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《微生物限度方法學(xué)驗(yàn)證方案》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、微生物限度檢測(cè)方法學(xué)驗(yàn)證方案文件編號(hào)：P-P-***********Page11of11批準(zhǔn)簽字頁方案起草崗位/職位姓名簽字日期微生物崗/QC人員方案審核崗位/職位姓名簽字日期微生物崗/組長(zhǎng)生產(chǎn)部/部長(zhǎng)質(zhì)量部/QA監(jiān)督員方案批準(zhǔn)崗位/職位姓名簽字日期總工質(zhì)量受權(quán)人P-***********Page11of11目錄1.目的42.范圍43.責(zé)任者及職責(zé)44.驗(yàn)證簡(jiǎn)介45．驗(yàn)證過程76．結(jié)果判斷87．結(jié)論和建議88．異常情況報(bào)告89．再驗(yàn)證810．附件8附件1：培養(yǎng)基的靈敏度復(fù)核9附件2：稀釋液的無菌性檢查10附件3：方法驗(yàn)證11P-********
2、***Page11of111.目的按照中國藥典2010版（第三部），采用薄膜過濾法進(jìn)行微生物限度檢查，本方案對(duì)新修訂的方法進(jìn)行驗(yàn)證。2.范圍本公司要求進(jìn)行微生物限度檢查的原輔料和制劑，中間制品以及消毒劑。3.責(zé)任者及職責(zé)部門職責(zé)質(zhì)量部QC起草并審核驗(yàn)證方案進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)的具體操作完成驗(yàn)證記錄中相關(guān)操作記錄的填寫根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果起草和審核驗(yàn)證報(bào)告總工負(fù)責(zé)審核并批準(zhǔn)驗(yàn)證方案和驗(yàn)證報(bào)告質(zhì)量部QA審核并批準(zhǔn)驗(yàn)證方案和驗(yàn)證報(bào)告監(jiān)督驗(yàn)證方案的實(shí)施4.驗(yàn)證簡(jiǎn)介4.1定義lCFU：菌落數(shù)l供試品對(duì)照組取規(guī)定量供試液，按菌落計(jì)數(shù)方法測(cè)定供試品本底菌數(shù)。l試驗(yàn)組當(dāng)采取薄
3、膜過濾法時(shí)，取規(guī)定量供試液，過濾，沖洗，試驗(yàn)菌加在最后一次沖洗液中，過濾后，取出濾膜接入對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基中。l菌液組測(cè)定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。l稀釋劑對(duì)照組用相應(yīng)的稀釋液替代供試品，按試驗(yàn)組規(guī)定的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。樣品組樣品溶液菌懸液（50-100CFU）稀釋液平均菌落數(shù)(CFU/皿)供試液對(duì)照組+-+C供試液對(duì)照組試驗(yàn)組+++C試驗(yàn)組菌液組-+-C菌液組P-***********Page11of11稀釋劑對(duì)照組-++C稀釋劑對(duì)照組1.1菌懸液4.2.1菌種及來源培養(yǎng)基名稱名稱及代號(hào)編號(hào)批號(hào)有效期至來源營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基金黃色葡萄球菌Staphlococcus
4、aureusATCC6538ATCC大腸埃希氏桿菌EscherichiacoliATCC8739枯草芽胞桿菌BacillussubtilisATCC6633玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基白色念珠菌CandidaalbicansATCC10231黑曲霉AspergillusnigerATCC16404備注檢查人：復(fù)核人：檢查日期：4.2.2菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，30~35℃培養(yǎng)18~24h；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基上，20~25℃培養(yǎng)24~
5、48h。上述培養(yǎng)物用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)50~100CFU的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，23~28℃培養(yǎng)5~7天，加入3~5ml含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)50~100CFU的孢子溶液。1.2培養(yǎng)基及稀釋液4.3.1培養(yǎng)基和稀釋液的名稱培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基稀釋液：pH7.0的氯化鈉蛋白胨緩沖溶液、滅
6、菌純化水4.3.2培養(yǎng)基靈敏度復(fù)核培養(yǎng)基靈敏度復(fù)核，參見《培養(yǎng)基的靈敏度檢查操作規(guī)程》QC2524.3.3稀釋液的無菌性檢查對(duì)稀釋液進(jìn)行無菌檢查，14天規(guī)定溫度培養(yǎng)后應(yīng)無菌。此操作可與其它試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行。P-***********Page11of111.1供試液的預(yù)處理4.4.1樣品名稱及數(shù)量樣品編號(hào)樣品名稱取樣量/批批號(hào)Sn-ASn-BSn-CS01******中間制品1000MLS02*******成品200gS03原輔料1200gS04原輔料2200gS05原輔料…..200gS06消毒劑20mlS07飲用水100mlS08純水制備過程水1
7、00mlS09…….備注檢查人：復(fù)核人：檢查日期：4.4.2樣品預(yù)處理方法l*******中間制品無需處理，取原樣品50ml作為供試液。l******成品無需處理，取原樣品50ml作為供試液。l原輔料1取10g樣品，加入滅菌后的PH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml,混勻待用；l原輔料2取10g樣品，加入滅菌后的PH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml,混勻待用；l原輔料….取10g樣品，加入滅菌后的PH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml,混勻待用；l消毒劑（*******）按照比例進(jìn)行配制。取1ml樣品，加入滅菌后的pH7.0氯化鈉蛋白胨
8、緩沖液至100ml,混勻待用。l飲用水取1ml樣品，加入滅菌后的純化水至100ml,混勻待用。P-***********Page11of11l純水制備
