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《幾丁質(zhì)酶生產(chǎn)菌的誘變育種及搖瓶發(fā)酵條件優(yōu)化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、※生物工程食品科學(xué)2007,Vol.28,No.09405幾丁質(zhì)酶生產(chǎn)菌的誘變育種及搖瓶發(fā)酵條件優(yōu)化田強(qiáng)，張彩，吳子健(天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院生物工程系，天津300134)摘要：從本實(shí)驗(yàn)室分離篩選的產(chǎn)幾丁質(zhì)酶菌株TS30出發(fā)，經(jīng)紫外線(UV)+LiCl復(fù)合誘變處理，獲得一株遺傳性穩(wěn)定的高活性幾丁質(zhì)酶變異株TUC13。采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)法對(duì)TUC13發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，采用經(jīng)實(shí)驗(yàn)改進(jìn)后培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，變異株TUC13單位發(fā)酵液幾丁質(zhì)酶活性提高了236.5%。關(guān)鍵詞：幾丁質(zhì)酶；誘變
2、；發(fā)酵條件MutagenesisBreedingofStrainforChitinaseProductionandOptimizationofFermentationConditionsinShakingFlasksTIANQiang，ZHANGCai，WUZi-jian(TianjinKeyLaboratoryofFoodBiotechnology,DepartmentofBioengineering,CollegeofBiotechnologyandFoodScience,TianjinUniversityofCommerce
3、,Tianjin300134,China)Abstract：Ahigherchitinase-producingmutantwithstableheritage,TUC13,wasobtainedfrominitialstrainTS30,whichwasseparatedfromsoilatearlierresearchstage,bymeansofUV+LiClmutagenization.TheoptimummediumandfermentationconditionsforTUC13havebeenestablishedt
4、hroughorthogonaltestdesign.Undertheestablishedoptimalcultureconditionsandintheestablishedoptimalmedium,thechitinaseactivityinbrothofTUC13increasedby236.5%comparedwiththatinthebrothofinitialstrainunderthecultureconditionsbeforeoptimization.Keywords：chitinase；mutagenesi
5、s；fermentationcondition中圖分類(lèi)號(hào)：TS201.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1002-6630(2007)09-0405-05幾丁質(zhì)酶(chitinase，EC3.2.1.14)是一種可催化水幾丁質(zhì)酶水平的重要手段之一[9]。解幾丁質(zhì)的酶[1]。幾丁質(zhì)酶的用途廣泛：農(nóng)業(yè)上利用本實(shí)驗(yàn)以前期研究中從土壤篩選出的一株幾丁質(zhì)酶產(chǎn)幾丁質(zhì)酶抑制病原真菌生長(zhǎng)的作用可研發(fā)新型生物防治生菌TS30為出發(fā)菌株，采用紫外線(UV)+LiCl復(fù)合誘變處劑[2-3]；環(huán)境保護(hù)方面可用于蝦蟹加工業(yè)幾丁質(zhì)廢物的處理，選育出產(chǎn)幾丁質(zhì)酶水平顯著
6、提高的變異株TUC13，理，減少?gòu)U殼對(duì)環(huán)境的污染[4]；生物技術(shù)領(lǐng)域可用于真然后采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)法對(duì)產(chǎn)酶培養(yǎng)基和發(fā)酵工藝條件進(jìn)菌原生質(zhì)分離[5]；而以幾丁質(zhì)酶為工具水解幾丁質(zhì)的產(chǎn)行優(yōu)化，使變異株產(chǎn)幾丁質(zhì)酶能力進(jìn)一步提高。物幾丁寡糖，因具有控制血膽固醇含量、降血糖、抗1材料與方法腫瘤、治療關(guān)節(jié)痛、改善腸道微生物區(qū)系和增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生理活性，及抗菌防腐、保水、保濕等功能，1.1材料在醫(yī)藥、食品、化妝品等工業(yè)中有廣闊的應(yīng)用前景[6-7]。1.1.1菌種目前，幾丁質(zhì)酶及幾丁寡糖的工業(yè)化生產(chǎn)與廣泛應(yīng)出發(fā)菌株為T(mén)S30(Pseudomona
7、ssp.)由天津商業(yè)大學(xué)用還受到制約，其主要原因是所選菌株產(chǎn)酶能力低。由生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院幾丁寡糖課題組從土壤中分于構(gòu)建幾丁質(zhì)酶基因工程高產(chǎn)菌至今尚未取得突破性進(jìn)離、鑒定并保存。展[8]，因此，采用傳統(tǒng)的物理或化學(xué)方法進(jìn)行誘變育種1.1.2培養(yǎng)基 及尋找合適的發(fā)酵工藝條件，仍然是提高微生物菌株產(chǎn)收稿日期：2007-06-20基金項(xiàng)目：教育部重點(diǎn)科技項(xiàng)目(030004)作者簡(jiǎn)介：田強(qiáng)(1956-)，男，講師，學(xué)士，主要從事微生物學(xué)和工業(yè)微生物育種方面的研究。4062007,Vol.28,No.09食品科學(xué)※生物工程①基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基
8、(%)：KCl0.05、FeSO40.0001%、表1幾丁質(zhì)酶生產(chǎn)培養(yǎng)基優(yōu)化試驗(yàn)因素水平表Table1OrthogonaldesignonoptimizationofculturemediumZnCl20.007%、CaCl20.002%；②基礎(chǔ)產(chǎn)
