卡維地洛抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的研究論文

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1、卡維地洛抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的研究論文【摘要】目的探討卡維地洛在動(dòng)脈粥樣硬化病變中的抗氧化作用及其對(duì)增殖細(xì)胞核抗原（PA）及核因子kappaBp65（NFκBp65）活化的影響。方法雄性新西蘭大耳白兔24只，隨機(jī)分為正常組、高脂組、卡維地洛組，每組8只，共計(jì)喂養(yǎng)10周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，酶法檢測(cè)各組家兔的血清三酰甘油及膽固醇，黃嘌呤氧化法檢測(cè)血清超氧化物歧化酶（SOD），硫代巴比妥酸比色法檢測(cè)丙二醛（MDA）,并采用免疫組化的方法測(cè)定血管壁PA及NFκBp65的表達(dá)。結(jié)果高脂組和卡維地洛組血清三酰甘油和膽固醇較正常組明顯升高（F=146.25、287.83,q=14.76～20.75,P0.01）

2、，而該兩組間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=0.53、0.59,P0.05）。高脂組較正常組SOD明顯降低.freelaleNelydividedintothreegroups:normalgroup,highfatdietgroupandcavediloltreatedgroup,ent,thelevelsofserumtriglycerideandcholesteroleasuredbyenzymaticmethod,ofserumSODbyxanthineoxidativetechnique,.freelMDAbythiobarbituricacidmethod.Expressionoft

3、hePCANandNFκBp65inthevascularmunohistochemically.Resultsparedalrabbits,thelevelsofserumtriglycerideandcholesterolofthehighfatdietandcavediloltreatedelyhigh（F=146.25，287.83；q=14.76-20.75；P0.01),butnostatisticaldifferenceSODandhighlevelserumMDAalgroup,andMDAalgroup（F=21.65，75.64;q=4.98-24.29;P0.0

4、1）.TheexpressionofPAandNFκBp65inhighfatdietgrouparkedlyincreasedasparedalgroup;buttheexpressionightrelievethelipidperoxidationinjuryandblockNFκBactivationsoastoinhibittheproliferationofsmoothmusclecells.［KEYDA）試劑盒購自南京建成生物工程研究所；PA和NFκBp65及相關(guān)SP試劑盒購自武漢博士德生物工程研究所。1.2主要儀器上海精密儀器廠721型分光光度計(jì)，美國Lambert公司石蠟

5、切片機(jī)，日本Olympus公司顯微照相裝置，德國歐波同公司VIDAS21圖像分析系統(tǒng)。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組健康雄性新西蘭大耳白兔24只（購于華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部，合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字第19025號(hào)），體質(zhì)量（2.50±0.25）kg，分籠飼養(yǎng)，隨機(jī)分為正常組、高脂組、卡維地洛組，每組8只。1.4模型的制備及藥物干預(yù)家兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，高脂組和卡維地洛組均一次性經(jīng)耳緣靜脈注射牛血清清蛋白250mg/kg，然后均行高脂飲食。高脂飼料配方為：1g膽固醇+5g豬油+94g普通飼料。另外，卡維地洛組每日清晨行卡維地洛10mg/kg灌胃。正常組行普通飼料喂養(yǎng)（100mg/d）。各組家兔共喂

6、養(yǎng)10周。1.5血液標(biāo)本的采集及測(cè)定喂養(yǎng)10周后，各組動(dòng)物分別行250g/L烏拉坦（4mL/kg）腹腔麻醉，沿胸骨正中線縱向剖開胸腔暴露心臟，直視下行右心室穿刺抽血，酶法檢測(cè)各組家兔的血清三酰甘油及膽固醇，黃嘌呤氧化法檢測(cè)血清SOD，硫代巴比妥酸比色法檢測(cè)MDA，各操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。1.6局部病理標(biāo)本的取材及檢測(cè)全血采集完畢后氣胸處死動(dòng)物，游離主動(dòng)脈至髂總動(dòng)脈分叉處，仔細(xì)清除血管壁脂肪及結(jié)締組織，縱向剖開血管壁暴露內(nèi)膜表面，鋪平。高脂組、卡維地洛組在主動(dòng)脈弓病變處取材，大小約1.0cm×0.5cm，正常組亦在主動(dòng)脈弓處取材，其大小也約1.0cm×0.5cm，分別放入100g/L中性

7、多聚甲醛中固定，并逐步脫水，透明，浸蠟，包埋制成蠟塊。每一標(biāo)本連續(xù)切片兩張，分別行PA及NFκBp65免疫組化檢測(cè)，免疫組化采用SP法，DAB顯色，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。PA及NFκBp65陽性表達(dá)主要在細(xì)胞核內(nèi)，VIDAS21計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)測(cè)定一定面積陽性信號(hào)值和陽性信號(hào)平均吸光度，并計(jì)算二者乘積，即積分吸光度。測(cè)定時(shí)每一病理切片在高倍鏡下隨機(jī)取10個(gè)視野，取其平均值。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)以±s表示，用SPS