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《生物制品的制備生物制品學(xué)教學(xué)課件》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、第三章生物制品的制備Preparationofbiopreparate第一節(jié)一般生物制品的制備方法(Preparationofgeneralbio-preparate)一、生物制品原料的選擇、預(yù)處理與保存方法（Selection、pretreatmentandpreservationofrawmaterialofbiopreparate）（1）原料選擇原料的選擇原則：①有效成分含量高，新鮮；②原料來(lái)源豐富，產(chǎn)地較近；③原料中雜質(zhì)含量少；④原料成本低等。原料的選擇注意事項(xiàng)：①植物原料生長(zhǎng)的季節(jié)性；②微生物原料的對(duì)數(shù)期；③動(dòng)物原料的年齡與性別。（2）原料的預(yù)處理與保存：①動(dòng)物原料：采集后要立即處
2、理，去除結(jié)締組織、脂肪組織等，并迅速冷凍貯存。②植物原料：要擇時(shí)采集并就地去除無(wú)用的部分，保鮮處理；③微生物原料：要及時(shí)將菌體細(xì)胞與培養(yǎng)液分開(kāi)，進(jìn)行保鮮處理。原料的保存方法主要有：①冷凍法。該方法適用于所有生物原料。常用-40℃速凍。②有機(jī)溶劑脫水法。常用的有機(jī)溶劑是丙酮。該法適用于原料少而價(jià)值高、有機(jī)溶劑對(duì)活性物質(zhì)沒(méi)有破壞作用的原料，如腦垂體等。③防腐劑保鮮。常用乙醇、苯酚等。該法適用于液體原料，如發(fā)酵液、提取液等。二、生物制品的提取（extraction）(1)生物組織與細(xì)胞的破碎（smashoftissueandcell）：生物制品大部分存在于生物組織或細(xì)胞中，要提高提取率，破碎過(guò)程是
3、非常重要的。常用的破碎方法：①磨切法，該法屬于機(jī)械破碎方法，設(shè)備有組織搗碎機(jī)、膠體磨、勻漿器、勻質(zhì)機(jī)、球磨機(jī)、乳缽等。②壓力法，有加壓與減壓兩種，常用的法蘭西壓釜、細(xì)菌壓等使用效果良好。③反復(fù)凍融(freezethawing)法，設(shè)備簡(jiǎn)便，活性保持好，但用時(shí)較長(zhǎng)。④超聲波振蕩破碎(ultrasonicoscillationcrash)法，該方法破碎效果較好，但由于局部發(fā)熱，對(duì)活性有損失。⑤自溶法(autolyzemethod)或酶解法(enzymolysismethod)，用得較少。（2）提取（extraction）生物組織與細(xì)胞破碎后要立即進(jìn)行提取。提取時(shí)，首先要根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，①選擇
4、提取試劑。提取試劑主要有：水、緩沖溶液、鹽溶液、乙醇、其他有機(jī)溶劑（如氯仿、丙酮等）。②考慮提取溶劑的用量及提取次數(shù)、提取時(shí)間。③注意提取的溫度、pH、變性劑等因素。三、蛋白質(zhì)類(lèi)制品的分離純化方法（Separationanddepurationofproteinproduction）包括蛋白質(zhì)、多肽和酶類(lèi)等藥物。分離純化方法有：(1)沉淀法（precipitation）：蛋白質(zhì)、酶的初步純化往往用沉淀法。原理是使蛋白質(zhì)膠體顆粒破壞，從而沉淀蛋白質(zhì)。常用的有鹽析法（saltingout）、有機(jī)溶劑沉淀法（organicsolventprecipitation）、等電點(diǎn)沉淀法（isoelectr
5、icprecipitation）、與靶物質(zhì)結(jié)合沉淀法（如抗體—抗原）（targetbandingprecipitation）等。(2)按分子大小分離的方法：有超濾法（ultrafiltration）和透析法（dialysis）（即膜分離方法）、凝膠層析法（gelchromatography）、超速離心法（ultracentrifugation）等。其中膜分離法可用于生物大分子物質(zhì)的濃縮、分級(jí)和脫鹽。(3)按分子所帶電荷進(jìn)行分離的方法氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶均為兩性電解質(zhì)。它們具有等電點(diǎn)(pI)，在離開(kāi)等電點(diǎn)的pH時(shí)便會(huì)帶正或負(fù)電荷。例如某蛋白質(zhì)等電點(diǎn)為7.0，當(dāng)溶液pH為4.0時(shí)，分子則帶有
6、正電荷。由于具有該性質(zhì)，利用帶電性質(zhì)進(jìn)行分離是極其有效的方法。利用電學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分離的方法有離子交換柱層析法（ion-exchangechromatography）、電泳法（electrophoresis）、等電聚焦法（isoelectricfocusing）等。（4）親和層析法（affinitychromatography）大部分生物活性物質(zhì)都有其作用的靶物質(zhì)，如酶與底物(Substrate)（或抑制劑(inhabitor)）、抗原與抗體、激素(hormone)與受體(receptor)等，它們之間有特異的親合作用，利用該性質(zhì)設(shè)計(jì)的特異層析分離技術(shù)稱(chēng)為親和層析。親和層析分離專(zhuān)一性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便
7、，是當(dāng)前應(yīng)用很廣泛的分離方法之一。另外，最近出現(xiàn)的新方法還有疏水層析（hydrophobicchromatography）等。四、核酸類(lèi)制品的分離純化方法（Separationandpurificationofnucleicacid）核酸類(lèi)藥物生產(chǎn)方法主要有提取法和發(fā)酵法。提取法生產(chǎn)DNA和RNA，先提取核酸和蛋白質(zhì)復(fù)合物，再解離核酸與蛋白質(zhì)，然后分離RNA與DNA。發(fā)酵法主要用于生產(chǎn)單核苷酸。0五、糖類(lèi)制品
