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《均勻設計法優(yōu)化超聲波提取茯苓多糖工藝條件的研究論文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、均勻設計法優(yōu)化超聲波提取茯苓多糖工藝條件的研究論文趙子劍,陳迪釗,連琰,趙永新【摘要】目的優(yōu)選超聲波提取茯苓多糖工藝參數(shù)。方法以茯苓多糖為評價指標,采用均勻設計實驗對超聲波提取茯苓多糖提取工藝進行優(yōu)選。結(jié)果最佳提取工藝條件為:溶劑70%的乙醇,料液比為1∶10,溫度25℃,提取20min。結(jié)論優(yōu)選出的工藝科學合理?!娟P(guān)鍵詞】茯苓;超聲波提取;均勻設計Abstract:ObjectiveTooptimizethesupersonicextractionprocessofpachymaninPoriacocos(Schdesignizesupersonicext
2、ractionprocessofpachymaninPoriacocos(SchaninPoriacocos(Schalextractingprocedureperatureein.ConclusionTheoptimumextractingprocedureisreasonableandstable.Keydesign茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poriacocos(Schin,考察粒度對茯苓多糖得率的影響。結(jié)果見表1。表1藥材粒度對多糖得率的影響(略)實驗結(jié)果表明,藥材粒度為20~60目時,提取時提取率較好。2.2提取次數(shù)的選擇取20~60目粒度茯苓藥材,在乙
3、醇濃度50%,提取溫度45℃,提取時間20min條件下,分別提取1,2,3次,考察提取次數(shù)對茯苓多糖得率的影響。結(jié)果見表2。表2提取次數(shù)對多糖得率的影響(略)結(jié)果表明,超聲波提取1次后,茯苓多糖即已提取完全。2.3茯苓提取物中多糖含量的測定方法2.3.14%苯酚溶液的配制取苯酚100g,加鋁片0.1g和碳酸氫鈉0.05g,蒸餾并收集182℃餾分,稱取4g,在100ml容量瓶加水溶解至刻度線,然后放冰箱內(nèi)冷藏備用(一定要在182℃時收集其餾分)。在蒸餾過程中,還要控制好冷凝程度,若冷凝管內(nèi)的水流量過快,則會很快使其中的餾分結(jié)晶而影響到餾分的正常收集。2.3.2
4、制備標準曲線精密稱取置五氧化二磷減壓干燥器中干燥12h以上的無水葡萄糖標準品15mg,置25ml容量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻置室溫下(約24℃)備用(濃度為0.6mg/ml)。精密量取對照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,分別置于100ml容量瓶中,并加水至刻度,搖勻。精密量取上述各溶液2ml,置具塞試管中,分別加入4%的苯酚溶液1ml,混勻后迅速加入濃硫酸7.0ml,搖勻,并于45℃水浴中保溫30min后取出,置冰水浴中5min后取出。然后以第1份為空白對照組,用分光光度法在490nm的波長處測定其吸收度A,以吸光度(A)為
5、縱坐標,溶液濃度C為橫坐標。統(tǒng)計,進行線性回歸。得回歸方程:Y=0.0114+0.0183X,相關(guān)系數(shù)r=0.9995,葡萄糖濃度在0.006~0.03mg/ml范圍內(nèi)吸光度與濃度呈良好的線性關(guān)系。2.3.3苯酚-硫酸法測茯苓多糖含量將各提取方法所得樣品制成1g/ml的溶液,精密量取2ml,照標準曲線的制備項下的方法,用紫外分光光度法測定其吸光度,從標準曲線的回歸方程中計算出待測溶液濃度,并進一步計算出其多糖含量(以葡萄糖量計)。結(jié)果見表3。2.4均勻?qū)嶒炘O計及結(jié)果分析根據(jù)茯苓多糖超聲提取工藝的影響因素,選取乙醇濃度(因素水平下限0%,因素水平上限70%)、
6、提取時間(因素水平下限20min,因素水平上限60min)、溫度(因素水平下限25℃,因素水平上限75℃)、料液比(因素水平下限1∶5,因素水平上限1∶14)為考察因素,進行U*13(134)均勻?qū)嶒炘O計表,并以茯苓多糖(以葡萄糖計)為評價指標,優(yōu)選超聲提取茯苓多糖最佳工藝。見表3。表3U*13(134)均勻設計方案及結(jié)果(略)實驗結(jié)果用多元回歸處理,將表3結(jié)果輸入均勻設計分析軟件2.10。進行二次多項式逐步回歸,得回歸方程如下:Y=0.8764+0.9768XA+0.1007XB+0.2969XC+0.5124XD(A為乙醇濃度,B為提取時間,C為提取溫度
7、,D為料液比),復相關(guān)系數(shù)R=0.9430;樣本容量n=13,顯著性水平α=0.05,檢驗值Ft=16.07,臨界值F(0.05,4,8)=3.838,Ft>F(0.05,4,8),回歸方程顯著。剩余標準差s=0.2959。各方程項對回歸的貢獻(按偏回歸平方和降序排列):U(A)=5.202,U(A)/U=92.44%;U(D)=1.958e-9,U(D)/U=3.480e-8%;U(C)=9.781e-17,U(C)/U=1.738e-15%,U(B)=1.125e-17,U(B)/U=1.999e-16%。第2方程項[B]對回歸的貢獻最小,對其進行顯著性
8、檢驗:檢驗值F(B)=1.285e-16,臨界值F(