苯并咪唑類殺菌劑殘留分析方法研究進(jìn)展

ID:12080670

大小:30.50 KB

頁(yè)數(shù):3頁(yè)

時(shí)間:2018-07-15

苯并咪唑類殺菌劑殘留分析方法研究進(jìn)展_第1頁(yè)
苯并咪唑類殺菌劑殘留分析方法研究進(jìn)展_第2頁(yè)
苯并咪唑類殺菌劑殘留分析方法研究進(jìn)展_第3頁(yè)
資源描述:

《苯并咪唑類殺菌劑殘留分析方法研究進(jìn)展》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、原位雜交技術(shù)一、概述(一)概念:原位雜交(insituhybridization,ISH)是應(yīng)用生物化學(xué)中核酸分子雜交(nucleicacidmolecularhybridization)的原理,在組織切片、細(xì)胞涂片或印片上原位檢測(cè)某種DNA或RNA序列的一項(xiàng)技術(shù)。是將分子雜交與組織學(xué)相結(jié)合的一項(xiàng)技術(shù),也稱之為雜交組織化學(xué)(hybridizationhistochemistry)、細(xì)胞雜交(cytologicalhybridization)或原位雜交組織化學(xué)(insituhybridizationhistochemistry)。(二)歷史和現(xiàn)狀可以檢測(cè)組織細(xì)胞

2、本身的或外源的DNA或RNA序列。二、原位雜交的基本原理核酸分子雜交的基本原理是利用核酸分子(DNA,RNA)的堿基對(duì)形成氫鍵的互補(bǔ)性(A=T,A=U,C=G),用一標(biāo)記的核酸探針去檢測(cè)與之堿基互補(bǔ)的靶核酸,這與免疫學(xué)中抗原-抗體的反應(yīng)相似。優(yōu)點(diǎn):①分子雜交的特異性強(qiáng)、靈敏度高,同時(shí)又有組織細(xì)胞化學(xué)染色的可見性。②既可用新鮮組織,又可用石蠟包埋組織作回顧性研究。③所需樣本量少,可用活組織細(xì)針穿刺和細(xì)胞涂片。④應(yīng)用范圍廣泛,可對(duì)特定的基因(如癌基因、病毒基因)DNA、mRNA的表達(dá)進(jìn)行定位、定性和定量、組織細(xì)胞分布和雜交電鏡的亞細(xì)胞定位研究。一、探針(probe

3、)是含有互補(bǔ)順序的外源性被標(biāo)記的DNA或RNA片段,是在原位雜交中用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)特定DNA或RNA順序定位的特殊試劑,探針的堿基序列是已知的,只能與特定的核酸分子結(jié)合上。用于原位雜交的探針有不同種類,可用于不同靶核酸的探測(cè)。(一)探針?lè)N類、來(lái)源和應(yīng)用1.雙鏈cDNA探針2.單鏈cDNA探針3.寡核苷酸探針4.cRNA探針(二)探針標(biāo)記的種類1.放射性標(biāo)記2.非放射性標(biāo)記最常用的為生物素(光敏生物素、補(bǔ)骨脂素生物素)和地高辛(digxigenin,DIG),此外還有熒光素、酶類,如辣根過(guò)氧化酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)等。(三)探針標(biāo)記的方法1.切口移位法

4、亦稱缺口平移法,是常用的標(biāo)記DNA的方法。最常用的標(biāo)記物為32P,也可用地高辛和生物素進(jìn)行標(biāo)記。2.引物延伸法(primerextension)此法產(chǎn)量低,可標(biāo)記純度不太高的DNA。3.末端標(biāo)記法(end-labeling)分為5’末端和3’末端標(biāo)記。此法適用于合成的寡核苷酸探針。1.體外轉(zhuǎn)錄法此法應(yīng)用于制備RNA探針。(一)標(biāo)記探針的純化二、原代雜交的類型

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁(yè),下載文檔查看全文

此文檔下載收益歸作者所有

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁(yè),下載文檔查看全文
溫馨提示:
1. 部分包含數(shù)學(xué)公式或PPT動(dòng)畫的文件,查看預(yù)覽時(shí)可能會(huì)顯示錯(cuò)亂或異常,文件下載后無(wú)此問(wèn)題,請(qǐng)放心下載。
2. 本文檔由用戶上傳,版權(quán)歸屬用戶,天天文庫(kù)負(fù)責(zé)整理代發(fā)布。如果您對(duì)本文檔版權(quán)有爭(zhēng)議請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系客服。
3. 下載前請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔內(nèi)容,確認(rèn)文檔內(nèi)容符合您的需求后進(jìn)行下載,若出現(xiàn)內(nèi)容與標(biāo)題不符可向本站投訴處理。
4. 下載文檔時(shí)可能由于網(wǎng)絡(luò)波動(dòng)等原因無(wú)法下載或下載錯(cuò)誤,付費(fèi)完成后未能成功下載的用戶請(qǐng)聯(lián)系客服處理。
关闭