番茄下胚軸和子葉組織培養(yǎng)和植株再生的研究

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1、番茄下胚軸和子葉組織培養(yǎng)和植株再生的研究郟艷紅,王姝(天津市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心,天津300192)摘要: 以番茄幼苗的下胚軸和子葉為外植體,研究不同激素培養(yǎng)基對其愈傷組織、不定芽誘導(dǎo)及生根的影響。結(jié)果表明:以MS為基本培養(yǎng)基,NAA0.7mg/L濃度時(shí)LA2711在6-BA0.7mg/L,Liger在6-BA1.0mg/L濃度時(shí)對子葉和下培軸誘導(dǎo)愈傷效果最好;在6-BA2.0mg/L濃度時(shí),LA2711在IAA0.3mg/L,Liger在IAA0.1mg/L條件下分化率最高。關(guān)鍵詞:番茄,下胚軸,子葉,愈

2、傷組織。TheStudyofTheTissueCultureandPlantletRegenerationfromHypocotylsandCotyledonofTomatoJIAYan-hong,WANGShu(TianjinResearchCenterofAgricultureBiotechnology,Tianjin300192,China)Abstract: Withhypocotylsandcotyledonoftomatoseedlingsastheexplants,theeffectsofme

3、diumswithdifferenthormoneoncallus,adventitiousbudinduction,androotingoftheexplantswerestudied.Theresultsshowedthatit’seffectwasthebestthatusing0.7mg/L6-BAconcentrationand1.0mg/L6-BAconcentrationinductedcallusofhypocotylsandcotyledonofLA2711tomatoandLigerto

4、matoinMSmediumwithNAA0.7mg/L.In2.0mg/L6-BAlevel,it’seffectwasthebestthatusing0.3mg/LIAAlevelinducteddifferentiationofLA2711tomato,andit’seffectwasthebestthatusing0.1mg/LIAAlevelinducteddifferentiationofLigertomato.Keywords:Tomato;Hypocotyls;Cotyledon,tissu

5、eculture.番茄(LycopersiconesculentumMill)是一種營養(yǎng)價(jià)值高、栽培面積廣的果菜兩用蔬菜,其中含有的番茄紅素具有抗氧化及抗衰老等功能。番茄是最早進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化研究的高等植物之一。番茄根、莖、葉、花藥和胚等器官進(jìn)行離體培養(yǎng)均獲得再生植株[1-4],在分子生物學(xué)及基因工程研究中廣泛應(yīng)用。番茄在組織培養(yǎng)中的植株再生能力與番茄的基因型、外植體類型以及培養(yǎng)基中添加的激素等因素密切相關(guān)。我們以番茄LA2711和Liger為材料,以子葉和下胚軸為外植體,篩選其再生體系。1試驗(yàn)材料和方法1.1

6、誘導(dǎo)無菌苗作者簡介:郟艷紅(1976-),女,山東濟(jì)寧人,助理研究員,碩士,主要從事番茄分子育種及耐鹽方面的研究。資助項(xiàng)目:天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目,08ZHNZNC03900以番茄LA2711和Liger為材料,挑選飽滿的番茄種子,用75%酒精滅菌30s,分別用0.1%的升汞和4%的次氯酸鈉滅菌,無菌水沖洗3次。番茄種子放入1/2MS+3%蔗糖固體培養(yǎng)基中恒溫培養(yǎng),光照16h,2000-3000lx,溫度(25±1)℃。1.2愈傷組織誘導(dǎo)番茄苗生長一周后,取兩片子葉完全展開的無菌苗,以子葉和下胚軸為外植

7、體,將子葉橫切為三部分,下胚軸為0.5cm。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA(0.7、1.0、1.5mg/L)+NAA(0.7、1.0、1.3mg/L)+3%蔗糖,pH6.0。光照16h,2000-3000lx,溫度(25±1)℃。20天后統(tǒng)計(jì)出愈率。出愈率=產(chǎn)生愈傷組織的外植體塊數(shù)/接種總外植體塊數(shù)×100%。1.3分化培養(yǎng)取子葉和下胚軸(0.5cm)接種至分化培養(yǎng)基上,分化培養(yǎng)基MS+6-BA2.0mg+IAA(0.1、0.2、0.3mg/L)+3%蔗糖,PH6.0,光照16h,2000-3000lx,

8、溫度(25±1)℃。20天后統(tǒng)計(jì)不定芽的誘導(dǎo)率。不定芽的誘導(dǎo)率=分化出不定芽的愈傷組織數(shù)/接種總外植體數(shù)×100%。1.4生根培養(yǎng)取長至4-5葉的番茄苗,移植到生根培養(yǎng)基上,生根培養(yǎng)基:MS+IBA(0.1、0.2、0.3mg/L)+3%蔗糖,pH6.0。光照16h,2000-3000lx,溫度(25±1)℃。2結(jié)果分析2.1消毒液對種子發(fā)芽的影響表1消毒液對種子發(fā)芽率的影響消毒方法處理時(shí)間出苗時(shí)間發(fā)芽率污染率7

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