生物制品 第三章生物制品課件

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1、第三章滅活劑、保護劑、與免疫增強劑第一節(jié)滅活劑一、滅活與滅活劑(一)滅活:殺死病原微生物,但不影響免疫原性;其次是破壞血清的補體,以免干擾血清學反應結(jié)果。滅活劑:滅活微生物的化學試劑。滅活方法:物理滅活:加熱、超聲波及射線滅活微生物,此方法免疫原性易破壞,現(xiàn)很少使用(血清56°C半小時滅活補體用此方法)?;瘜W滅活:用化學試劑將病原微生物殺死,此方法經(jīng)常使用。二、常用的滅活劑種類和原理(一)甲醛:是最古老常用的滅活劑,現(xiàn)在我國用的26種滅活疫苗,均以甲醛為滅活劑。性質(zhì):甲醛為刺鼻的氣體,水溶液叫福爾馬林,濃度為36%-40%。10°C以下易聚

2、合成三聚甲醛或多聚甲醛,為白色沉淀。原理:甲醛的醛基起滅活作用,可使蛋白質(zhì)的氨基→羥甲基胺羧基→亞甲基二醇單酯羥基→羥甲基酚巰基→硫代亞甲基二醇濃度:需氧菌甲醛濃度到0、1%--0、2%.厭氧菌0、4%--0、8%.病毒0、05%--0、4%.原則是濃度低,時間短,溫度低可以滅活細菌,盡量減少破壞抗原(通常加入量,以甲醛含量量計算,折合福爾馬林濃度)。(二)烷化劑:將烷基引入,形成烷基取代物,使微生物變性死亡。原理:主要破壞病毒的核酸,作用于A:G堿基,引起DNA單鏈斷裂或雙鏈鉸連。此類常用于病毒滅活,種類有AEI—N-乙酰乙烯亞胺,加入濃

3、度到0、05%。BEI—二乙烯亞胺,濃度0、02%;EEI—2—乙基乙烯亞胺,GDA—縮水甘油醛。滅活后加硫代硫酸鈉可終止滅活,防止抗原損失。保存:AEI,0--4°C一年,--20°C二年;BEI0--4°C保存一個月。(三)苯酚(石碳酸)人類用的第一個消毒藥,具有特殊氣味的無色結(jié)晶,易潮解成水溶液,與光、氧后顏色變紫色。原理:蛋白質(zhì)變性以及抑制氧化脫氫酶,芽孢和病毒對它抵抗力強。滅活濃度:抑菌作用是0、2—0、5%(血清防腐),殺菌是1%,殺葡萄球菌是3%。消毒常用它的衍生物,來蘇兒(甲酚皂)3—5%濃度,特殊氣味,覆蓋其他氣味,也是醫(yī)

4、院常用的。(JosephLister,1827~1912)首創(chuàng)用石炭酸噴灑手術室和煮沸手術用具以防術后感染,為防腐、消毒,以及無菌操作奠定了基礎。(四)結(jié)晶紫(龍膽紫),也叫紫藥水,堿性染料,也叫甲紫或甲基青蓮,化學名,六甲基副玫瑰苯胺。原理:堿性陽離子可結(jié)合細菌陰離子羧基;干擾細胞壁粘肽合成;常作用于革蘭氏陽性菌。生物制品的應用有豬瘟結(jié)晶紫疫苗,雞白痢染色抗原。(五)β—丙酰內(nèi)酯良好病毒滅活劑,性狀是無色有氣味液體,易潮解和高溫失效,5°C密封保存好,現(xiàn)主要用于狂犬滅活苗。另還有防治細菌霉菌生長的防腐劑:硫柳汞(乙基汞硫代水楊酸鈉),疊氮

5、鈉(NaN3)它們使用濃度0、01-0、02%??煞乐寡甯瘮?。三、影響滅活作用的因素(一)藥物的特異性:酚類不能殺滅真菌和病毒,陽離子的結(jié)晶紫,主要作用于G+菌。(二)微生物的種類和特異性:G+菌和G-菌對藥物敏感不一樣,繁殖體和芽孢對藥物敏感也不一樣。(三)藥物濃度:濃度愈大,滅活越快,抗原也損失大;但是,95%酒精沒75%酒精殺滅細菌好。(四)溫度:溫度與滅活成正比,每升高10度,金屬類殺菌作用增加2—5倍。但高溫超過40°C,抗原也損失大。(五)時間:滅活時間與溫度和濃度成反比,即滅活殺菌長,溫度舊低,濃度也低,就可以殺滅細菌。(六

6、)pH:堿性快,酸性慢,酸性環(huán)境對抗原保護好。(七)有機物存在:環(huán)境的有機物減低滅活的效果,微生物也是有機物。四、滅活疫苗時的注意事項2人參加滅活,注意藥品名和量,滅活后標記。37°C滅活一天后,接種適宜培養(yǎng)基—無菌檢查。動物試驗,滅活苗制成后,注射小白鼠0、2ml,兩只,觀察3天。使用試驗:用戶可先注射1-2頭,觀察1—2天,看有無過敏,應激等反應,證明安全,才全群使用。思考題:什么叫滅活和滅火劑?滅活劑的種類有哪些?影響滅活的因素是什么?滅活的注意事項有哪些?第二節(jié)保護劑保護劑也叫穩(wěn)定劑,是防止微生物在凍干過程中受到破壞。按作用原理分兩

7、類:滲透劑:能滲入細胞,使胞內(nèi)外滲透壓平衡,防止慢凍時損傷細胞。有甘油,蔗糖,二甲基亞砜。非滲透劑:防止細胞內(nèi)外物質(zhì)交換在速凍時保護細胞。有蛋白質(zhì),聚乙烯吡咯酮。按保護劑分子量分類:低分子量保護劑:糖、氨基酸類。高分子量保護劑:脫脂牛奶、明膠。按化學性質(zhì)分類:復合物:脫脂牛奶,血清。糖類:蔗糖、乳糖。鹽類:乳酸鈣、谷氨酸鈉。醇類:甘油,山梨醇,甘露醇。酸類:檸檬酸,氨基酸。聚合物:葡聚糖,聚乙烯吡咯酮。一、凍干保護劑的組成和作用按組成將保護劑分為營養(yǎng)液,賦形劑,抗氧化劑。營養(yǎng)液:使受損細胞修復:脫脂牛奶,蛋白質(zhì),氨基酸,糖類。賦形劑:骨架作

8、用,制品形成網(wǎng)孔結(jié)構(gòu),易溶解----蔗糖,乳糖??寡趸瘎罕Wo酶類,防止氧化—VC,VE,硫代硫酸鈉。保護劑的作用:防止細胞內(nèi)水結(jié)晶和細胞失去水分。平衡細胞內(nèi)外滲透壓,防止細胞破

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