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《毛畢吸蟲成蟲分離方法的研究初報 》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、毛畢吸蟲成蟲分離方法的研究初報摘 要 目的 為提高毛畢吸蟲成蟲的收集率。方法 對家鴨行離體或在體肝靜脈逆行灌注收集肝內(nèi)和門靜脈內(nèi)成蟲;同時對家鴨灌注降主動脈,以收集肝內(nèi)、門靜脈內(nèi)和腸系膜靜脈的成蟲。結(jié)果 應用上述方法可收集到大量活的無損傷的成蟲。結(jié)論 灌注法優(yōu)于解剖法,且簡便、快捷,實用性強。PRELIMIARYSTUDYONTHEMETHODSOFSEPARATING ABSTRACTAimToimprovethecollectingrateoftheadultsofTrichobiharzia.Meth
2、odsTheadultsinvenaportaeandhepaticaeinternaethodsofexsomatizationandretrogradepouringinvenaofliversofducks.Theadultsinlivers,venaportaeandvenamesentericaofducksethodofpouringaortadescendens.ResultsAlotofnon-traumaticlivingadultsandnon-traumatcouldbecollected
3、bythesemethords.Thecollectingrateofthepouringethords(p<0.05).ConclusionsThemethodofpouringoresimple,direct,practicalandpouringcollectingmethod 毛畢屬(Trichobilharzia)吸蟲為鳥類血吸蟲,其尾蚴可侵襲人體引起變態(tài)反應性皮炎,該屬吸蟲宿主較多,家鴨是毛畢屬吸蟲主要的終宿主之一〔1~10〕。從家鴨體內(nèi)分離出成蟲,是研究其形態(tài)、結(jié)構(gòu)并進行分類的重要基礎。作者在淮
4、河水系毛畢屬吸蟲研究的過程中,對毛畢吸蟲成蟲的分離方法進行了初步研究,取得了較為滿意的結(jié)果,現(xiàn)報道如下?! ? 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 病鴨 用毛畢屬吸蟲尾蚴(50條)人工感染的、并在院動物房內(nèi)飼養(yǎng)30天以上的雛鴨(為當?shù)鼐用穹趸募银啠?;購自當?shù)鼐用瘢O民及農(nóng)民)于毛畢吸蟲流行水域內(nèi)放養(yǎng)1年以上的陽性家鴨?! ?.1.2 藥品器材 肝素(Ehter.批號:930407,上海浦江應用生物化學研究所。)乙醚(Diethylether,批號:960423,宜興市第二化學試劑廠)、注射器、9號注射針
5、頭、吊瓶、解剖針、橡皮導管、玻璃導管、手術(shù)刀、剪等?! ?.2 方法 1.2.1 肝門靜脈、腸系膜靜脈解剖法 將病鴨(其糞便經(jīng)毛蚴孵化為陽性的家鴨)固定在解剖臺上,用乙醚麻醉后,剖開胸腹部,將肝門靜脈和肝靜脈結(jié)扎,用眼科剪、解剖針和“0”號毛筆剖檢肝門靜脈和腸系膜靜脈分離成蟲。即從較細的腸系膜靜脈開始,分段以解剖針刺破靜脈,并以解剖針從靜脈遠端驅(qū)趕血液(成蟲)從刺破處流出,用毛筆輕取流出血液至含有生理鹽水的平皿中,用生理鹽水反復清洗換水,直至蟲體被洗凈為止。最后在解剖鏡下收集成蟲。 1.2.2 在體肝臟灌注
6、法 將病鴨(其糞便經(jīng)毛蚴孵化為陽性的家鴨)固定在兔解剖臺上,在翅根部靜脈注射2ml肝素鈉(12500U),隨即用乙醚麻醉后剖開胸腹部,暴露內(nèi)臟(操作中應避免劃傷心臟和肝臟)。接著在肝靜脈出口遠端和門靜脈起始端各作一切口,分別插入導入管和導出管(上述兩管可由普通玻璃吸管替代,其長短、粗細根據(jù)鴨子的大小與靜脈的粗細選用)。將含有生理鹽水的500ml吊瓶,置于2.5m高處,通過輸液皮條與導入管相連,接通生理鹽水,生理鹽水和成蟲一起即可從門靜脈導出管口流出(抬高導入端解剖臺效果尤佳)。 當流出液中含有較多組織液和血液
7、時,可在量杯中換水沉淀幾次,每次5min。若流出液較清晰,立即吸入小培養(yǎng)皿內(nèi),在解剖鏡下或用肉眼直接分檢?! ?.2.3 離體肝臟灌注法 將病鴨(其糞便經(jīng)毛蚴孵化為陽性的家鴨)固定在解剖臺上,在翅膀根部注射2ml肝素鈉。隨即用乙醚麻醉后解剖,暴露內(nèi)臟。用止血鉗或縫合線分別夾(扎)住肝靜脈和門靜脈起始端,仔細分離肝臟,并移至平皿內(nèi)。然后將連有生理鹽水吊瓶的吸管慢慢插入肝靜脈內(nèi),接通生理鹽水進行灌注,將門靜脈流出液倒入300ml量杯內(nèi),沉淀,換水2次,緩慢棄去上液,沉淀液倒入小平皿內(nèi),在解剖鏡下或手持放大鏡用肉眼直
8、接分檢?! ?.2.4 肝門靜脈及腸系膜靜脈同時灌注法 將病鴨(其糞便經(jīng)毛蚴孵化為陽性的家鴨)固定在解剖臺上,在翅膀根部注入2ml肝素鈉,雛鴨酌減,用乙醚麻醉后,迅速打開胸腹腔,暴露內(nèi)臟。用止血鉗夾住肝靜脈,將連有生理鹽水吊瓶的9號針頭插入降主動脈內(nèi),隨后將門靜脈起始端剪斷,用一漏斗放于大、小腸的下方。接通生理鹽水,流出液經(jīng)尼龍網(wǎng)過濾,將阻留物翻入含生理鹽水的培養(yǎng)皿中,直接鏡檢。 2