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1、草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究草珊瑚總黃酮的微波提取研究囝2010,VoI27No.1億與生物Z程Chemistry&Bioengineering草珊瑚總黃酮的微波提取研究劉仙金.周文富(三明學(xué)院化學(xué)與生物工程系,福建三明365004)摘要:研究了草珊瑚中總黃酮的微波提取工藝.探討了微波功率,微波作
2、用時(shí)問,乙醇體積分?jǐn)?shù)和固液比等因素對(duì)草珊瑚總黃酮提取率的影響,通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定最佳的提取條件如下:乙醇體積分?jǐn)?shù)60,固液比1:40(g:mL),微波功率400W,微波加熱時(shí)間30S,間歇作用3次,此時(shí)總黃酮的提取率為9.394.微波法是提取草珊瑚總黃酮高效快速的方法.關(guān)鍵詞:草珊瑚;總黃酮;微波提取;HPLC中圖分類號(hào):TQ461R282.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1672—5425(2009)01—0044—05草珊瑚(Sarcandraeglabra)又名腫節(jié)風(fēng),九節(jié)茶,竹節(jié)草,鴨腳節(jié),牛膝頭等,屬于金粟蘭科草珊瑚屬,其昧苦,辛,性溫,有小毒,有驅(qū)風(fēng)通絡(luò),活血祛淤,止
3、血止痛,接骨續(xù)筋之功效,民間常用來治療風(fēng)濕痹癥,跌打損傷等[】叫],多為全草人藥.?臨床上草珊瑚主要用于治療腫瘤,胃潰瘍,細(xì)菌性痢疾,骨折及各種口腔疾病.草珊瑚主要分布在四川,云南,貴州,安徽,福建,江西等地,資源豐富.草珊瑚中含量最多,最主要的藥用成分是黃酮類化合物[4].草珊瑚總黃酮具有抗菌消炎,清熱解毒,抗腫瘤,促進(jìn)骨折愈合等多種生物活性叫.毒理學(xué)研究表明,草珊瑚及其提取物具有較好的安全性[1.因此,近年來,草珊瑚活性成分的高效提取一直是國內(nèi)外研究的重要課題.目前,黃酮類化合物的常規(guī)提取方法主要有冷浸法,滲漉法,煎煮法,回流提取法,稀醇提取法和微波法.其中微波法具有選擇性高,操
4、作時(shí)間短,溶劑消耗少,提取率高,不產(chǎn)生噪音等優(yōu)點(diǎn),適用于熱不穩(wěn)定生物質(zhì)藥材的提取[1].本研究采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)對(duì)三明地區(qū)基因工程選育的草珊瑚總黃酮進(jìn)行提取,得出最佳的工藝條件,擬為三明地區(qū)基因工程選育的草珊瑚的開發(fā)利用提供有益的參考.1實(shí)驗(yàn)1.1原料,試劑與儀器草珊瑚葉片采自福建三明市吉口天然藥物種植基地.蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,中國藥品生物制品檢定所;95乙醇,亞硝酸鈉,硝酸鋁,氫氧化鈉,磷酸,分析純;甲醇,色譜純;水為超純水.LWMC-205型可調(diào)功率微波化學(xué)反應(yīng)器,南京陵江科技開發(fā)有限責(zé)任公司;722S型可見分光光度計(jì),FA1604N型電子天平,上海精密科學(xué)儀器有限公司;UV一11
5、00型紫外可見分光光度計(jì),北京瑞利;SHB一3型循環(huán)水式多用真空泵,鄭州杜甫儀器廠;800型離心沉淀器(4000r?min),上海手術(shù)器械廠;360型FT—IR紅外光譜儀,美國Nicolet公司;1200型高效液相色譜儀,美國安捷倫公司.1.2方法1.2.1草珊瑚總黃酮的提取精確稱取0.5g草珊瑚葉片粉末(過120目篩)于錐形瓶中,加入一定量不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的乙醇搖勻,將瓶口用保鮮膜覆蓋,浸泡1h,在一定功率下微波提取一定時(shí)間,抽濾,濾液加水定容.1.2.2草珊瑚總黃酮的測(cè)定1.2.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精密稱取10.4mg已烘干至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,置100mL容量瓶中,用60乙醇溶解并定
6、容至刻度,搖勻,得到濃度為0.104mg?mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液.1.2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液顯色后在400~600nm波長范圍內(nèi)掃描,確定最大吸收波長為510nm.精密量取蘆基金項(xiàng)目:三明市天然藥用植物資源開發(fā)利用研究中心資助項(xiàng)目(HX2OO801)收稿日期:2009—09—05’作者簡介:劉仙金(1986一),女,福建寧德人,碩士研究生,研究方向:中草藥提取與藥物合成;通訊作者:用文富,教授.E-reall:zff79@sina.corn.劉仙金等:草珊瑚總黃酮的微波提取研究/2010年簟1朋丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0mL,0.5mL,1.0mL,2.0mL,3.0mL,4.0mL,
7、5.0mL分別置于10mL容量瓶中,各加6O乙醇至5mL;各加5亞硝酸鈉溶液0.3mL,搖勻,放置6min;再各加10%硝酸鋁溶液0.3mL,搖勻,放置6min;最后各加4氫氧化鈉溶液4mL,并用60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,靜置15min;在51Ortm處測(cè)定吸光度.以蘆丁濃度(.z)為橫坐標(biāo),吸光度(.),)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,見圖1.擬合線性回歸方程為:y一1.6894×10+0.013175x;R一0.9999.圖1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1Thest