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《四環(huán)素生產(chǎn)菌誘變育種與發(fā)酵性能的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、四環(huán)素生產(chǎn)菌誘變育種與發(fā)酵性能的研究中國(guó)抗生素雜志2000年第2期第25卷論著作者：王敏 路福平 王建玲 杜連祥單位：天津輕工業(yè)學(xué)院食品工程系， 天津300222關(guān)鍵詞：四環(huán)素；誘變育種；金色鏈霉菌 摘 要 采用紫外線對(duì)四環(huán)素生產(chǎn)菌金色鏈霉菌4-28的原生質(zhì)體進(jìn)行誘變處理，選育得到一株高產(chǎn)突變株H32-37。該菌在形態(tài)上與出發(fā)菌株存在明顯差異：菌落小，呈圓形或梅花形，表面粗糙，孢子豐富，孢子顏色深，四環(huán)素生產(chǎn)能力比出發(fā)菌株提高23.9%。研究了其發(fā)酵性能，優(yōu)化了培養(yǎng)基組成和發(fā)酵工藝條件，使四環(huán)素效價(jià)提高了44.4%。Studyonthebreedingofhightetracycline
2、producingstrains andtheirfermentationcharacteristicsWangMin， LuFuping， WangJianling and DuLianxiang (DepartmentofFoodEngineering,TianjinInstituteofLightIndustry， Tianjin300222) ABSTRACT ProtoplastoftheStreptomycesaureofaciens4-28strainwasmutatedbyUV,ahigh-yieldingstrainH32-37wasobtained.Theappa
3、rentdifferencesinmorphologybetweenthestrainH32-37andtheparentstrainwereasfollows:thecolonyissmaller,round-shapeorplumblossom-shape,roughsurface,sporesoutputplentiful,deepgray.Itstetracyclineproductionis23.9%higherthanthatoftheparent.Thefermentationcharacteristicswereinvestigated,themediumandfermen
4、tationconditionwereoptimized.Undertheoptimumcondition,thetetracyclineactivityincreasedby44.4%incomparisonwiththatoftheparentone. KEYWORDS Tetracycline； Mutationbreeding； Streptomycesaureofaciens 四環(huán)素具有抗菌譜寬、急性毒性較低、副作用較小的優(yōu)點(diǎn)，此外通過化學(xué)改造可制備有臨床價(jià)值且療效更為優(yōu)越的半合成四環(huán)素，保證了它在抗感染藥物領(lǐng)域中的重要地位。近年來，四環(huán)素在非感染性疾病中的臨床應(yīng)用也得以不斷
5、發(fā)展。例如它對(duì)癌性胸腔積液、肝性胸水、惡性心包積液等疾病均有良好的治療效果［1，2］。金色鏈霉菌自20世紀(jì)50年代就開始做為四環(huán)素的生產(chǎn)用菌，為提高產(chǎn)量，以前多采用對(duì)其孢子進(jìn)行誘變的方法。近年有不少運(yùn)用原生質(zhì)體形成和再生來提高抗生素產(chǎn)量的成功報(bào)道［3，4］。本文利用紫外線對(duì)金色鏈霉菌的原生質(zhì)體進(jìn)行誘變處理，選育得到優(yōu)于原生產(chǎn)菌株的高產(chǎn)菌株H32-37，并對(duì)其發(fā)酵特性及發(fā)酵工藝進(jìn)行了研究。 1 材料與方法 1.1 出發(fā)菌株 金色鏈霉菌(Streptomycesaureofaciens)4-28，本院應(yīng)用微生物研究室提供?！ ?.2 培養(yǎng)基 (1)斜面培養(yǎng)基(%)：麩皮3.6，瓊脂2.
6、4，pH自然?！ ?2)平板分離培養(yǎng)基(%)：面粉2，蛋白胨0.1，KH2PO40.05，瓊脂2，pH自然?！ ?3)種子培養(yǎng)基(%)：黃豆餅粉2，淀粉4，蛋白胨0.5，酵母粉0.5%，CaCO30.4，(NH4)2SO40.3，NaBr0.2，MgSO40.025，KH2PO40.02，pH自然。 (4)發(fā)酵培養(yǎng)基(%)：黃豆餅粉4，淀粉10，酵母粉0.25，蛋白胨1.5，(NH4)2SO40.3，CaCO30.5，NaBr0.2，MgSO40.025，2-巰基苯丙噻唑0.0025，pH自然?！ ?5)再生培養(yǎng)基［5］。 (6)S培養(yǎng)基［5］?！ ?7)P穩(wěn)定液［5］?！ ?.3 培
7、養(yǎng)條件 將菌種接于斜面培養(yǎng)基，35℃培養(yǎng)4～5d，孢子成熟后，配制成濃度為107個(gè)/ml的孢子懸浮液。取1ml接種于種子培養(yǎng)基，31℃振蕩(180r/min)培養(yǎng)16～18h。按8%接種量將種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，于31℃振蕩(260r/min)培養(yǎng)6d。取樣，測(cè)定四環(huán)素效價(jià)?！ ?.4 原生質(zhì)體的制備 取1ml孢子懸浮液接種于S培養(yǎng)基中，28℃振蕩(180r/min)培養(yǎng)9h，按2%接種量轉(zhuǎn)接于含有1%甘氨酸的
