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1、角叉菜膠致大鼠足腫脹模型探析及其機制探究【摘要】目的探討角叉菜膠致大鼠足腫脹模型。方法復制一定數(shù)量的角叉菜膠致大鼠足腫脹模型，測量并比較致炎后不同時間點大鼠的足容積，考察試驗環(huán)境溫度對該模型足腫脹度的影響，測定致炎后不同時間點大鼠足組織中致炎因子的含量。結果大鼠足跖部注射角叉菜膠后足腫脹度變化呈一單峰曲線，致炎后約0．5h開始腫脹，2．5~3．0h達到高峰，8h后逐漸消退；環(huán)境溫度21℃~23℃，濕度40%~70%，大鼠體質量約160g是較適合復制該模型的實驗條件；注射角叉菜膠后大鼠的足腫脹主要與注射部位前列腺素E2（PGE2）升高有關。?【關鍵詞】模型探討；角叉菜膠；足腫脹；機制研究7角叉菜
2、膠致大鼠足腫脹模型是一個常用于評價或篩選藥物抗炎作用的經典的急性炎癥模型，當給大鼠足跖內注射角叉菜膠時能使大鼠局部毛細血管擴張、血管通透性增高、滲出、水腫等一系列類似于人體急性炎癥的反應，故該模型在新藥評價中應用非常廣泛。然而，如何才能復制出一個穩(wěn)定可靠的足腫脹模型、足腫脹模型發(fā)展到何種程度適合用于評價藥物的作用、大鼠足跖部注射角叉菜膠后大鼠足容積隨時間如何變化、實驗條件如何控制及角叉菜膠如何使得大鼠足跖腫脹等等卻鮮有報道，現(xiàn)筆者對此作了一些探討，報告如下。1材料與方法1．1材料1．1．1SD大鼠，SPF級，雄性，130~150g，廣東省醫(yī)學實驗動物中心購進，動物合格證號：0026903，粵監(jiān)
3、證字：SCXK（粵）2003-0002，粵監(jiān)證字2007A003。動物飼養(yǎng)設施：大鼠獨立送回風籠具，型號：IRU-5×5，飼養(yǎng)盒大小為：470mm×315mm×260mm。蘇州市蘇杭實驗動物設備廠。動物飼養(yǎng)條件：自由進食飲水，飼養(yǎng)室溫度與濕度：（23±）3℃，（55±15）%。1．1．2角叉菜膠Sigma，批號：127H1227；規(guī)格：25g/瓶，貯藏條件：陰涼處，密閉保存。1．1．3足容積測定儀本科室自制。1．1．4酶標儀型號：Emax，美國MolecularDevices公司生產。1．1．5大鼠PGE2、5-HT、His試劑盒進口分裝，從大連泛邦化工技術開發(fā)有限公司購進。1．2方法1．2．
4、1大鼠足跖腫脹度隨時間變化的研究7SD大鼠40只，分成兩組，模型組30只，空白對照組10只，分組后按毛細管放大測量法一次測量所有動物的右后足足容積作為基礎容積，測量完畢之后在其右后足足跖部位皮下注射1%角叉菜膠0．1ml/只，空白對照組注射等容積的生理鹽水，注射完角叉菜膠或生理鹽水后，分別再用毛細管放大測量法測量致炎后30min、60min、90min、2h、2．5h、3h、3．5h、4h、5h、6h、7h、8h大鼠的右后足足容積。1．2．2不同環(huán)境溫度對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響SD大鼠20只，分成兩組，即實驗一組、實驗二組，每組10只，實驗一、二組大鼠體質量均約170g，兩個實驗組造模方
5、法均一致，即均用1%的角叉菜膠于大鼠右后足足跖部皮下注射，注射容積0．1ml/只。注射完畢后立刻將大鼠置于不同溫度濕度的環(huán)境中，實驗一組環(huán)境條件：溫度17℃~19℃，濕度30%~50%，實驗二組環(huán)境條件：溫度21℃~24℃，濕度：40%~70%。分別測量致炎前及致炎后2、3、4、5、6h的大鼠右后足足容積。1．2．3致炎后大鼠右后足中前列腺素E2（PGE2）、五羥色胺（5-HT）、組胺（His）含量的變化SD大鼠32只，按體質量隨機均衡分成4組，即空白對照一組、模型一組、空白對照二組、模型二組，每組8只。分組后模型一、二組右后足足跖部位皮下注射1%角叉菜膠0．1ml/只空白一、二組分別注射等容
6、積的生理鹽水。致炎后1h將空白對照一組、模型一組斷頭放血處死，處死后立即剪取右后足放入4℃的冷生理鹽水中備用，致炎后27h將空白對照二組、模型二組大鼠斷頭放血處死，處死后立即剪取右后足放入4℃的冷生理鹽水中備用。所有組大鼠右后足取材后用咬骨鉗將右后足咬碎后放入預先準備的0．9%的氯化鈉注射液中浸泡2h，檢測大鼠右后足組織中PGE2、5-HT、His的含量。1．3統(tǒng)計學方法所有數(shù)據(jù)均輸入EXCEL2003和SPSS11．5統(tǒng)計軟件進行相應的統(tǒng)計學處理，各組計量數(shù)據(jù)均采用均值±標準差(x±s)表示。2結果2．1大鼠足跖腫脹度隨致炎時間變化的結果結果（圖1，2）表明：大鼠右后足足跖部注射角叉菜膠后隨
7、著時間的變化其足跖腫脹度也發(fā)生了相應的變化。注射角叉菜膠后2h，約90%的大鼠足跖腫脹度大于等于0．3ml，致炎后2．5~3．0h達到腫脹高峰，此時足腫脹度約為0．65ml。致炎后3h足腫脹度開始回落，至致炎后8h，足腫脹度恢復至0．3ml，空白組注射生理鹽水后右后足輕微腫大，約4h后逐漸恢復。大鼠在15℃~18℃，40%~70%的環(huán)境條件下其足腫脹度較小，致炎后2h、3h平均足腫脹度約為0．33
