中華補血草根提取物抗四氯化碳急性肝損傷的實驗研究論文

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1、中華補血草根提取物抗四氯化碳急性肝損傷的實驗研究論文湯新慧高靜陳瑾徐力致【摘要】目的研究中華補血草根提取物(theLimoniumsinenseKtzerootextract,LSE)對小鼠急性肝損傷的防護作用及藥理機制。方法建立小鼠四氯化碳(CCl4)肝損傷模型,檢測LSE對血清天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性的影響;觀察肝細胞超微結(jié)構(gòu)的變化;測定肝線粒體膜電位以及線粒體對高鈣誘發(fā)腫脹的敏感性的變化。結(jié)果一定劑量(100~400mg/kg)LSE能有效抑制CCl4引起的小鼠血清AST及ALT活性的顯著

2、上升;明顯減輕肝損傷引起的小鼠肝臟線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞;抑制線粒體膜電位的降低以及線粒體對外加高鈣誘發(fā)腫脹敏感性的下降。結(jié)論LSE對CCl4誘導的急性肝損傷具顯著的防護作用,其機理可能與保護肝臟線粒體有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】中華補血草四氯化碳肝損傷線粒體Abstract:ObjectiveTostudythehepatoprotectiveeffectofLimoniumsinense(Girard)Ktzerootextract(LSE)andthepossiblemechanismsunderlyingitsprotectionona

3、cuteliverinjuryinducedbycarbontetrachloride(CCl4).MethodsCCl4-inducedliverinjurymodelaspartateaminotransferase(AST)andalanineaminotransferase(ALT)inmice.Ultrastructureofliveritochondrialmembranepotentialandmitochondrialseasuredfolloentof100mg/kg,200mg/kgor400mg/kgLSE,

4、theincreaseinserumASTandALTactivitiesinducedbyCCl4orphologicalchangesinlivermitochondriaarkablylessened.Inaddition,thedecreaseinmitochondrialmembranepotentialandsensitivityofmitochondrialsulationinducedbyCCl4echanismsunderlyingitsprotectiveeffectmayberelatedtoitsprote

5、ctiononlivermitochondria.Keyoniumsinense(Girard)Ktze;Carbontetrachloride;Liverdamage;Mitochondria中華補血草Limoniumsinense(Girard)Kuntz系白丹花科補血草屬多年生泌鹽草本植物,喜生于沿海鹽漬化的低洼濕地上,廣泛分布于我國東北、華北及陜、甘、寧和蘇北等地區(qū)。除具有較高觀賞價值、環(huán)境保護等作用外,具有一定藥用價值。成分分析表明,該植物化學成分十分豐富,含有多糖、鞣質(zhì)、萜類、黃酮類.freeloR冷凍離心機,Kend

6、ro公司;Hitachi7600-020全自動生化分析儀、Hitachi850型熒光分光光度計,日立公司;Flexi-DryTM冷凍干燥儀,StoneRidge公司;JEM100CX透射電子顯微鏡,日本電子公司。羅丹明(Rh123),甘露醇、蔗糖、EDTA、琥珀酸、魚藤酮,購自Sigma公司;Tris-HCl,Hepes,購自Promega公司。1.3動物ICR小鼠,雄性,體重18~22g,購自南京醫(yī)科大學實驗動物中心,許可證號:SCXK(蘇)2002-0031。1.4方法1.4.1動物分組與給藥方法小鼠分5組:正常組、CCl4損

7、傷組、100,200,400mg/kgLSE組。正常組和損傷組小鼠以0.2ml/10g體重生理鹽水連續(xù)灌胃5d,LSE各劑量組則分別以不同濃度LSE同樣方式灌胃;第6天正常組小鼠按10ml/kg腹腔注射橄欖油,其余組小鼠腹腔注射0.15%CCl4(溶于橄欖油中,10ml/kg)。18h后,取血,分離血清,待測血清ALT,AST活力。處死小鼠后,取部分肝組織固定,待制備肝組織電鏡切片,其余肝組織勻漿,制備肝臟線粒體。1.4.2生化檢測分離得到的各組小鼠血清,全自動生化分析儀測定血清ALT及AST活性。1.4.3形態(tài)學觀察所取各組小鼠

8、肝組織,4%戊二醛溶液預固定,1%四氧化鋨再固定,制備肝組織電鏡切片,透射電子顯微鏡觀察肝細胞超微結(jié)構(gòu)。1.4.4線粒體的制備以及膜電位和腫脹度的測定據(jù)Apprille法制備肝臟線粒體,考馬斯亮藍法測定蛋白濃度[5]。按照Emaus法,使用熒光染料

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