凝聚胺法在交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的分析

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1、凝聚胺法在交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的分析【摘要】對(duì)405名受血者標(biāo)本與其同型獻(xiàn)血員標(biāo)本做交叉配血，譜細(xì)胞反應(yīng)分別用抗人球蛋法和凝聚胺法測(cè)定。結(jié)果分析得出凝聚胺法具有操作簡(jiǎn)便、快速、敏感性強(qiáng)和結(jié)果清晰等優(yōu)點(diǎn),是目前基層醫(yī)院急診配血時(shí)交叉配血試驗(yàn)比較理想的方法。【關(guān)鍵詞】凝聚胺檢測(cè)技術(shù)交叉配血中圖分類號(hào)：r446.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：b文章編號(hào)：1005-0515（2012）1-344-01交叉配血試驗(yàn)是臨床上確保安全有效輸血的重要手段。傳統(tǒng)的鹽水配血法雖然簡(jiǎn)便快捷，但只能檢出不現(xiàn)相配合的完全抗體，而不能發(fā)現(xiàn)不完全抗體?？谷饲虻鞍追m然能檢出不完全抗體，但實(shí)驗(yàn)操作步驟繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、易耽誤危重病人的搶救時(shí)間。

2、微柱凝膠技術(shù)融合了分子篩技術(shù)、離心技術(shù)和免疫反應(yīng)技術(shù)，具有標(biāo)本用量少，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果可長(zhǎng)期保持優(yōu)點(diǎn)。凝聚胺法具有操作簡(jiǎn)便、快速、敏感性強(qiáng)和結(jié)果清晰等優(yōu)點(diǎn),是目前基層醫(yī)院交叉配血理想的方法。需要注意的是出現(xiàn)配血不合的標(biāo)本最好微柱凝膠法和凝聚胺法聯(lián)合應(yīng)用?，F(xiàn)將凝聚胺檢測(cè)技術(shù)在本血站應(yīng)用的結(jié)果作一闡述與分析。1材料與方法1.1試劑polybrene試劑(包括低離子介質(zhì)緩沖液、凝聚胺溶液和重新懸浮液)珠海貝索生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；抗人球蛋白試劑、譜細(xì)胞由廣州市血液中心提供。1.2標(biāo)本2005年至2010年大連市中心血站由各醫(yī)院提供送檢的標(biāo)本共405例受血者標(biāo)本與其同型獻(xiàn)血員標(biāo)本

3、做交叉配血。1.3方法凝聚胺檢測(cè)技術(shù)：在主側(cè)管內(nèi)加受檢血清2滴和獻(xiàn)血員2%紅細(xì)胞懸液2滴,次側(cè)管加入獻(xiàn)血員血清2滴和受檢者2%紅細(xì)胞懸液2滴；各管分別加入低離子介質(zhì)0.6ml,混勻,于室溫下靜置1min；各管加入凝聚胺2滴,混勻,3500r/min離心15s,移去上清液,觀察管底紅細(xì)胞有無(wú)凝塊(如無(wú)凝塊必須重做)；加重新懸浮液2滴,輕輕搖動(dòng)觀察凝塊是否散開(kāi),若為凝聚胺引起的非免疫性凝集在1min內(nèi)即自然散開(kāi)，若是特異性抗原抗體引起的凝集即不會(huì)散開(kāi),必要時(shí)可在顯微鏡下觀察；常規(guī)法按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版》操作。2結(jié)果檢測(cè)中共發(fā)現(xiàn)29例冷凝集引起的假陽(yáng)性。11例纖維蛋白網(wǎng)羅紅細(xì)胞導(dǎo)致假陽(yáng)

4、性，4例自身抗體，3例同種抗體，2例在凝聚胺交叉配血中紅細(xì)胞不出現(xiàn)非特異性可逆凝集。2.1檢測(cè)共發(fā)現(xiàn)29例冷凝集引起的假陽(yáng)性受血者血清中含有冷凝集素，效價(jià)為4～256，間接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。解決此類假陽(yáng)性的方法可在最后將試管置入37℃水浴中，輕輕搖晃試管使冷凝集散去，并在30s內(nèi)觀察結(jié)果。2.2檢測(cè)共發(fā)現(xiàn)11例纖維蛋白網(wǎng)羅紅細(xì)胞導(dǎo)致假陽(yáng)性假陽(yáng)性的凝集結(jié)果很容易與抗原抗體反應(yīng)的凝集區(qū)分。為慎重起見(jiàn)，只須將標(biāo)本置于37℃20min～30min，待血清自然析出，再重新做實(shí)驗(yàn)。2.3檢測(cè)共發(fā)現(xiàn)4例自身抗體。在凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)中有2例主、次管均凝集，直接、間接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。2例次側(cè)管凝集

5、，直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。證實(shí)為自身抗體。2.4檢測(cè)共發(fā)現(xiàn)3例同種抗體其中2例在交叉配血的主側(cè)管凝集，后經(jīng)譜細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)標(biāo)本血清中分別含有抗e和抗c。凝聚胺法測(cè)得效價(jià)分別為1∶4和1∶16，抗人球蛋法分別為1∶4和1∶8。發(fā)現(xiàn)1例在新生兒紅細(xì)胞放散液中發(fā)現(xiàn)抗體，證實(shí)為igg抗a。凝聚胺法測(cè)得效價(jià)為1∶128，抗人球蛋法為1∶128。2.5檢測(cè)共發(fā)現(xiàn)2例在凝聚胺交叉配血中紅細(xì)胞不出現(xiàn)非特異性可逆凝集，考慮為藥物干擾影響。解決方法是在凝聚胺法的第三步倒掉上清液，再加凝聚胺溶液離心,若出現(xiàn)非特異性可逆凝集便已消除干擾,若不行則要重新抽取不受藥物干擾的標(biāo)本。3討論以上結(jié)果說(shuō)明凝聚胺交叉配血既可以檢

6、出完全抗體,又可以檢出有臨床意義的不完全抗體,有效地避免了遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生,給臨床治療診斷提供了有效的科學(xué)依據(jù)。雖然存在冷凝集、纖維蛋白和一些藥物的干擾，只要在配血過(guò)程中多留心、多分析，這些問(wèn)題還是比較容易解決的。在凝聚胺交叉配血中，加入的低離子介質(zhì)緩沖液、凝聚胺溶液在離心后棄去對(duì)標(biāo)本有稀釋和洗滌作用，可使結(jié)果明顯清晰，而無(wú)鹽水法受血漿物質(zhì)干擾的問(wèn)題。上面解決藥物的干擾也是基于此原理。傳統(tǒng)的交叉配血法有鹽水介質(zhì)法、酶法、抗人球蛋白法。鹽水介質(zhì)法雖然簡(jiǎn)便快速,但不能發(fā)現(xiàn)不完全抗體,單用該法配血有危險(xiǎn)性,需要增加酶法或抗人球蛋白法,才能避免不完全抗體引起的配血不合,達(dá)到安全輸血。但酶

7、法或抗人球蛋白法的實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣、試驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),一般需要20min～1h,往往會(huì)耽誤搶救治療工作。國(guó)內(nèi)一些大醫(yī)院新近引進(jìn)的微柱凝膠試驗(yàn)交叉配血同樣存在配血時(shí)間長(zhǎng)的問(wèn)題。筆者從實(shí)驗(yàn)中得出，用凝聚胺法配一標(biāo)本平均費(fèi)時(shí)6min，若同時(shí)作多份標(biāo)本，平均費(fèi)時(shí)則更短,滿足臨床急診輸血的需要。綜上所述，凝聚胺法用于血型血清學(xué)檢查的各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果是令人滿意的。它成功地降低了輸血反應(yīng)，節(jié)約了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，其操作方法簡(jiǎn)便，快速，結(jié)果清晰,是目