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1、降鈣素對兔骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨的保護作用【關鍵詞】降鈣素 摘要：〔目的〕研究降鈣素(calcitonin，CT)對骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨的保護作用?！卜椒ā?個月齡新西蘭大白兔20只，隨機分為兩組均行右膝關節(jié)前交叉韌帶切斷術。1周后實驗組開始皮下注射降鈣素5IU／kg，每日1次；對照組注入等劑量生理鹽水；術后6周處死動物。取股骨內髁制成切片行HE、番紅“O”和Ⅱ型膠原免疫組化染色。HE切片按照Mankin評分表評分。番紅“O”染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色切片用圖像分析儀，測量平均灰度值?！步Y果〕(1)對照組術側膝關節(jié)組織學Mankin評分結果、番紅“O”染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色平均灰度值
2、測量結果高于健側，（P001）。（2)對照組手術膝關節(jié)組織學評分、番紅“O”染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色平均灰度值測量結果高于實驗組手術膝關節(jié)，（P005）?！步Y論〕降鈣素5IU/kg每日1次皮下注射夠明顯減輕兔膝關節(jié)不穩(wěn)定誘發(fā)的骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨的退變。降鈣素可能通過提高軟骨基質糖胺多糖(glycosaminoglycans，GAG)和Ⅱ型膠原含量保護關節(jié)軟骨。 關鍵詞：降鈣素；骨關節(jié)炎；灰度值 Abstract：〔Objective〕Toassessentalosteoarthritis.〔Method〕TonthNely.Allrabbitsunderenttransect
3、ion(ACLT)ontherightknee.Rabbitsofexperimentalgroupbegantoreceiveadaffysubcutaneousinjectionofsalmoncalcitoninatadoseof5IUperkgofbodyalsaline(NS)atthesamedose.Allrabbitsinedgrosslyandhistologicallyandscored;themedialcondylesectionsmunohistochemistryofcollagenII.ankin法〔5〕評分；番紅“0”染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色切片
4、用HPIAS-1000系列多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)軟件分析，分別于10倍物鏡下以負重區(qū)為中心，在關節(jié)軟骨圖像輻射層和柱狀層各隨機取10個區(qū)域測定其灰度值以均值表示測定結果?！ ?5統(tǒng)計學分析方法 全部數(shù)據(jù)采用spss100統(tǒng)計軟件，作t檢驗?！ ?結果 21肉眼大體觀察結果 對照組健側膝關節(jié)外觀正常，關節(jié)滑液清，關節(jié)面光滑，關節(jié)軟骨略顯淡藍色，有光澤。對照組術側膝關節(jié)腫脹嚴重，脛骨平臺和股骨髁均可見骨性肥大?；荷S且混濁，滑膜亦呈黃色。關節(jié)面粗糙不平整、無光澤，顏色暗紅，關節(jié)軟骨破壞，關節(jié)邊緣有大量骨贅形成，符合骨關節(jié)炎病理特點。實驗組術側膝關節(jié)稍腫脹，未見脛骨平臺和
5、股骨髁有骨性肥大。滑液淡黃色。關節(jié)面欠光滑，無光澤，部分區(qū)域顏色發(fā)暗，有少量骨贅形成。實驗組手術膝關節(jié)損害較對照組手術膝關節(jié)輕。 22細胞形態(tài)學觀察 對照組健側膝關節(jié)股骨內髁關節(jié)面平整，光滑，HE染色基質染成粉紅色，著色均勻，軟骨細胞核呈深藍色，細胞層次清楚，排列整齊，大小均一(圖1)?！ φ战M術側標本可見關節(jié)面大部分區(qū)域粗糙，可見達軟骨中層和深層的裂隙或缺損，裂隙周圍可見大量細胞克隆現(xiàn)象及克隆細胞周圍大量軟骨細胞消失(圖2)，基質染色重度不均，軟骨細胞排列紊亂；有的區(qū)域軟骨細胞核消失，留下空的軟骨囊。有的切片可見明顯的丘狀隆起的骨贅?！ 嶒灲M術側部分區(qū)域關節(jié)面粗糙；基質
6、染色中度不均，可見細胞簇聚多見，有的可見少量的軟骨細胞壞死區(qū)，細胞克隆現(xiàn)象偶見(圖3)。按Mankin評分標準結果見表1。表1三組膝關節(jié)標本光鏡下Mankin評分結果(略) 23三組膝關節(jié)番紅“0”和Ⅱ型膠原免疫組化染色切片灰度值 番紅“0”染色軟骨細胞核和基質均染成粉紅色，空白對照組著色均勻；ACLT組基質染色重度不均，可見細胞克隆和細胞減少；ACLT+CT組可見關節(jié)面粗糙，基質染色輕度不均(圖4～6)。Ⅱ型膠原免疫組化細胞基質染成棕黃色，各組情況與番紅“0”染色相似(圖7～9)?；叶戎禍y量結果見表2。表2番紅“0”及Ⅱ型膠原免疫組化灰度值(略) 3討論 本實驗結果發(fā)現(xiàn)
7、細胞組織形態(tài)學評分對照組術側膝關節(jié)明顯高于對照組健側。表明本實驗的骨性關節(jié)炎動物模型復制成功。番紅“0”染色灰度值和II型膠原免疫組化染色灰度值測量術側高于健側，表明術側GAG和Ⅱ型膠原含量低于健側，說明在OA進程中伴隨著GAG和Ⅱ型膠原的破壞和丟失。 實驗組術側和對照組術側關節(jié)細胞組織形態(tài)學評分后者明顯高于前者，說明對照組術側關節(jié)軟骨損害大于實驗組術側，表示降鈣素對關節(jié)軟骨有保護作用，這與Badurski〔3〕和ManicourtDH〔4〕等研究結果一致。同時，對照組番紅“0
