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《六月青多糖對酒精所致小鼠急性肝損傷的保護作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、六月青多糖對酒精所致小鼠急性肝損傷的保護作用黃氏黃莎黃建春葛文漪陳兆霓黃仁彬(通訊作者)(廣西醫(yī)科大學藥理學教研室530021)【摘要】目的：研究六月青多糖的提取工藝與六月青多糖對酒精(Alcohol)所致小鼠急性肝損傷的保護作用。方法：以酒精灌胃小鼠，建立急性酒精性肝損傷模型，LYQPS灌胃給藥，檢測小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT),天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性以及肝組織中超氧化歧化酶(SOD),谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的活性與谷胱甘肽(GSH)的含量，觀察光鏡下肝組織的病理變化。結(jié)果：LYQPS降低ALT,AST的活性(P
2、<0.01或P<0.05),LYQPS降低GSH的含量(P<0.01),升高GSH-PX,SOD的活性，能夠減輕肝細胞損傷程度。結(jié)論：六月青對酒精致小鼠急性肝損傷有一定的保護作用?！娟P鍵詞】六月青多糖有效部位急性肝損傷酒精【中圖分類號】R965【文獻標識碼】A【文章編號】2095-1752(2013)11-0048-03酒精性肝病(AlcoholicHepatis)是由長期大量飲酒導致的肝臟疾病，是我國常見的肝臟疾病之一，嚴重危害人民健康［1］。因此酒精性肝病的防治已成為醫(yī)學上的一個重要課題。木研究以56度白酒造模，以六月青多
3、糖為治療劑研究六月青多糖對酒精急性肝損傷的保護作用。1?材料1丄藥材：六月青采于廣西靈山縣，經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥研究員鑒定。1.2.動物：昆明小鼠，SPS級,雄性，體重(20±2)g,由廣西醫(yī)科大學實驗動物中心提供，實驗動物牛產(chǎn)許可證：CKKG(桂)2003-0003,實驗動物使用許可證YKG(桂)2009-0002o13試齊I」：北京二鍋頭；丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT),天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST),超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽（GSH）,谷胱甘肽過氧化物酶（GSH?PX）,試劑盒均購自南京建成生物研究所。1.4.儀器：Spac
4、trumlab722SP型分光光度計，上海精密科學有限公司；TDL?5A菲恰爾離心機；不透鋼電熱恒溫水浴鍋；R-1001N型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；RE-5210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；SHB?3循環(huán)水式多用真空干燥器。SHB循環(huán)水式真空泵;電熱鼓風干燥箱ZRD-5210;電熱鼓風干燥箱101-1,真空干燥箱DZF-300;超純水制造系統(tǒng)CD-UPH-2-20L;數(shù)控超聲波清洗器KQ-500DB;2.方法2丄六月青多糖的提取制備：取干燥的六月青，加入8倍量熱蒸惚水，浸泡過夜，80°C煎煮2小吋,共煎煮3次。合并提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至每毫升提取液約為0.5g生藥（
5、即0.5g生藥/ml）。所得濃縮液加入六倍量無水乙醇，至4°C冰箱中靜置過夜。次日將提取液及沉淀以4000rpm,離心15min。離心后用布氏漏斗抽濾，取沉淀物。所得沉淀物為六月青多糖。2.2?動物分組及模型制備：取昆明小鼠按體重隨機分為5組，每組12只。正常對照組，灑精模型組，聯(lián)苯雙酯組,（150mg/kg）,LYQPS高、低劑量組，各組劑量分為2.5g/kg,0.625g/kgo每日上午把酒精模型組,聯(lián)苯雙酯組,LYQPS高，低劑量組小鼠分別按10mg/kg劑量灌胃56度白酒一次，正常對照組給小鼠喂水和飼料,每日下午把聯(lián)苯雙酯組,LYQPS
6、高,低劑量組小鼠分別按10mg/kg分別灌胃給藥,模型組給予等體積生理鹽水，連續(xù)10天，末次給藥后，禁食不禁水，16h處死小鼠，采血和肝組織樣品，分離血清。2.3.血精生化指標的測定：摘除小鼠眼球取血，將凝固的血液于4000rpm,4°C離心15分鐘，分離血清。按各試劑盒說明書的要求測定血清中的ALT,ASTo2.3.肝組織生化的測定：選取肝臟右葉用4°C生理鹽水漂洗去除積血，濾紙拭凈后稱重，加適量4°C生理鹽水，制備10%肝勻漿，于4000rpm,4°C離心lOmin,去上清。肝組織蛋白含量測定考馬斯亮藍法。分別按試劑盒說明測定SOD,GSH
7、,GSH-PX水平。2.5?統(tǒng)計學分析：應用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學處理，劑量資料均采用表示，多組均數(shù)比較采用方差分析，組間差異的顯著性采用t檢驗。計數(shù)資料采用秩和檢驗，a=0.05為顯著性檢驗水準。26肝病理組織學檢查：小鼠取血后，腹部做環(huán)形切口，暴露門靜脈及下腔靜脈，用針頭自門靜脈遠端刺入約1.0cm左右，用4°C肝素化的生理鹽水經(jīng)肝門靜脈沖洗肝臟，待肝臟充盈變白后剪斷下腔靜脈。觀察肝臟顏色并檢查有無凝血，顏色均勻變淡，無凝血者繼續(xù)實驗，持續(xù)沖洗人約3min至肝臟顏色漸白。在整個灌流的過程中，間歇壓迫下腔靜脈使肝臟膨脹與冋縮交替，以利
8、于肝臟與灌流液充分接觸。沖洗完成后取肝左葉相同部分，切成厚度約2mm的組織塊，置于4°C10%甲醛固定液中過夜、脫水、透明、石蠟包埋，常規(guī)切片，片厚5
