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1、滲漉法提取丹參脂溶性部位的工藝研究論文【摘要】目的探討丹參飲片中采用滲漉法提取脂溶性部位的最佳工藝條件。方法以丹參酮ⅡA和隱丹參酮的含量為指標(biāo)，采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行提取工藝全面優(yōu)選，并用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法測定其含量。結(jié)果最佳乙醇滲漉工藝為：藥材粉碎至綠豆粒大，用15倍量95%乙醇冷浸24h后，滲漉速度3ml/min。結(jié)論采用滲漉法提取丹參中脂溶性部位，操作簡便，方法可行，降低了生產(chǎn)成本.freelethodoftheliposolubilityactiveprinciplesofRhizomaSalviaeMiltiorrhizae.Metho
2、dsTheextractionprocessinedbyRP-HPLCasindex．ResultsThebestextractionconditionofliposolubilitypartes95%alcohol,after24hourscold-soaking,percolateingl/min.ConclusionTheextractionmethodforRhizomaSalviaeMiltiorrhizaecansavetimeandenergyandbesuitableforthemodernproduction．Keyiltiorrhiza;Orthog
3、onaldesign;TanshinoneⅡA;Cryptotanshinone丹參為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根莖。味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)，具有祛淤止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效，用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、癥瘕積聚、胸腹刺痛、瘡瘍腫痛、心煩不眠、肝脾腫大、心絞痛等病癥。丹參水溶性成分主要有丹參素以及丹參酚酸類，對這一部分的研究較多。丹參的脂溶性成分主要為丹參酮類化合物，主要成分有丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、隱丹參酮、二氫丹參酮等，具有天然抗氧化活性、天然心血管藥理作用以及抗菌消炎作用，還具有明顯的抗腫瘤作用。1器材Aglient110
4、0系列液相色譜儀（美國惠普公司）；丹參酮、隱丹參酮對照品（中國藥品生物制品檢定所）；丹參飲片（南京本草藥店），經(jīng)自我鑒定為丹參SalviamiltiorrhizaBge.的根。2方法與結(jié)果2.1丹參提取脂溶性成分指標(biāo)的建立2.1.1干膏率測定參照2005年版《中國藥典》附錄XA浸出物測定法，精密量取相當(dāng)于丹參5g的藥液，置于已干燥恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移于干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量，計(jì)算干膏收率，干膏收率（%）=干膏重量/丹參重量×100%。2.1.2丹參酮ⅡA、隱丹參酮的含量測定預(yù)試發(fā)現(xiàn)，由于丹參中丹酚酸類成分在波長268n
5、m處有著較強(qiáng)的紫外吸收，在進(jìn)行提取工藝考察時(shí)，許多工藝在脂溶性成分被提出時(shí)，水溶性成分同時(shí)被提出，從而使UV法測定總丹參酮含量的方法在提取工藝考察過程中很不精確，故通過使用HPLC測定丹參酮ⅡA以及隱丹參酮的含量，對丹參脂溶性部位的提取工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)。色譜條件：色譜柱為ScienhomeKromasilC18(150mm×4.6mm)及預(yù)柱，流動(dòng)相為甲醇-水(75∶25)，檢測波長270nm，柱溫30℃，流速0.8ml/min，理論板數(shù)以丹參酮ⅡA，隱丹參酮計(jì)均不低于2000。圖譜見圖1～2。圖1隱丹參酮、丹參酮ⅡA的色譜圖（略）圖2樣品色譜圖（略）丹參酮ⅡA儲(chǔ)備液的制備
6、：精密稱取用五氧化二磷干燥5h的丹參酮ⅡA對照品4.82mg置50ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。隱丹參酮儲(chǔ)備液的制備：精密稱取用五氧化二磷干燥5h的隱丹參酮對照品4.83mg置25ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：精密量取2ml丹參酮ⅡA儲(chǔ)備液和1ml隱丹參酮儲(chǔ)備液置5ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，最終濃度為丹參酮ⅡA38.56μg/ml，隱丹參酮38.64μg/ml。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：精密吸取上述混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液2,.freell。從中精密量取2ml用甲醇定容至10ml容量瓶中，微孔濾膜過濾，進(jìn)樣10μl，按外標(biāo)法
7、計(jì)算其中丹參酮ⅡA以及隱丹參酮含量。2.2脂溶性部位提取工藝研究滲漉是常用的浸出方法之一，滲漉時(shí)，溶劑滲入藥材的細(xì)胞中溶解大量的可溶性物質(zhì)之后，濃度增加，密度增大而向下移動(dòng)，上層的浸取溶劑或稀浸液置換位置，造成良好的濃度差，使擴(kuò)散較好地自然進(jìn)行，故其浸出效果優(yōu)于浸漬法，提取也較完全，而且省去了分離浸出液的時(shí)間和操作，故采用滲漉法來研究丹參中脂溶性部位的提取。在滲漉法提取脂溶性部位工藝研究過程中，擬對乙醇濃度、粉碎度、滲漉總的乙醇倍量以及滲漉流速的不同水平進(jìn)行研究，以便尋找出最佳滲漉提取法。具體因素水平的設(shè)計(jì)詳見表1。精確稱量每份20g，先
