蝦青素對(duì)小鼠急性乙醇肝損傷的保護(hù)作用

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1、蝦青素對(duì)小鼠急性乙醇肝損傷的保護(hù)作用【摘要】目的：研究蝦青素對(duì)乙醇所致小鼠急性化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用。方法：雄性小鼠60只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、急性乙醇肝損傷模型組、聯(lián)苯雙酯陽(yáng)性對(duì)照組(15mg/kg)以及蝦青素低、中、高劑量組(10，15,20mg/kg)共6組。測(cè)定并比較各組小鼠肝臟系數(shù)，血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSHpx）活性與丙二醛(MDA)含量；測(cè)定肝組織中SOD,GSHpx活性,MDA含量以及組織病理系數(shù)。結(jié)果：各劑量蝦青素

2、均能升高急性乙醇肝損傷小鼠血清與肝組織中SOD,GSHpx活性(P<0.01)，降低血清ALT,AST活性(P<0.01)，降低血清與肝組織MDA含量(P<0.01)，并能不同程度地改善肝臟病理組織損傷。結(jié)論：蝦青素對(duì)乙醇所致急性肝損傷具有預(yù)防性保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】蝦青素；乙醇肝損傷；抗氧化　　［Abstract］Objective:Tostudytheprotectiveeffectsofastaxanthinagainsttheacutealcoholliverinjuryinmiceandresear

3、chitspossiblemechanismforofferingscientificbasisofitshealthfunction.Methods：Randomlytodistribute60malemicestocontrolgroup,acutealcoholliverinjurymodelgroup,DDBgroup(15mg/kg)andloiddle,highdosegroupsofastaxanthin(10,15,20mg/kg),andtodetermineandpareliverindexbetalani

4、netransaminase(ALT),aspartatetransaminase(AST),superoxidedismutase(SOD),glutathioneperioxidase(GSHpx)activities,malondialdehyde(MDA)content,liverSOD,GSHpxactivities,MDAcontentandlivertissuepathologyindextobeassayed.Results：TreatmentandlivertissueSOD,GSHpxactiviti

5、es(P<0.01),decreaseserumALT,ASTlevels(P<0.01)andMDAcontentinlivertissue(P<0.01).Pathologyindexshoelioratetheliverinjuryindifferentdegree.Conclusion：Astaxanthinshoice.　?。跭eyl丙酮-正己烷萃取。靜置2h后，將脂溶性相收集（反復(fù)萃取直至水相成無(wú)色）。再利用減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行提取液濃縮處理?！　?.2.2蝦青素提取液柱色譜純化（1）裝柱將活化好的

6、氧化鋁裝填于玻璃層析柱中，裝填高度為12cm，用正己烷潤(rùn)濕。（2）洗脫分別取2ml蝦青素提取液上柱，用50ml正己烷-丙酮淋洗，收集洗脫液。將洗脫液用氮?dú)獯蹈芍品?，裝入充滿(mǎn)氮?dú)獾牟Ａ績(jī)?nèi)，-70℃儲(chǔ)存?zhèn)溆??！　?.3蝦青素鑒定　　參照全反式蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)其HPLC中保留時(shí)間和紫外可見(jiàn)吸收光譜的特征峰進(jìn)行鑒定。得到的蝦青素提取液經(jīng)過(guò)過(guò)濾后用高效液相色譜分離。色譜柱：CCarotenoidS5(4.6mm×250mm)；流動(dòng)相A：乙腈-甲醇（75∶25）;流動(dòng)相B：MTBE；流動(dòng)相A與B中分別加入0.05%三乙胺作為改性劑防

7、止蝦青素降解；線(xiàn)性梯度洗脫：B在8min內(nèi)由0%增加至55%；8～35minB維持55%；35～40minB由55%減至0%；流速1.0ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：λ/nm=475；波長(zhǎng)范圍260～700nm；進(jìn)樣量20μl。收集后觀察其光譜特征峰行為［3］。色譜和光譜分析結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)所用灌胃物為全反式蝦青素，純度為95%?！　?.4動(dòng)物實(shí)驗(yàn)　　1.4.1乙醇誘導(dǎo)動(dòng)物急性肝損傷模型的建立將60只小鼠（購(gòu)自中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖中心，醫(yī)動(dòng)字第07231號(hào)）隨機(jī)分組，設(shè)空白對(duì)照組、急性乙醇肝損傷模型組、聯(lián)苯雙酯組(15mg/k

8、g水溶混懸液)、蝦青素高劑量(20mg/kg)、蝦青素中劑量(15mg/kg)、蝦青素低劑量組(10mg/kg)共6組，每組10只。按體質(zhì)量20ml/kg用聯(lián)苯雙酯和不同劑量的蝦青素分別給相應(yīng)各組灌胃，每天1次。正常組與模型組每天灌服等體積的純凈水，連續(xù)14d。最后一次用藥1