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1、黃芩莖葉總黃酮對缺血再灌注心肌細胞凋亡及凋亡相關(guān)基因表達的影響論文龔明玉，于曉敏，周曉慧，楊鶴酶【摘要】目的觀察黃芩莖葉總黃酮（ScutellariaBaiculensisStem-leafTotalFlavonoid，SSTF）對缺血再灌注損傷大鼠心肌細胞凋亡及凋亡相關(guān)基因表達的影響。方法采用結(jié)扎大鼠左冠狀動脈前降支30min，然后松開再灌注2h的方法，復制大鼠心肌缺血再灌注損傷模型。實驗分為假手術(shù)組、缺血再灌注組（IR），SSTF不同劑量治療組。采用原位缺口末端標記法（TUNEL）及免疫組化法.freel-leafonmyo
2、cyteapoptosisandtheexpressionofapoptosis-associatedgenesinratheartsyocardialischemiaandreperfusion（IR）.MethodsTheleftanteriordescendingbranchofcoronaryarteryinandreperfusedfor2htomakeamyocardialischemia-reperfusionmodelinrats.Theexperimentrats,ischemia-reperfusion(IR
3、),SSTF(17.5，35，70mg·kg-1·d-1)group.Apoptosisindexof(AI)ofmyocardiumethod,andtheproteinexpressionofBcl-2andBaxgenescardiomyocytesmunohistochemistrymethod.ResultsInIRgroup,AIgroup,SSTFcoulddecreaseAI(P＜0.05，0.01)，up-regulateproteinexpressionofBcl-2gene(P＜0.05，0.01)，and
4、doyocyteapoptosisinischemia-reperfusionrathearts.ThepossiblemechanismistoraisetheratioofBcl-2/Baxproteinsbyincreasingtheexpressionofbcl-2geneanddecreasingtheexpressionofbaxgene.Key-leaf；Reperfusioninjury；Apoptosis；Geneexpression近年來，研究發(fā)現(xiàn)細胞凋亡是心肌缺血再灌注過程中心肌細胞死亡的重要機制之一［1］
5、。細胞凋亡的發(fā)生、發(fā)展受多種基因的調(diào)控，其中凋亡加速基因bax和凋亡抑制基因bcl-2被認為與細胞凋亡密切相關(guān)［2］。本實驗觀察大鼠心肌缺血再灌注時心肌細胞凋亡的發(fā)生情況，并探討SSTF對心肌缺血再灌注時心肌細胞凋亡及凋亡相關(guān)基因bax和bcl-2表達的影響。1材料與方法1.1動物健康SD大鼠40只，體重（230±20）g，雌雄各半（由承德醫(yī)學院實驗動物中心提供）。1.2藥品、試劑及儀器SSTF純度為61.8%，批號010608，由本院省重點實驗室—中藥研究所提供，用飽和NaHCO3溶解配置后灌胃。原位細胞凋亡檢測試劑盒及Bax
6、，Bcl-2免疫組化試劑盒購自北京中杉生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。DB-3型心電圖機，上海光電醫(yī)用電子儀器有限公司；D-2155型石蠟切片機，瑞士LeiCa有限公司產(chǎn)品。1.3大鼠心肌缺血再灌注模型的復制10%烏拉坦腹腔注射麻醉（1.0mg/kg），仰臥位固定，用針型電極插入大鼠四肢皮下記錄標準肢體II導聯(lián)心電圖，氣管插管，接人工呼吸機，呼吸頻率60次/min，從胸骨左緣3～4肋間切開胸壁，切開心包膜后，暴露心臟，以左冠狀靜脈主干為標志，于左心耳根部下方2mm處進針穿過心肌表層在肺動脈圓錐旁出針，將一段直徑2mm，長5mm的硅膠管置于
7、結(jié)扎線與心肌之間備用，穩(wěn)定10min后進行實驗。1.4實驗分組40只SD大鼠隨機分為5組：①假手術(shù)組（shamoperationgroup,SO）：用3號絲線穿過冠狀動脈左前降支，但不結(jié)扎。②心肌缺血再灌注組(IschemiaReperfusiongroup,IR)：結(jié)扎冠狀動脈左前降支，造成心肌缺血，30min后剪斷縫合線，取出硅膠管，再灌注2h，假手術(shù)組和心肌缺血再灌注組于術(shù)前分別給予相應(yīng)容積的生理鹽水，連用1周；③SSTF小劑量組(SSTFI組)：手術(shù)前給予SSTF灌胃17.5mg·kg-1·d-1，連用1周，其余同②組。
8、④SSTF中劑量組(SSTFII組)：手術(shù)前給予SSTF灌胃35mg·kg-1·d-1，連用1周，其余同②組。⑤SSTF大劑量組(SSTFIII組)：手術(shù)前給予SSTF灌胃75mg·kg-1·d-1，連用1周，其余同②組。再灌注2h末，迅速剪下左冠狀動脈前降支支
