不同生長期瑞香狼毒和牛心樸子總黃酮含量研究

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1、不同生長期瑞香狼毒和牛心樸子總黃酮含量研究【摘要】目的分析測定不同生長期瑞香狼毒和牛心樸子的總黃酮含量。方法采用分光光度法分別對不同生長期瑞香狼毒和牛心樸子的總黃酮含量進(jìn)行分析測定。結(jié)果不同生長期內(nèi)，瑞香狼毒和牛心樸子總黃酮含量變化趨勢不同，但都是9月份總黃酮含量最高。瑞香狼毒總黃酮含量在7、8月份時(shí)明顯較低，分別為6.3mg/g和7.8mg/g，9月份最高，達(dá)到18.5mg/g;牛心樸子總黃酮含量在8月份時(shí)較低，為12.5mg/g，9月份最高，為16.3mg/g。結(jié)論以黃酮類化合物為有效成分的瑞香狼毒和牛心樸子的最佳采收期均為9月份?！娟P(guān)鍵詞】不同生長期;瑞香狼毒;牛心樸子;總黃酮　　瑞香

2、狼毒StellerachamaejasmeL.，又名斷腸草、紅狼毒，為瑞香科狼毒屬多年生根莖型草本植物，廣泛分布于東北、華北、西南、西北、內(nèi)蒙古、黑龍江等地的干草原、沙質(zhì)草原和典型草原的退化草地上[1]。牛心樸子CynanchumkomaroviiAl.Ijirski為蘿科鵝絨藤屬多年生草本植物，俗稱老瓜頭、蘆心草，主要分布于內(nèi)蒙古、寧夏、甘肅、青海、陜西等地[2]。瑞香狼毒和牛心樸子均為草原退化植物，在內(nèi)蒙古地區(qū)的一些退化草場，瑞香狼毒或牛心樸子大面積連片生長，已成為退化草場的建群種植物，導(dǎo)致草原質(zhì)量和經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)力嚴(yán)重下降。瑞香狼毒和牛心樸子雖然具有一定毒性，牲畜不宜采食，但二者同時(shí)又是具有

3、不同藥用價(jià)值的中草藥。如瑞香狼毒具有逐水、破積、祛痰、殺蟲、止痛的功能[1，3～5]，在抗腫瘤、抗菌、抗病毒(尤其是艾滋病毒)、抗癲癇等方面有獨(dú)到之處[1，6]。牛心樸子具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抑菌功效，對呼吸系統(tǒng)常見病的咳、痰、喘癥狀可有緩解治療作用[7～9]，此外，牛心樸子還是一種很好的蜜源植物[10]，在西北草原養(yǎng)蜂業(yè)中占有重要地位。黃酮類化合物是瑞香狼毒和牛心樸子的主要有效成分之一，對其在兩種植物中的含量測定雖曾有報(bào)道[11～15]，但不同生長期黃酮含量的動態(tài)研究尚未見報(bào)道。為此，本文對內(nèi)蒙古鄂爾多斯草原不同生長期的瑞香狼毒和牛心樸子總黃酮含量分別進(jìn)行了分析測定并加以比較研究，以期為瑞香狼毒

4、和牛心樸子的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)?！　?材料與儀器　　1.1材料瑞香狼毒和牛心樸子試樣分別于2008-05～09每月上旬采自內(nèi)蒙古自治區(qū)鄂爾多斯草原，經(jīng)鄂爾多斯市林業(yè)工作站鑒定。所有實(shí)驗(yàn)材料取地上部分，去除花、果實(shí)，去雜，自然晾干后備用?！　?.2試劑蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，BR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;95%乙醇、氫氧化鈉、硝酸鋁、石油醚、正丁醇，AR，北京化工廠;亞硝酸鈉，AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。　　1.3儀器SP-2000型分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司?！　?方法　　2.1定性檢驗(yàn)稱取粉碎20目的瑞香狼毒和牛心樸子各5g，分別用95%乙醇于索氏提取器中回流提取2h，提取液濃縮近干

5、，用30%乙醇溶解。各取溶液1ml于試管中，加適量鎂粉，再逐滴加入鹽酸，兩者反應(yīng)均呈現(xiàn)桃紅色，為黃酮類化合物正反應(yīng)?！　?.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取120℃干燥恒重的無水蘆丁(黃酮標(biāo)準(zhǔn)對照品)20mg，用60%乙醇定容于100ml容量瓶中，搖勻。精密量取25.0ml置于50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度(0.1mg蘆丁/m1)。精密量取上述溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分別置于10ml容量瓶中，分別精密加入5%亞硝酸鈉溶液0.3ml，搖勻，靜置6min，加10%硝酸鋁溶液0.3ml，搖勻，再靜置6min，加1mol/l氫氧化鈉溶液4ml，分別用30%乙醇溶液稀釋至刻度，

6、搖勻，靜置15min，置于比色皿中，用SP-2000型分光光度計(jì)，在510nm波長處測定吸光度。以溶液濃度C(mg/ml)為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，并作線性回歸，求出回歸方程?！　?.3樣品總黃酮含量的測定精密稱取粉碎20目的材料(不同生長期的瑞香狼毒及牛心樸子)各5g，分別用95%乙醇于索氏提取器中提取，至提取液無黃酮反應(yīng)為止。將提取液濃縮近干，加10ml蒸餾水溶解后，用石油醚萃取脫脂，棄去石油醚層。水層用正丁醇萃取，至水溶液無黃酮反應(yīng)為止。減壓回收正丁醇至近干，加適量30%乙醇溶液溶解，分別移至50ml容量瓶中，用30%乙醇溶液稀釋至刻度。精密量取此溶液4.0ml，分置

7、于100ml容量瓶中，用30%乙醇稀釋至刻度。精密量取上述樣品液3.0，4.0，5.0ml，按照上述標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法，將樣品溶液顯色后測定吸光度，根據(jù)回歸方程求出相應(yīng)的濃度，用下述公式分別計(jì)算瑞香狼毒及牛心樸子的總黃酮含量：總黃酮提取率(%)=c×10×100×504m×1000×取樣毫升數(shù)×100%式中：m為樣品材料粉末的重量(g);c為樣品材料總黃酮的濃度(g/ml)?！　?.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)分別取瑞香狼毒