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1、凝聚胺法在交叉配血試驗結果的分析【摘要】對405名受血者標本與其同型獻血員標本做交叉配血，譜細胞反應分別用抗人球蛋法和凝聚胺法測定。結果分析得出凝聚胺法具有操作簡便、快速、敏感性強和結果清晰等優(yōu)點,是目前基層醫(yī)院急診配血時交叉配血試驗比較理想的方法?！娟P鍵詞】凝聚胺檢測技術交叉配血中圖分類號：r446.1文獻標識碼：b文章編號：1005-0515（2012）1-344-01交叉配血試驗是臨床上確保安全有效輸血的重要手段。傳統(tǒng)的鹽水配血法雖然簡便快捷，但只能檢出不現(xiàn)相配合的完全抗體，而不能發(fā)現(xiàn)不完全抗體?？谷饲虻鞍追m然能檢出不完全抗體，但實驗操作步驟繁瑣、耗時長、易耽誤危重病人的搶救時間。微柱
2、凝膠技術融合了分子篩技術、離心技術和免疫反應技術，具有標本用量少，靈敏度高，特異性強，操作簡便，結果可長期保持優(yōu)點。凝聚胺法具有操作簡便、快速、敏感性強和結果清晰等優(yōu)點,是目前基層醫(yī)院交叉配血理想的方法。需要注意的是出現(xiàn)配血不合的標本最好微柱凝膠法和凝聚胺法聯(lián)合應用?，F(xiàn)將凝聚胺檢測技術在本血站應用的結果作一闡述與分析。1材料與方法1.1試劑polybrene試劑(包括低離子介質緩沖液、凝聚胺溶液和重新懸浮液)珠海貝索生物技術有限公司產(chǎn)品；抗人球蛋白試劑、譜細胞由廣州市血液中心提供。1.2標本2005年至2010年大連市中心血站由各醫(yī)院提供送檢的標本共405例受血者標本與其同型獻血員標本做交叉配
3、血。1.3方法凝聚胺檢測技術：在主側管內(nèi)加受檢血清2滴和獻血員2%紅細胞懸液2滴,次側管加入獻血員血清2滴和受檢者2%紅細胞懸液2滴；各管分別加入低離子介質0.6ml,混勻,于室溫下靜置1min；各管加入凝聚胺2滴,混勻,3500r/min離心15s,移去上清液,觀察管底紅細胞有無凝塊(如無凝塊必須重做)；加重新懸浮液2滴,輕輕搖動觀察凝塊是否散開,若為凝聚胺引起的非免疫性凝集在1min內(nèi)即自然散開，若是特異性抗原抗體引起的凝集即不會散開,必要時可在顯微鏡下觀察；常規(guī)法按《全國臨床檢驗操作規(guī)程第三版》操作。2結果檢測中共發(fā)現(xiàn)29例冷凝集引起的假陽性。11例纖維蛋白網(wǎng)羅紅細胞導致假陽性，4例自身
4、抗體，3例同種抗體，2例在凝聚胺交叉配血中紅細胞不出現(xiàn)非特異性可逆凝集。2.1檢測共發(fā)現(xiàn)29例冷凝集引起的假陽性受血者血清中含有冷凝集素，效價為4～256，間接抗人球蛋白試驗陽性。解決此類假陽性的方法可在最后將試管置入37℃水浴中，輕輕搖晃試管使冷凝集散去，并在30s內(nèi)觀察結果。2.2檢測共發(fā)現(xiàn)11例纖維蛋白網(wǎng)羅紅細胞導致假陽性假陽性的凝集結果很容易與抗原抗體反應的凝集區(qū)分。為慎重起見，只須將標本置于37℃20min～30min，待血清自然析出，再重新做實驗。2.3檢測共發(fā)現(xiàn)4例自身抗體。在凝聚胺法交叉配血試驗中有2例主、次管均凝集，直接、間接抗人球蛋白試驗陽性。2例次側管凝集，直接抗人球蛋白
5、試驗陽性。證實為自身抗體。2.4檢測共發(fā)現(xiàn)3例同種抗體其中2例在交叉配血的主側管凝集，后經(jīng)譜細胞實驗證實標本血清中分別含有抗e和抗c。凝聚胺法測得效價分別為1∶4和1∶16，抗人球蛋法分別為1∶4和1∶8。發(fā)現(xiàn)1例在新生兒紅細胞放散液中發(fā)現(xiàn)抗體，證實為igg抗a。凝聚胺法測得效價為1∶128，抗人球蛋法為1∶128。2.5檢測共發(fā)現(xiàn)2例在凝聚胺交叉配血中紅細胞不出現(xiàn)非特異性可逆凝集，考慮為藥物干擾影響。解決方法是在凝聚胺法的第三步倒掉上清液，再加凝聚胺溶液離心,若出現(xiàn)非特異性可逆凝集便已消除干擾,若不行則要重新抽取不受藥物干擾的標本。3討論以上結果說明凝聚胺交叉配血既可以檢出完全抗體,又可以檢
6、出有臨床意義的不完全抗體,有效地避免了遲發(fā)性溶血性輸血反應的發(fā)生,給臨床治療診斷提供了有效的科學依據(jù)。雖然存在冷凝集、纖維蛋白和一些藥物的干擾，只要在配血過程中多留心、多分析，這些問題還是比較容易解決的。在凝聚胺交叉配血中，加入的低離子介質緩沖液、凝聚胺溶液在離心后棄去對標本有稀釋和洗滌作用，可使結果明顯清晰，而無鹽水法受血漿物質干擾的問題。上面解決藥物的干擾也是基于此原理。傳統(tǒng)的交叉配血法有鹽水介質法、酶法、抗人球蛋白法。鹽水介質法雖然簡便快速,但不能發(fā)現(xiàn)不完全抗體,單用該法配血有危險性,需要增加酶法或抗人球蛋白法,才能避免不完全抗體引起的配血不合,達到安全輸血。但酶法或抗人球蛋白法的實驗步
7、驟繁瑣、試驗反應時間長,一般需要20min～1h,往往會耽誤搶救治療工作。國內(nèi)一些大醫(yī)院新近引進的微柱凝膠試驗交叉配血同樣存在配血時間長的問題。筆者從實驗中得出，用凝聚胺法配一標本平均費時6min，若同時作多份標本，平均費時則更短,滿足臨床急診輸血的需要。綜上所述，凝聚胺法用于血型血清學檢查的各項實驗中，結果是令人滿意的。它成功地降低了輸血反應，節(jié)約了實驗時間，其操作方法簡便，快速，結果清晰,是目
