桑黃菌絲液體培養(yǎng)及多糖提取工藝優(yōu)化研究報(bào)告

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1、技術(shù)研究報(bào)告第一篇桑黃菌絲培養(yǎng)及多糖提取工藝優(yōu)化第1章緒論1.1前言桑黃是目前國(guó)際公認(rèn)的抗腫瘤效果最好的大型真菌之一，巴西蘑菇即姬松茸與其療效相近。由于用于一般化學(xué)療法的抗癌劑的毒性強(qiáng)，對(duì)癌癥患者正常體細(xì)胞也具有殺傷作用，而桑黃多糖則幾乎沒(méi)有毒性，其通過(guò)提高機(jī)體免疫能力，殺傷癌細(xì)胞，這是真菌多糖抗癌的一大優(yōu)點(diǎn)。桑黃多糖能明顯提高患者的免疫能力，當(dāng)與一般的抗癌化學(xué)療法并行使用時(shí)，可以進(jìn)一步提高治療效果。因此桑黃的研究以及開發(fā)利用越來(lái)越熱[1]。桑黃最早在日本及韓國(guó)得到開發(fā)利用，現(xiàn)已開始小批量人工栽培。由于

2、天然的桑黃數(shù)量非常稀少，難以成為穩(wěn)定的工業(yè)產(chǎn)品來(lái)源，韓國(guó)一制藥公司已率先開發(fā)出桑黃菌絲體培養(yǎng)法新技術(shù)，人工生產(chǎn)桑黃活性物質(zhì)，并將其提取物用凍干法加工成粉末。由于抗癌效果顯著，桑黃提取物干粉在韓國(guó)市場(chǎng)的售價(jià)高達(dá)每克2000多美元。日本一家專門從事生藥加工的醫(yī)藥企業(yè)“津村株式會(huì)社”將人工培植的桑黃子實(shí)體加工成“破壁細(xì)胞超微粉末”，生產(chǎn)的“桑黃”(超微)粉末膠囊每瓶(288粒)售價(jià)高達(dá)3萬(wàn)日元。據(jù)統(tǒng)計(jì)，僅日、韓兩國(guó)市場(chǎng)2002年各種桑黃劑的銷售額合計(jì)已逾100億日元。美國(guó)在本世紀(jì)初開始從日本進(jìn)口桑黃制劑作為膳

3、食補(bǔ)充劑在本土銷售。我國(guó)吉林省延吉市憑借獨(dú)有的地域優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)已開發(fā)出復(fù)合桑黃口服液，主要銷往日本及韓國(guó)，在當(dāng)?shù)匾灿幸欢ǖ南M(fèi)市場(chǎng)。根據(jù)目前所掌握的資料，由于外商需求量大，價(jià)格高，致使國(guó)內(nèi)各產(chǎn)地進(jìn)行掠奪性開采，子實(shí)體孢子無(wú)法大量形成。結(jié)果造成該資源在東北地區(qū)已經(jīng)難覓蹤影，西北也即將枯竭。再加上我國(guó)天然的桑黃數(shù)量本來(lái)就非常稀少，子實(shí)體的人工栽培尚處于起步階段，所以要想形成穩(wěn)定的醫(yī)藥工業(yè)產(chǎn)品來(lái)源，就必須充分挖掘桑黃的自然資源，深入開展桑黃的人工栽培；另外還要進(jìn)行菌種的分離培養(yǎng)，利用現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行深層發(fā)酵。LX

4、VIII技術(shù)研究報(bào)告同時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步測(cè)定桑黃提取物中的有效成分，探索其與菌種、菌齡以及培養(yǎng)條件的關(guān)系，確定桑黃有效成分在提高人體免疫機(jī)能、疾病的預(yù)防和治療等方面的作用機(jī)制，使桑黃能夠早日應(yīng)用于人類的醫(yī)療保健事業(yè)[2]。1.2簡(jiǎn)介桑黃1.2.1桑黃的名稱及分類桑黃（Phellinusigniarius、Phellinuslinteus和Phellinusbaumi）別名：火木層孔菌、針裂蹄（裂蹄）和鮑氏層孔菌。桑黃菌是一種多年生珍稀藥用真菌，屬擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polypo

5、rales)、多孔菌科(Polyporaceae)，木層孔菌屬(Phellinus)[3]。桑黃子實(shí)體中等至較大，無(wú)柄。菌蓋半球形，剖面扁平至馬蹄形，深煙色至黑色，有同心紋和環(huán)棱，初期有微細(xì)絨毛，后變光滑、稍龜裂，硬而木質(zhì)化，2~12cm×3~21cm，厚1.5~10cm，邊緣銳或鈍，其下側(cè)無(wú)子實(shí)層。菌肉深咖啡色、銹褐色或淺咖啡色，厚2~7mm。桑黃生于楊、柳、樺、桃等闊葉樹的枯立木及立木上及樹干上[4]。固因其著生樹種不同，分為桑樹桑黃、楊樹桑黃和樺樹桑黃等品種。其中，桑樹桑黃子實(shí)體入藥最佳。1.2.

6、2桑黃的分布桑黃主要分布于中國(guó)、日本、菲律賓、澳大利亞、北美、中南美等地。在國(guó)內(nèi)，桑黃分布于河北、山西、內(nèi)蒙古、黑龍江、吉林、臺(tái)灣、河南、廣東、陜西、寧夏、甘肅、青海、新疆、四川、云南等地，即集中分布區(qū)在黑龍江省東部烏蘇里江與興凱湖之間，西北地區(qū)陜西與甘肅交界的“子午嶺”自然保護(hù)區(qū)，國(guó)外主要在日本、韓國(guó)、俄羅斯等國(guó)家分布。1.3桑黃的研究進(jìn)展1.3.1桑黃藥用功能的研究進(jìn)展（1）抗腫瘤作用LXVIII技術(shù)研究報(bào)告桑黃的抗癌功能最早被日本學(xué)者等發(fā)現(xiàn)，研究表明桑黃野生子實(shí)體的提取物對(duì)小鼠肉瘤180的抑制率為

7、96.7%。研究還表明具有抗癌作用的物質(zhì)是桑黃子實(shí)體中的多糖。（2）提高免疫力Hwan-MookKIM等用P.linteus的菌絲體胞外多糖（EPS）進(jìn)行免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)EPS不僅能夠使T細(xì)胞增殖，而且對(duì)不同同類抗原的T細(xì)胞也有增殖作用，并且毒性T淋巴細(xì)胞的毒性在加桑黃胞外多糖（EPS）后大大增強(qiáng)。Yun-HeeShon等發(fā)現(xiàn)桑黃提取物可以誘導(dǎo)相解毒酶包括苯醌氧化還原酶（QR）和谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶（GST）的活性，并且提高了谷胱甘肽的水平。張萬(wàn)國(guó)[5]等對(duì)桑黃子實(shí)體提取物對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PMNCs

8、）產(chǎn)生C-干擾素（IFN-C）的研究表明桑黃具有誘生IFN-C的能力，能顯著增高小鼠的血清IFN-C水平，有利于其發(fā)揮調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力，抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。（3）抗突變作用Shon[6]等用桑黃提取物的抗突變實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，提取物可有效的抑制誘變劑對(duì)沙門氏菌的誘變作用。（4）抗血管生成試驗(yàn)Yun-SeonSong等在小雞胚胎絨膜尿囊膜（CAM）試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)隨桑黃提取物加量的增加抑制效果增加，說(shuō)明提取物有較好的抗血管生成活性。（5）清除自由基的