和PGIP2存在不同的抗病響應途徑。構建了啟動子︰︰GUS融合表達載體,通過對農桿菌介導法轉化煙草葉片中的GUS活性分析,比較了不同啟動子的活性。結果表明:PGIP1啟動子活性在品種間差異不顯著;PGIP2啟動子活性在品種間差異顯著,‘秦冠’是‘太平洋玫瑰’的2.37倍,可能與品種抗病性差異有關;同一品種中
3、PGIP1啟動子活性顯著高于PGIP2。關鍵詞:蘋果;PGIP基因;啟動子;順式作用元件中圖分類號:S661.1文獻標志碼:A文章編號:0513-353X(2014)11-2169-10CloningandFunctionAnalysisofPartofPGIPGeneFamilyMemberPromotersfromApple*FUCong-hui,WANGJian-ping,ZHANGChong,MAFeng-wang,andZHANGJun-ke(CollegeofHorticulture,NorthwestA&FUniversity,Yanglin
4、g,Shaanxi712100,China)Abstract:PrimersweredesignedaccordingtothepublishedsequenceoftheapplegenomeandtwoPGIPgenepromotersofMalus×domesticaBorkh.‘Qinguan’and‘PacificRose’werecloned.PGIP1were71%homologywithPGIP2genepromotersinbothapplecultivar;BothPGIP1andPGIP2genepromotersof‘Qinguan
5、’and‘PacificRose’sharedasequenceidentityof99%.PGIP1promotershadmoreTATA-boxandCAAT-boxthanthatofPGIP2promoters,andPGIP1genepromoterscontainedmethyljasmonate-responsiveelements,whilePGIP2genepromotersowedsalicylicacidresponsiveelements.It’sspeculatedthattherearedifferentdiseaseresp
6、onsepathwaysofPGIP1andPGIP2.PGIPpromoteractivitywereevaluatedbypromoter︰︰GUSfusionexpressionintransgenictobaccoleavesandtheresultsshowedthatthePGIP1promotersactivitywasnotsignificantbetweencultivarswhilePGIP2promoterof‘Qinguan’washigherthanthatof‘PacificRose’,andtheformer’sactivit
7、ywas2.37foldsofthelatter,whichwasprobablyrelatedtotheresistancedifference.Inthesameapplecultivar,PGIP1genepromoters’收稿日期:2014–06–27;修回日期:2014–09–12基金項目:國家現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項資金項目(CARS-28)*通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:zhangjk@nwsuaf.edu.cn)2170園藝學報41卷activitiesweresignificantlyhigh
8、erthanthatofPGIP2.Keywords:apple;