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《電針足三里對嗎啡戒斷大鼠μ受體mrna表達的影響論文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、電針足三里對嗎啡戒斷大鼠μ受體mRNA表達的影響論文.freelRNA的表達,觀察電針足三里對嗎啡戒斷大鼠體重及μ受體mRNA表達的影響。結果電針組大鼠體重比戒斷組增加明顯(P0.05),戒斷組和電針組比正常組腦組織中μ受體mRNA表達降低,治療后電針組比戒斷組腦組織中μ受體mRNA表達明顯增加。結論電針足三里具有提高嗎啡戒斷大鼠體重、改善大鼠嗎啡戒斷癥狀的作用。電針調節(jié)嗎啡戒斷大鼠海馬、下丘腦μ受體mRNA的表達,可能是電針改善大鼠嗎啡戒斷癥狀的作用機制之一?!娟P鍵詞】電針足三里嗎啡戒斷大鼠μ受體mRNAAbstract:
2、ObjectiveToresearchthemechanismofelectroacupuncture(EA)improvingmorphineabstinencesyndromeinrats.MethodsThemodeloftheratorphineabstinencesyndromeRNAinthebraintissueofmorphineinedbyRT-PCR,andeffectsofEAatZusanli(ST36)onthebodyRNAofmorphineorphineabstinencegroup(P0.0
3、5).paringRNAinthebrainorphineabstinencegroup.AfterEA,theexpressionofμ-opioidreceptormRNAoftheEAgrouporeincreasedthanthemorphineabstinencegroup.ConclusionEAatZusanli(ST-36)canincreasebodyorphineprovemorphineabstinencesyndrome.EAcanincreaseexpressionofμ-opioidrecepto
4、rmRNAinhippolcapalandhypothalamusofbraintissueinmorphineaybeoneofthemechanismsofEAimprovingmorphineabstinencesyndromeofrats.KeyorphineRNA有研究報道,大鼠在嗎啡依賴、戒斷過程中額葉皮質、海馬、丘腦等μ受體出現(xiàn)明顯下調,顯著低于正常組水平,.freelRNA的表達,在觀察電針足三里對嗎啡戒斷大鼠體重影響的同時,探討電針對海馬、下丘腦μ受體mRNA表達的調節(jié)作用?,F(xiàn)將結果報道如下。1材料與方法1
5、.1儀器與試藥PCR儀(德國產(chǎn));臺式高速冷凍離心機(美國產(chǎn));電泳及轉印系統(tǒng)(瑞典Amersham);凝膠成像系統(tǒng)(美國伯樂)。鹽酸嗎啡由沈陽第一制藥廠提供,批號000606;RT-PCR試劑盒購自基Promega公司,dntp、Taq酶購自Sangon公司。1.2動物健康SD大鼠24只,雌雄各半,體重180~200g,安徽醫(yī)科大學實驗動物中心提供。1.3造模連續(xù)遞增給予大鼠注射嗎啡20d,第1天皮下注射5mg/kg,從第2天起,每天嗎啡劑量增加5mg/kg(每天上、下午各1次),第20天的給藥量達100mg/kg,造成嗎
6、啡依賴大鼠模型,于實驗第21天停藥,大鼠出現(xiàn)戒斷癥狀,造成自然嗎啡戒斷大鼠模型。1.4分組將實驗大鼠分為正常組、戒斷組、電針組,每組8只,雌雄各半。正常組:皮下注射注射用水0.5mL,每天1次,連續(xù)20d,常規(guī)飼養(yǎng)觀察7d;戒斷組:造模后不予任何治療,常規(guī)飼養(yǎng)觀察7d;電針組:造模后,于實驗第21天給予電針雙側足三里(PCE-88A型程控電針儀,采用2Hz和100Hz交替),每天1次,每次30min,連續(xù)治療7d。1.5觀察指標1.5.1體重在造模前及造模結束后4、12、24h和電針治療后,進行大鼠體重的測量。1.5.2μ受
7、體mRNA表達運用半定量RT-PCR方法測定丘腦和海馬μ受體mRNA的表達。引物由Sangon公司合成,μ受體兩條引物序列為:上游引物:5’ACCTGGCTCCTGGCTCAACTT3’;下游引物:5’TGGACCCCTGCCTGTATTTTG3’;β-actin上游引物:5’ATCATGTTTGAGACCTTCAACACCCCAGCC3’;β-actin下游引物:5’AAGAGAGCCTCGGGGCATCGGAACCGCTCA3’??偺崛NA,逆轉錄:大鼠脫臼處死,浸泡在75%酒精中10min。在消毒室內(nèi)斷頭取腦。迅速分
8、離丘腦和海馬,各取100mg,消毒、碾碎;加Tizzol1mL;加氯仿0.2mL;4℃,離心15min;轉上層水相于另一1.5mLEP管中;加等體積異丙醇,混勻,室溫10min;再4℃,離心10min;棄上清,加冰預冷的75%乙醇1mL;4℃,離心5min;棄上清,空氣干燥5~10min;