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1、鼠曲草提取物對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷保護(hù)作用論文姜麗君,樸錦花,劉宇,具光梅,賁亮,李鎬【摘要】目的研究鼠曲草提取物對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法給動(dòng)物灌胃給藥,用四氯化碳造小鼠急性肝損傷模型,用比色分析法測(cè)定小鼠血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartatetransaminase.freelinase,ALT)活性、肝組織谷胱甘肽過氧化物酶(glutathioneperioxidase,GSH-Px)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。結(jié)果鼠曲草提取物能顯著降低四氯化碳所致小鼠各組血清AST和ALT含量的
2、升高(P0.05),同時(shí)能升高肝組織GSH-Px的活性,降低肝組織MDA的含量(P0.05)。結(jié)論鼠曲草提取物對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷具有一定的保護(hù)作用?!娟P(guān)鍵詞】鼠曲草急性肝損傷保護(hù)作用Abstract:ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectofGnaphaliumtranzscheliiKirp.againstcarbontetrachloride-inducedacuteliverinjuryinmice.MethodsTheacutehepaticinjurymodelice.Theac
3、tivitiesofALTandASTinserum,thecontentofMDAandtheactivityofGSH-Pxinlivercelletricmethod.ResultsTheextractofG.tranzscheliisignificantlydecreasedthelevelsofALTandASTinserumandthecontentofMDA,butelevatedtheactivitycontentofGSH-Pxinliver.ConclusionG.tranzscheliiextractcanprevent
4、theacuteliverinjuryinducedbyCCl4inmicethroughitsantioxidation.Keytranzschelii;Liverinjury;Protectiveeffect鼠曲草為菊科鼠曲草屬植物濕生鼠曲草GnaphaliumtranzscheliiKirp的干燥全草[1]。功能主治為止咳平喘,降血壓,祛風(fēng)濕。用于感冒咳嗽,支氣管炎,哮喘,高血壓病,蠶豆病,風(fēng)濕腰腿痛治療;外用治跌打損傷,毒蛇咬傷。之前我們研究通過體外篩選鼠曲草提取物清除DPPH(二苯代苦味酞自由基)自由基的能力強(qiáng)(濃度25μg/ml時(shí)
5、清除率為58.7%),本實(shí)驗(yàn)研究鼠曲草提取物對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用,并對(duì)其作用機(jī)理進(jìn)行了初步探討,為進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用鼠曲草提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1器材1.1材料鼠曲草采自吉林省長(zhǎng)白山一帶,經(jīng)延邊大學(xué)藥學(xué)院呂惠子副教授鑒定為真品。0.5kg鼠曲草切碎后,加8倍量蒸餾水加熱回流提取3次,1h/次,合并濾液減壓濃縮,得鼠曲草浸膏142g。1.2試劑與儀器水飛薊賓購(gòu)自西安華萃生物技術(shù)有限責(zé)任公司,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所,其他
6、試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。使用的儀器有小型離心機(jī)(Sigma1-13),722型分光光度計(jì)(中國(guó)廈門分析儀器廠)和生化分析儀(SPOTCHEME2,SP-4430);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海榮亞生化儀器廠);電熱恒溫水浴箱(北京市長(zhǎng)鳳儀器儀表公司)。1.3動(dòng)物60只雄性昆明種小鼠,體重(20±2)g,由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物科提供。2方法2.1分組與造模60只雄性昆明種小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組和模型對(duì)照組,陽性對(duì)照組,鼠曲草提取物高、中、低劑量給藥組。鼠曲草給藥組分別按2.0,1.0,0.5g/kg灌胃鼠曲草提取物;陽性對(duì)照組按0.5g/kg灌胃水飛薊
7、賓;正常對(duì)照組和模型對(duì)照組以等體積生理鹽水灌胃,1次/d,連續(xù)5d,末次給藥1h后,除正常對(duì)照組外,其余各組均按5ml/kg腹腔注射0.15%CCl4,花生油溶液,禁食,不禁水。18h后摘眼球取血分離血清。取血后脫頸椎處死小鼠,剖腹,迅速取出肝臟,在肝右中葉相同部位取0.1g肝臟放入置有生理鹽水的勻漿器中,在冰浴中制成100g/L肝勻漿[2]。2.2生化檢測(cè)按試劑盒說明測(cè)定血清ALT,AST活性及肝組織GSH-Px活性和MDA含量。2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以±s表示,各組樣本均數(shù)間差別的假設(shè)檢驗(yàn)用方差分析(ANOVA),P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
8、。3結(jié)果3.1對(duì)血清ALT,AST的影響鼠曲草提取物對(duì)CCl4引起急性肝損傷小鼠血清ALT和AST的活性結(jié)果見表1。模型組ALT和AST較正常組明顯升高,有顯著性差