降鈣素對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨的保護(hù)作用論文

降鈣素對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨的保護(hù)作用論文

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1、降鈣素對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨的保護(hù)作用論文.freelinoglycans,GAG)和Ⅱ型膠原含量保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨。關(guān)鍵詞:降鈣素;骨關(guān)節(jié)炎;灰度值A(chǔ)bstract:[Objective]Toassessentalosteoarthritis.[Method]TonthNely.Allrabbitsunderenttransection(ACLT)ontherightknee.Rabbitsofexperimentalgroupbegantoreceiveadaffysubcutaneousinjectionofsalmoncalcitoninatadoseof5IUperkgofbodyalsal

2、ine(NS)atthesamedose.Allrabbitsinedgrosslyandhistologicallyandscored;themedialcondylesectionsmunohistochemistryofcollagenII.ankin法[5]評(píng)分;番紅“0”染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色切片用HPIAS-1000系列多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)軟件分析,分別于10倍物鏡下以負(fù)重區(qū)為中心,在關(guān)節(jié)軟骨圖像輻射層和柱狀層各隨機(jī)取10個(gè)區(qū)域測定其灰度值以均值表示測定結(jié)果。15統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法全部數(shù)據(jù)采用spss100統(tǒng)計(jì)軟件,作t檢驗(yàn)。2結(jié)果21肉眼大體觀察結(jié)果對(duì)照組健側(cè)膝關(guān)節(jié)外觀正

3、常,關(guān)節(jié)滑液清,關(guān)節(jié)面光滑,關(guān)節(jié)軟骨略顯淡藍(lán)色,有光澤。對(duì)照組術(shù)側(cè)膝關(guān)節(jié)腫脹嚴(yán)重,脛骨平臺(tái)和股骨髁均可見骨性肥大。滑液色黃且混濁,滑膜亦呈黃色。關(guān)節(jié)面粗糙不平整、無光澤,顏色暗紅,關(guān)節(jié)軟骨破壞,關(guān)節(jié)邊緣有大量骨贅形成,符合骨關(guān)節(jié)炎病理特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)組術(shù)側(cè)膝關(guān)節(jié)稍腫脹,未見脛骨平臺(tái)和股骨髁有骨性肥大?;旱S色。關(guān)節(jié)面欠光滑,無光澤,部分區(qū)域顏色發(fā)暗,有少量骨贅形成。實(shí)驗(yàn)組手術(shù)膝關(guān)節(jié)損害較對(duì)照組手術(shù)膝關(guān)節(jié)輕。22細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察對(duì)照組健側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面平整,光滑,HE染色基質(zhì)染成粉紅色,著色均勻,軟骨細(xì)胞核呈深藍(lán)色,細(xì)胞層次清楚,排列整齊,大小均一(圖1)。對(duì)照組術(shù)側(cè)標(biāo)本可見關(guān)節(jié)面大部分區(qū)域粗糙

4、,可見達(dá)軟骨中層和深層的裂隙或缺損,裂隙周圍可見大量細(xì)胞克隆現(xiàn)象及克隆細(xì)胞周圍大量軟骨細(xì)胞消失(圖2),基質(zhì)染色重度不均,軟骨細(xì)胞排列紊亂;有的區(qū)域軟骨細(xì)胞核消失,留下空的軟骨囊。有的切片可見明顯的丘狀隆起的骨贅。實(shí)驗(yàn)組術(shù)側(cè)部分區(qū)域關(guān)節(jié)面粗糙;基質(zhì)染色中度不均,可見細(xì)胞簇聚多見,有的可見少量的軟骨細(xì)胞壞死區(qū),細(xì)胞克隆現(xiàn)象偶見(圖3)。按Mankin評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果見表1。表1三組膝關(guān)節(jié)標(biāo)本光鏡下Mankin評(píng)分結(jié)果(略)23三組膝關(guān)節(jié)番紅“0”和Ⅱ型膠原免疫組化染色切片灰度值番紅“0”染色軟骨細(xì)胞核和基質(zhì)均染成粉紅色,空白對(duì)照組著色均勻;ACLT組基質(zhì)染色重度不均,可見細(xì)胞克隆和細(xì)胞減少;ACLT

5、+CT組可見關(guān)節(jié)面粗糙,基質(zhì)染色輕度不均(圖4~6)。Ⅱ型膠原免疫組化細(xì)胞基質(zhì)染成棕黃色,各組情況與番紅“0”染色相似(圖7~9)。灰度值測量結(jié)果見表2。表2番紅“0”及Ⅱ型膠原免疫組化灰度值(略)3討論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞組織形態(tài)學(xué)評(píng)分對(duì)照組術(shù)側(cè)膝關(guān)節(jié)明顯高于對(duì)照組健側(cè)。表明本實(shí)驗(yàn)的骨性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型復(fù)制成功。番紅“0”染色灰度值和II型膠原免疫組化染色灰度值測量術(shù)側(cè)高于健側(cè),表明術(shù)側(cè)GAG和Ⅱ型膠原含量低于健側(cè),說明在OA進(jìn)程中伴隨著GAG和Ⅱ型膠原的破壞和丟失。實(shí)驗(yàn)組術(shù)側(cè)和對(duì)照組術(shù)側(cè)關(guān)節(jié)細(xì)胞組織形態(tài)學(xué)評(píng)分后者明顯高于前者,說明對(duì)照組術(shù)側(cè)關(guān)節(jié)軟骨損害大于實(shí)驗(yàn)組術(shù)側(cè),表示降鈣素對(duì)關(guān)節(jié)軟骨有保護(hù)

6、作用,這與Badurski[3]和ManicourtDH[4]等研究結(jié)果一致。同時(shí),對(duì)照組番紅“0”染色灰度值和Ⅱ型膠原免疫組化染色灰度值測量顯著高于實(shí)驗(yàn)組,說明對(duì)發(fā)生OA的關(guān)節(jié)軟骨,降鈣素促進(jìn)了軟骨細(xì)胞分泌GAG和Ⅱ型膠原,或阻止了這兩種物質(zhì)的分解。在以兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物制作的骨關(guān)節(jié)炎模型中,Badurski采用了每次給藥7IU/kg,每周2次的用法,相當(dāng)于每天2IU/kg[3]。為了盡量與降鈣素臨床應(yīng)用方法相近,本實(shí)驗(yàn)用每天給藥1次的方法。使用劑量以人的標(biāo)準(zhǔn)劑量1~2IU/kg為基準(zhǔn),經(jīng)過人與動(dòng)物劑量換算公式計(jì)算設(shè)定為5IU/kg,高于Badurski的2IU/kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了這種劑量的降

7、鈣素對(duì)OA有保護(hù)作用,據(jù)此推斷臨床應(yīng)用降鈣素治療骨質(zhì)疏松的常規(guī)劑量1~2IU/kg可能對(duì)骨關(guān)節(jié)炎有治療作用,值得進(jìn)一步臨床觀察研究。降鈣素對(duì)關(guān)節(jié)軟骨保護(hù)作用的機(jī)制尚在探索。有許多實(shí)驗(yàn)報(bào)告,降鈣素可以使軟骨細(xì)胞合成糖胺多糖的能力增加。用體外培養(yǎng)胎牛股骨軟骨細(xì)胞攝取14C標(biāo)記的葡萄糖的方法證明了這一點(diǎn)[6];體外軟骨細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)45Ca追蹤測量法證實(shí)了降鈣素能夠促進(jìn)軟骨細(xì)胞合成糖胺多糖和對(duì)鈣的攝??;Ba

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