耐苯并咪唑類殺菌劑木霉菌株的篩選及耐藥機(jī)理研究

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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文耐苯并咪唑類殺菌劑木霉菌株的篩選及耐藥機(jī)理研究姓名:周紅姿申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:劉開啟2003.6.1關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文,是在導(dǎo)師指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體,均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他

2、復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名:世導(dǎo)師簽名:之上曼雀日期:建竺i:』:山山東農(nóng)業(yè)火學(xué)碩.仁學(xué)位論文摘要本文進(jìn)行了生防木霉菌株的篩選以及生防效果的測(cè)定,通過在含多菌靈平板培養(yǎng)基、紫外線照射和亞硝基胍對(duì)菌株進(jìn)行誘導(dǎo),篩選耐苯并瞇唑類殺菌劑的木霉菌株,并對(duì)木霉菌耐病相關(guān)蛋白進(jìn)行了分離純化及理化特性測(cè)定。自然界分離的木霉菌株,經(jīng)離體篩選和溫室活體篩選,共獲得8株木霉生防菌株(Ty-10—2,LT-2,T1—1·2,Tj-5—4,Ty-11-1,Tj一1l-3,Ty-11-3,Ti.3.3)。這些菌株生長速度快、抑菌作用強(qiáng),抑菌效果都在70%以上,活體

3、篩選的防效達(dá)50%以上,能有效防治黃瓜灰霉病,且效果穩(wěn)定。,將獲得的8株木霉菌在含藥平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)、紫外線照射和用亞硝基廄誘導(dǎo)。在含藥平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)篩選得到Ty.11-3,Ty_10一2,Tj一5.4和LT-24株耐多菌靈木霉菌。用紫外線和亞硝基胍誘導(dǎo)沒有篩選出耐藥性菌株。供試菌株在含藥平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h,耐藥菌株分生孢子萌發(fā),不耐藥菌株的分生孢子不萌發(fā),且耐藥菌株的菌絲前端畸形,較正常菌絲細(xì)短,生長緊湊??扇苄缘鞍缀王ッ竿っ鸽娪痉治霰砻鳎退幘曛锌扇苄缘鞍追N類及含量發(fā)生變化,細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白總含量增加。究其原因可能誘導(dǎo)處理使原木霉菌株中一些基因發(fā)生突變,或者產(chǎn)生耐性基因,使

4、耐藥相關(guān)蛋白產(chǎn)物增多,同時(shí)一些基因轉(zhuǎn)錄活性降低或者不轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致相關(guān)蛋白減少。酯酶同工酶的測(cè)定結(jié)果顯示,耐藥菌株條帶減少或者減弱,可能經(jīng)過含藥培養(yǎng)基的誘導(dǎo)處理,編碼酯酶同工酶的基因發(fā)生突變,同時(shí)也有一些基因的轉(zhuǎn)錄活性減弱甚至消失。丫

5、關(guān)鍵詞:木霉菌;多菌靈;耐藥性;可溶性蛋白;酯酶同工酶耐苯并瞇唑糞黍藩翩木褥菌株的篩選及辯藥機(jī)理姘究ABSTRACTThescreeningofbiologicalisolatesandtheassayofbioeontrolmechanismofTrichodermawerestudiedsystematicallyinlaboratorychamberan

6、dgreenhouseinvivo。AfterthetolerantrelatedproteinsinTfichodermastrainspurified,theirphysicalandchemicalcharactersweredetected.Eightbiocontrolisolateswerescreenedfromisolatesbycomparingtheirbiologicalactivitiesinvitroandvivoingreenhouse,includingTy-10·2,LT-2,Tl-l一2,蜀-5-4,強(qiáng)-11-1,Tj-11-3,黟ll·3,弼·3—3,

7、whichhadfastgrowthratesandhi}gherinhibitiontograymould(Bortrytiscinerea),andhadstableinhibition.Thediseasecouldbecontrolledby70percentand50percentinvivo+Fourisolateswerescreenedfromisolatesbyinducedbythesubstratewithcarbendazim,測(cè)raysandnitrosoguanidine,including霹一5-4,萄·3-3,Ty一11·3,LT-2.Nonehadscr

8、eenedfromUVraysandnitrosoguanidine+Afterculturedfor24hours.conidiosporesoftolerantisolatesweregerminatedbuttheonesofsensitiveisolatesdidn’t.Comparedwiththesensitiveisolates,thehyphaefrontofthetolerantisolatesisthinnera

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