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《蘋果和梨AFS基因啟動子的克隆、序列比對及功能分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、園藝學(xué)報，2015，42(12)：2353–2361.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0554；http：//www.ahs.ac.cn2353蘋果和梨AFS基因啟動子的克隆、序列比對及功能分析1,*2,*111,**鄧帥，成妮妮，丁瑞瑞，劉宇，張元湖12（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，作物生物學(xué)國家重點實驗室，山東泰安271018；臨沂大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東臨沂276000）摘要：蘋果（Malus×domesticaL.）和梨（PyruscommunisL
2、.）果實在低溫儲存過程中虎皮病的發(fā)生與果皮中受乙烯誘導(dǎo)的α–法尼烯合酶基因（AFS）的表達及α–法尼烯的積累密切相關(guān)。采用TAIL-PCR技術(shù)分別從‘富士’蘋果和‘豐產(chǎn)’梨中克隆到了約2kb的α–法尼烯合酶基因（AFS）啟動子序列，并提交至GenBank中（登錄號分別為KM676083和KM676082）。序列比對發(fā)現(xiàn)兩啟動子同源性僅為48.31%，遠低于其下游編碼區(qū)97%的相似度。順式作用元件在線預(yù)測分析發(fā)現(xiàn)二者同時存在乙烯、脫落酸、茉莉酸、水楊酸等激素響應(yīng)元件，低溫、厭氧、病原菌等脅迫響應(yīng)元件，以及3個節(jié)律性表達元件和2個誘導(dǎo)子響應(yīng)
3、元件。對‘豐產(chǎn)’梨中AFS基因表達模式的分析也證實了部分預(yù)測的誘導(dǎo)因素對其表達有調(diào)控作用。將‘豐產(chǎn)’梨AFS基因啟動子序列進行系列刪除，與GUS報告基因構(gòu)建融合表達載體轉(zhuǎn)化煙草，利用GUS染色方法分析了不同長度啟動子的轉(zhuǎn)錄活性差異，發(fā)現(xiàn)縮短至153bp的啟動子片段仍具有較強的轉(zhuǎn)錄活性，且長度在276bp至573bp的啟動子片段其驅(qū)動下游基因轉(zhuǎn)錄的活性較其他片段更強。通過后續(xù)對各作用元件尤其是乙烯響應(yīng)元件的研究將有助于進一步從分子水平認識虎皮病的發(fā)生機制。關(guān)鍵詞：蘋果；梨；AFS；啟動子；順式作用元件；虎皮病中圖分類號：S661文獻標(biāo)志碼
4、：A文章編號：0513-353X（2015）12-2353-09Cloning，SequenceAlignmentandFunctionalAnalysisofAFSGenePromoterinAppleandPearFruits1,*2,*111,**DENGShuai，CHENGNi-ni，DINGRui-rui，LIUYu，andZHANGYuan-hu1（StateKeyLaboratoryofCropBiology，CollegeofLifeSciences，ShandongAgriculturalUniversity，Tai
5、’an，Shandong2271018，China；CollegeofLifeSciences，LinyiUniversity，Linyi，Shandong276000，China）Abstract：Bothapple（Malus×domesticaL.）andpear（PyruscommunisL.）fruitsarepronetosuffersuperficialscaldduringstorageatlowtemperature.Previousstudieshaveprovedthattheoccurrenceofsuperfi
6、cialscaldiscloselyrelatedtotheα-farnesenesynthasegene（AFS）expressionandaccumulationofα-farneseneinthefruitpeel，butlittleisknownaboutitspromoter.ByusingTAIL-PCRweclonedapproximately2kblengthpromotersequenceofAFSgenefrom‘Fuji’appleand‘Fertility’pear收稿日期：2015–08–19；修回日期：201
7、5–12–16基金項目：國家自然科學(xué)基金項目（31170255）*同等貢獻作者**通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：yhzhang9@163.com）DengShuai，ChengNi-ni，DingRui-rui，LiuYu，ZhangYuan-hu.Cloning，sequencealignmentandfunctionalanalysisofAFSgenepromoterinappleandpearfruits.2354ActaHorticulturaeSinica，2015，42(12)：23
8、53–2361.respectivelyandsubmittedthemtoGenBank（Accessionnumber：KM676083andKM676082）.Thesequencealignment
